急性冠脉综合征血清MMP-2，MMP-9及hs-CRP水平的检测及其临床意义

　　作者：胡开宇，蔡雪黎，张怀勤，计光，王忠永 作者单位：温州医学院附属第一医院，浙江 温州 325000，1.心血管内科;2实验诊断中心

　　【摘要】 目的 ：观察急性冠脉综合征患者外周静脉血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平并评价其临床意义。方法 ：选取急性冠脉综合征患者53例为ACS组，其中急性心肌梗死(AMI)28例，不稳定型心绞痛(UA)25例。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MMP-2，MMP-9水平，用免疫散射比浊法检测血清hs-CRP。另选稳定型心绞痛组(SA)28例、正常对照组30例作为对照。结果 ：ACS组血清MMP-2，MMP-9，hs-CRP的水平高于SA组(P <0.05)及对照组(P <0.01)。AMI组血清MMP-2，MMP-9，hs-CRP的水平显著高于UA组(P <0.05)。ACS组患者血清MMP-9与hs-CRP水平呈正相关，MMP-2与hs-CRP无明显相关性。AMI组患者血清hs-CRP与cTnI水平呈正相关(r =0.401，P <0.05)。结论 ：MMP-2，MMP-9在ACS中的高表达与急性冠脉综合征的发生有关，可作为预测动脉粥样斑块不稳定或破裂的血清学指标，其水平有利于冠心病患者的危险分层。联合检测血清MMP-2，MMP-9与hs-CRP可能成为一种有效的判断斑块稳定性、预测急性心血管事件发生的临床指标。

　　【关键词】 冠脉综合征 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 超敏C反应蛋白

　　急性冠脉综合征(ACS)是以不稳定型心绞痛(UA)及急性心肌梗死(AMI)为临床表现的严重冠心病类型。近年研究表明炎症在ACS发生、发展中起着重要作用。C反应蛋白(CRP)是一项反映机体炎症过程最具有标志性的因子，被认为在ACS的发病及预后中起重要作用。基质金属蛋白酶(MMPs)通过降解赋予斑块完整性的细胞外基质(ECM)促使斑块破裂，导致ACS发生。如何及时识别或检出不稳定斑块已成为研究的热点。本研究检测了不同冠心病患者的血清MMP-2，MMP-9及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平，探讨上述指标与ACS的关系。

　　1 资料和方法

　　1.1 一般资料 所有入选者均为2006年6月-2007年12月住院及门诊患者。ACS组53例，男34例，女19例。其中AMI 组28例，男18例，女10例;UA组25例，男16例，女9例。稳定型心绞痛(SA)组28例，男19例，女9例，年龄(63.2±9.8)岁。正常对照组30例，男20例，女10例，年龄(62.0±8.9)岁。所有入选者近3个月未服用过他汀类药物。所有冠心病患者均行选择性冠状动脉造影(CAG)检查。ACS组排除入院前行经静脉溶栓或急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)的患者。各实验组一般临床资料见表1。AMI组所有病例均符合WHO的AMI诊断标准。UA组和SA组病例符合美国心脏学学会/美国心脏协会诊断标准。正常对照组为门诊进行健康体检者，无心血管病史，经体格检查及实验室检查、心电图、胸片、心脏超声检查健康，与实验组性别、年龄、社会背景相匹配的人群，自愿参与研究。排除有下列情况之一者：肝纤维化，感染或肿瘤，近期重大外伤、手术，脑血管和周围血管病，自身免疫性疾病，严重肝肾疾病，严重的全身其他系统疾病，近期服用抗炎药，心肌炎或心力衰竭。

　　1.2 方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MMP-2、MMP-9，试剂盒购自晶美生物工程有限公司，由美国R&D systems公司生产;酶标仪为西班牙变色龙全自动酶免仪Bio-Asia TRITURUS。用免疫散射比浊法检测血清hs-CRP(美国Beckman公司IMMAGE蛋白分析系统)，试剂盒采用美国Beckman公司配套试剂。AMI患者于发病24 h内，UA、SA患者入院后即刻，正常对照组于清晨空腹抽血，采肘静脉血5 mL，2 h内离心(3 000 r/min，10 min)取得血清，分管置于-70 °C冰箱中待用。严格按照试剂盒操作步骤进行MMP-2，MMP-9测定。

　　1.3 统计学处理方法 计数资料用x2检验表示，多样本均数比较用方差分析，两样本的均数比较用独立样本t 检验。各指标的相关性分析采用Bivariate过程的Pearson等级相关法。

　　2 结果

　　2.1 3组患者MMP-2，MMP-9，hs-CRP水平比较 见表2。

　　2.2 ACS组亚组分析 见表3。

　　2.3 相关性分析 ACS组患者血清MMP-2与hs-CRP水平无显著相关(r =0.27，P =0.05)，MMP-9与hs-CRP水平呈正相关(r =0.601，P<0.01)。AMI组患者血清肌钙蛋白I(cTnI)水平为(9.01±11.47)ng/mL，MMP-2，MMP-9水平与cTnI无显著相关(均P>0.05)，MMP-2，MMP-9与hs-CRP有显著相关(r =0.379， P <0.05和r =0.606，P <0.01)，hs-CRP水平与cTnI有显著相关(r =0.401，P<0.05)。

　　3 讨论

　　ACS起病凶险，往往使患者致死、致残，故早期识别此类患者并做出处理有很大的临床益处。但从本组资料也可看出ACS患者与SA在一般资料(高血压、糖尿病、血脂)中差异无显著性，一般资料不能提供足够的鉴别信息。现在已明确ACS的发生与斑块的不稳定相关，而MMPs是一种Zn离子依赖性的内肽酶所组成的水解蛋白酶家庭，表达过量可引起ECM降解增加、纤维帽变薄，导致斑块变得易损。MMP-2称为明胶酶A，MMP-9称为明胶酶B，它们在动脉粥样硬化斑块内ECM的降解中起主要作用。Fiotti等[1]通过对ACS和SA患者行PCI治疗时利用远端保护装置收集的斑块组织中的明胶酶(MMP-2、MMP-9)进行了检测，结果显示ACS患者中明胶酶含量明显高于SA患者，说明MMPs活性增高是斑块不稳定性的生化基础。研究还发现在不稳定斑块，特别是易发生破裂的斑块肩部区域，MMPs的含量较高，酶的活性明显增加，说明纤维帽的崩解与MMPs活性增高有关[2]。本研究显示ACS外周血MMP-2，MMP-9的水平显著高于SA组及对照组，表明外周血MMP-2，MMP-9升高是斑块不稳定的标志，可作为ACS新的重要的血清标志物。本研究ACS的亚组分析显示：AMI患者与UA患者血MMP-2，MMP-9浓度差异有显著性，此结果与Kai等[3]报道AMI外周血水平较UA明显升高相符。这可能与AMI斑块破裂的程度较UA严重有关，并提示检测MMP-2，MMP-9有利于冠心病患者的危险分层。相关分析显示AMI组患者血清cTnI与MMP-2，MMP-9水平无显著相关(均P >0.05)，与文献[3]报道相符，这说明MMP-2，MMP-9水平的变化与心肌坏死的严重程度无关，系非坏死的心肌释放所致，与斑块的不稳定性有关，是反映ACS斑块稳定性的重要指标。

　　C反应蛋白是人体非特异性炎症反应最敏感的标志物之一。研究表明CRP能加剧斑块内的炎症活动，并且通过诱导分泌MMPs，促进ECM降解而造成斑块脆性增加，因此，CRP水平与冠状动脉粥样硬化的存在和严重程度有明显相关性[4]。本研究显示ACS组hs-CRP的浓度显著高于SA组及对照组，且AMI组血清hs-CRP浓度较UA患者显著升高，其水平与cTnI水平显著相关，与Mikael等[5]文献报道相符，提示hs-CRP在促进斑块的破裂过程中起重要的作用;在排除其他原因引起CRP升高的情况下，CRP水平的升高意味着斑块可能存在急性的炎症反应，有发生破裂的危险，血清hs-CRP浓度的高低，与ACS病情的严重程度存在一定的相关性;本研究证实了炎症反应的程度与心肌损伤的程度存在相关性，表明hs-CRP水平可以反映心肌坏死的严重程度，可与cTnI一起预测心梗的严重程度及估计心梗的预后。因此，CRP在ACS的发生、发展以及判断斑块的稳定性中具有重要预测意义。本实验显示ACS患者MMP-9与hs-CRP水平呈正相关，表明ACS斑块病变的炎症反应与ECM降解、MMPs过度表达、斑块稳定与否有着必然联系。MMP-2与hs-CRP水平无显著相关(r =0.27，P =0.05)，与文献[6]报道两者呈正相关不符，这可能与两者合成部位、调节方式不同有关，同时也不排除MMP-2与CRP释放曲线的不平行、出现峰值的时间不一致而造成两者不相关。本研究测定的是单点时间的样本含量，未进行多时间点的样本含量的追踪观察，尚待进一步深入研究。

　　【参考文献】

　　[1] Fiotti N,Altamura N,Orlando C,et al. Metalloproteinases-2,-9 and TIMP-1 expression in stable and unstable coronaryplaques undergoing PCI[J]. Int J Cardiol, 2008,127(3):350-357.

　　[2] Shah PK,Falk Badinom JJ,et a1.Humanmonocyte derivedmacrophages induce collagen breakdown in fibrous caps ofatherosclerotic plaques:potential role of matrix degradingmetalloproteinases and implications for plaque rupture[J].Circulation,1995,92(6):1565-1569.

　　[3] Kai H,Ikeda H,Yasukawa H,et al.Peripheral blood levels ofmatrix metalloprotease s-2 and -9 are elevated in patientswith acute coronary syndromes[J].J Am Coll Cardiol,1998,32(2):368-372.

　　[4] 王显,胡大一,杨士伟,等.冠状动脉斑块形态学与血浆炎症介质的关系[J].中华内科杂志,2008,(1): 27-30.

　　[5] Mikael D,Karl A.Key factors in the identification of thehigh-risk patient with unstable coronary artery disease:clini-cal findings,resting 12-lead electrocardiogram,and continu-ous electrocardiographic monitoring[J].Am J Cardiol,1997,80(5A):35E-39E.

　　[6] Psterkamp G,Schoneveld AH,Hijnen DJ,et al.Atheroscleroticarterial remodeling and the 1ocalization of macrophagesand matrix metalloproteinases 1,2 and 9 in the human coro-nary artery[J].Atheroseclerosis,2000,150(2):245-253.