血管内皮生长因子和Periostin检测在早期诊断糖尿病视网膜病变中的意义

糖尿病是一组以慢性血糖水平增高为特征的代谢性疾病,发病率为3%~5%,随着全球人口老龄化的进程加剧,糖尿病的发病率也呈逐年增加的趋势,其主要的危害是对微血管或者大血管的损害,继而导致一系列的并发症发生,糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,糖尿病患者中DR的发生率高达25%,初诊的糖尿病患者DR的发生率也可以在12%左右,75%的糖尿病患者15年内会发展为DR,DR也是目前致盲的重要原因,可见DR的防治成了一个不容忽视的严重公共健康卫生问题㈤。DR的发病机制目前仍不清楚,但血ˉ视网膜屏障破坏和新生血管形成是其基本的病理改变网,血管内皮生长因子(ⅤEGF)是体内促进新生血管形成的主要因子之一[4.5]。Periostin是一种胞外基质分泌性蛋白,近期的研究显示其也参与了血管的新生调控过程。本研究检测DR患者血清VEGF和Periostin表达的变化,并探讨其在DR发生、发展中的临床意义。

资料与方法

1.临床资料:收集我院2011年6月至2012年2月内分泌科诊治的发生DR的2型糖尿病患者⒓例(糖尿病DR组),其中男33例,女19例,年龄44~73(58.7±11,4)岁,病程3~14年;另选取我院同期诊治的未发生DR的2型糖尿病患者%例(糖尿病非DR组),其中男22例,女14例,年龄41~75(56.8±12.3)岁,病程2~13年;两组年龄、性别构成、体重、身高、病程等工般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。2型糖尿病的诊断标准符合1999年WHO的标准和2008年中华医学会糖尿病学分会制定的《中国2型糖尿病防治指南(2007年版)》网,DR的诊断使用日本佳能非瞳孔放大视网膜相机行眼底镜检查。曳例DR患者根据眼底病变分为非增殖期组(24例)和增殖期组(28例),两组年龄、性别构成等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。收集我院体检中心年龄和性别构成与糖尿病非DR组和糖尿病DR组匹配的健康体检者30例(健康对照组)。排除标准:急慢性疾病,自身免疫炎性疾病,恶性肿瘤,严重心脑血管和肝脏疾病,1个月内曾服用免疫抑制剂等药物。

2.血清ⅤEGF和Periostin表达的测定:采集所有受试者过夜空腹12h静脉血,3000r/min离心15min分离上清液,-70℃冰箱冻存。血清ⅤEGF和Periostin表达的测定使用酶联免疫吸附法检测,ⅤEGF检测试剂盒购自美国BD公司,Periostin检测试剂盒购自北京利德曼生化公司,所有操作严格按照试剂盒说明书进行,使用日立HICTHIˉ90gO全自动生化分析仪检测,使用标准品绘制标准曲线,然后对照标准曲线计算血清ⅤEGF和Periostin的表达水平。

3.统计学方法:应用sPss12.0软件进行统计分析,计量资料两组间比较采用检验,多组间比较采用单因素方差分析,计数资料比较采用'检验,相关性检验采用Pearson分析,P<0.O5为差异有统计学意义。

结果

1.三组血清ⅤEGF和Periostin表达的变化:与健康对照组比较,糖尿病非DR组和糖尿病DR组血清VEGF和Periostin表达均显著升高(P<0.O5或(0.01),并直糖尿病DR组血清VEGF和Periostin表达显著高于糖尿病非DR组(P<0.05)。见表1。

2.不同病变DR患者血清VEGF和Periostin表达的变化:增殖期组血清ⅤEGF和Periostin表达显著高于非增殖期组(P<0.05)。ⅤEGF和Periostin表达的相关性分析:ⅤEGF表达与Peoostin表达呈显著正相关(r=0,415,P<001)。讨论DR是糖尿病微血管损害的主要表现,临床上表现为眼底视网膜出血、渗出、水肿、增殖,其中微血管形成是DR发病的中心环节网,ⅤEGF是目前发现的特异性地直接作用于血管内皮细胞,刺激血管增殖的细胞因子,生理状态下ⅤEGF处于低表达,以维持体内血管损伤的修复n。本研究结果显示,糖尿病患者ⅤEGF表达显著高于健康体检者,并且随着DR的加重其表达也相应地升高,提示高表达的ⅤEGF可能参与了DR的发生、发展过程。ⅤEGF表达升高的机制可能是因为糖尿病患者高血糖及代谢紊乱,导致组织缺氧,低氧诱导因子1可以有效刺激VEGF分泌增多,过表达的ⅤEGF可以进一步诱导内皮细胞增殖和新生血管的形成,加重患者的DRnq。Periostin最早是在成骨细胞中发现的一种具有细胞黏附作用的蛋白质,故而早期也称为成骨细胞特异性因子2,在肿瘤的研究中显示其可以促进肿瘤血管的形成凹,本研究结果显示糖尿病患者Periostin表达显著高于健康体检者,发生DR的糖尿病患者显著高于未发生DR的糖尿病患者,并且当DR患者从非增殖期进展到增殖期时Periostin表达也出现相应的增加,说明Periostin也可能参与了DR的发生、发展过程。相关性分析显示ⅤEGF和Periostin的表达呈显著正相关,提示二者之间可能存在相互调控的关系,ⅤEGF主要是通过细胞表面的ⅤEGF受体(ⅤEGFR)发挥作用,而已有研究显示Periostin可以通过整合素αvβ3JAK信号通路上调ⅤEGFR的表达来协同ⅤEGF的促血管形成和生长活性阴,具体的调控分子机制还有待进一步的研究。本研究提示二者的联合检测对DR的早期防治具有一定的临床意义。综上所述,DR患者存在血清ⅤEGF和PeⅡ。stin的高表达,二者的联合检测可用于DR的早期诊断以及病情监控。联合检测对DR的早期防治具有一定的临床意义。综上所述,DR患者存在血清ⅤEGF和PeⅡ。stin的高表达,二者的联合检测可用于DR的早期诊断以及病情监控。

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