AU5421系统与CAPILLARYS系统检测尿微量清蛋白的相关性研究
发表时间：2014-05-07 浏览次数：932次
尿蛋白检测因其具有取材容易、无损伤、灵敏等优点，一直是基础医学分析科学和临床医学的热点课题之一。尿蛋白的检测是肾脏疾病诊断的重要指标。临床实验室检测尿微量清蛋白主要有免疫比浊法和电泳法两大类。免疫比浊法在全自动生化分析仪上进行检测，而电泳法主要在电泳仪上进行测定[1]。虽然两种检测方法测定的原理、使用的仪器试剂、结果表示方式均不相同，但作者从日常检测结果中发现，同一样本通过这两种不同检测系统得到的结果存在相同的变化趋势。因此作者将贝克曼公司的AU5421生化仪与西比亚公司的毛细管电泳仪对尿清蛋白检测结果进行对比分析，探讨两种系统测定结果之间的相关性。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2013年1～10月本院住院和门诊慢性肾病患者共108例，受试者留取晨尿立即送检。
1.2 仪器与试剂 贝克曼公司的AU5421生化仪和西比亚公司的毛细管电泳仪，均经过专业人员校准，运行正常。尿微量清蛋白质控品及校准品均与仪器配套，电泳法检测试剂来自西比亚公司，免疫比浊法检测试剂来自芬兰Orion诊断公司。
1.3 方法
1.3.1 精密度验证 根据CLSIEP5-A进行，每天分2批测定样本，各批次实验间隔至少在3h以上，每批测定2个浓度样本，每个样本重复2次，测定20d，记录数据。
1.3.2 准确性验证 将高低值质控重复检测3次，取平均值，计算与靶值的偏差。
1.3.3 相关性试验 参照CLSIEP9-A2文件要求做方法学试验。108份标本包括高、中、低浓度，每天测定18份样本，分别在贝克曼公司的AU5421生化仪和西比亚公司的毛细管电泳仪按照1至18，再18至1的顺序进行双份平行测定，分6个工作日完成。
1.4 统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行统计学分析，相关分析应用Spearman检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 精密度验证 批内和日间精密度检验结果显示，免疫比浊法批间和日间精密度分别为3.5%和4.2%，毛细血管电泳法批间和日间精密度分别为2.6%和3.7%，均小于1/4CLIA′88的要求，满足卫生部临检中心的要求。
2.2 准确度验证 免疫比浊法和电泳法分别用配套质控计算偏离度，准确复溶后，每个项目检测3次，取均值，二者偏离度分别为4.36%与3.23%，均小于5%，说明仪器的准确度良好。
2.3 两种方法相关性检测 两种方法检测尿微量清蛋白结果呈正相关(r=0.993，P<0.01)，见图1。
3 讨 论随着医学检验技术的高速发展，实验室项目和仪器的不断增加，在同一个实验室中，检测同一个项目往往有多种可供选择的分析方法，这些方法的灵敏度不同，对仪器和操作的要求不同。微量清蛋白作为反映肾脏异常渗漏的蛋白质，是糖尿病肾病早期诊断的重要指标，同时也是糖尿病、冠心病的独立预测因子和危险因素[2]。因此不同方法检测结果的相关性研究，对该项目的质量控制具有重要意义。传统的测定人体液中蛋白质含量的方法主要有免疫比浊法、化学发光分析法、放射免疫法等，这些方法存在着测定时间长、有放射性、操作繁琐等缺点。毛细管电泳法作为一种高效的电分离技术在临床实验室普遍使用[3]。CAPILLARYS系统是利用毛细管电泳原理，使带电荷的蛋白分子在具有一定pH的碱性缓冲液中通过其各自不同的电泳移动能力被分开。由于它分离速度快、分离效率高、样品用量少、分析成本低等特点，已经被广泛用于一些生物样品的分离分析。随着医院的快速发展，大型生化仪成为大中型医院检验科必不可少的检验工具，但对于一些中小型医院，因为资金等各方面原因，相对简单的电泳仪更容易推广和使用。作为慢性肾病的重要检测指标之一的尿微量清蛋白，是疾病早期诊断的重要依据。因此，在中小型医院中运用电泳法检测尿微量清蛋白对慢性肾病患者的早期筛查和诊断具有重要意义。在过去的一些研究中，电泳法检测尿微量清蛋白能够得到可靠的数据而被广泛关注[4-5]，而建立一种简单快速分离尿蛋白的方法具有重要的临床意义。本研究发现毛细管电泳法对尿微量清蛋白的检测结果与贝克曼公司的AU5421生化仪检测结果呈正相关。作者还将通过进一步的深入研究，通过大样本量的检测找寻这两种检测方法之间更准确的相关曲线，运用CAPILLARYS系统建立一种简单、快速、准确分离和检测尿清蛋白的方法，从而为临床诊断提供参考价值。
参考文献
[1]WuR，YeungWS，FungYS.2-Dt-ITP/CZEdeterminationofclinicalurinaryproteinsusingamicrofluidicchipcapillaryelectrophoresisdevice[J].Electrophoresis，2011，32(23)：3406-3414.
[2]DanielLW，NathanTH，NanetteLH，etal.Urinarytransferrinandalbuminconcentrationsinpatientswithtype1diabetesandnormalcontrols：thesearchforthefirstproteinlost[J].ClinBiochem，2001，34(1)：83-85.
[3]段隆慧，周勰，陈缵光.毛细管电泳法和微芯片电泳法在糖类分析中的应用[J].分子诊断与治疗杂志，2011，3(1)：42-46.
[4]田斌.尿微量白蛋白和α1-微球蛋白在糖尿病肾病早期筛查和治疗中的作用[J].中国实用医药，2011，6(9)：83-84.
[5]李小明，陈丽达，胡汉宁.尿微量白蛋白与尿肌酐比值对糖尿病性肾病的诊断价值[J].湖北预防医学杂志，2001，12(3)：10-11.
(收稿日期：2013-12-14)
