糖尿病患者感染的菌群分布及其耐药分析
发表时间：2012-06-14 浏览次数：533次
作者：陈永坤,吕晓燕,施国英 作者单位：321404 浙江省缙云县第二人民医院(陈永坤 吕晓燕) 321400 浙江省缙云县中医院(施国英)
【关键词】 糖尿病患者 感染 菌群分布 耐药分析
糖尿病感染是糖尿病严重并发症之一。本文分析359例住院糖尿病感染患者的菌群分布及耐药情况。
1 资料与方法
1.1 检测对象 收集近6年来符合1999年糖尿病学会的诊断标准[1]，且入院前后并发上呼吸道、肺、泌尿道、皮肤等感染的糖尿病患者，在使用抗生素前的痰、尿液、分泌物及胸、腹腔积液、血液等标本。
1.2 细菌分离培养 在采样后1h内接种于血平板、巧克力平板和沙保罗培养基,24h观察菌落及涂片染色检查。血液培养使用双向培养瓶，按常规方法进行细菌分离鉴定,去除同一病例所获重复菌株。
1.3 药敏试验 用K-B方法，并以大肠杆菌属 ATCC 25922、金黄色萄葡球菌 ATCC 29213、 铜绿假单胞菌 ATCC27853对选用抗生素进行质控。
1.4 超广谱β内酰胺酶试验(ESBLs)检测 采用双纸片协同试验，按常规纸片扩散法接种细菌，在平板中心贴上阿莫西林/克拉维酸纸片,在其周围贴上头孢他定、头孢噻肟、氨曲南纸片，若周围3个药敏纸片中有任何一个抑菌圈在靠近阿莫西林/克拉维酸纸片一侧边缘出现扩大视产ESBLS可疑菌株，并以大肠埃希菌ATCC35218、肺炎克雷伯菌ATCC700603菌株为质控菌株，按NCCLS推荐的纸片扩散确证试验[2]予以确认。
1.5 统计学方法 采用SPSS 8.0软件，ESBLs 检出率和耐药率的差异用χ2检验。以P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 病原菌分布 标本489份，检出各类致病菌331株(67.8%)。其中革兰阴性杆菌194株(58.9%)，以铜绿假单胞菌居首(63株，占19.0%),大肠埃希菌(49株，占14.8%)和肺炎克雷伯菌31例(9.4%)次之;革兰阳性球菌65株(19.3%),以葡萄球菌为主(凝固酶阴性葡萄球菌27株，占8.2%;金黄色葡萄球菌15株，占4.5%)，肠球菌18株(占5.4%)，其它G+5株;真菌72株(占21.8%)，以白色念珠菌为主。
2.2 革兰阴性杆菌ESBLs检出率 大肠埃希菌32.7%(16/49)，肺炎克雷伯菌38.7%(12/31)，铜绿假单胞菌47.6%(30/63)，不动杆菌16.7%(5/30),其它杆菌14.3%(3/21)。
2.3 药敏试验 见表1。
表1 G药敏试验、产ESBLs药敏试验结果(略)
3 讨论
以老年居多的糖尿病患者,常引起抵抗力下降,代谢紊乱,营养不良,免疫功能降低,住院时间较长,易感性增加，感染部位以呼吸道多见。本资料结果显示，糖尿病患者感染以条件致病菌为主, 这可能与医院长期使用广谱抗菌药物、不合理地联合使用多种抗生素,使正常菌群之间的平衡被打破,从而使平常不致病的机会致病菌异常繁殖,形成感染，这类感染将给临床治疗带来极大的困难。本组糖尿病患者感染率达67.8%,其中真菌72株(以白色念珠菌为主)，革兰阳性菌65株(主要以萄葡球菌为主)，革兰阴性菌194株(以铜绿假单胞菌居首)。近年来β—内酰胺类抗菌药物的大量使用,导致产ESBLs菌株明显增多，本资料大肠埃希菌占32.2%与文献一致[4];肺炎克雷伯菌为38.2%，高于华杰等报道[3]，与滕琳等报道相近[4]。药敏结果显示，两性霉素B对真菌具有较强的抗菌活性，G+ 菌对万古霉素和利福平的耐药率较低，对左氧氟沙星的耐药率却高达69.2%;在G- 杆菌中，对碳青霉烯类、头孢哌酮/他唑巴坦均分别低于6.1%,14.2%，头孢吡肟为23.8%,其余抗生素的耐药率均高于33.3%。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌，主要3种产ESBLS菌株对碳青霉烯类、头孢哌酮/他唑巴坦的耐率均分别低于16.7%、25.0%,其余抗生素的耐药率均高于50.0%。这与铜绿假单胞菌广泛产生由染色体介导的I型β-内酰胺酶,使外膜微孔蛋白变异,渗透性降低,抗生素不易进入细胞内，该酶为诱导型β-内酰胺酶,可通过β-内酰胺类抗生素诱导产生有关。现在认为β-内酰胺酶耐药基因在细胞间的传递是铜绿假单胞菌产生耐药性传播的主要原因之一[5];肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，质粒介导的产生TBM-ESBLs酶在大肠埃希菌中常见，SHV-ESBLs酶在肺炎克雷伯菌中多见，ESBLs酶能水解1、2、3代头孢菌素及单环β—内酰胺类药物，导致高度多重耐药性[6]，而亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/他唑巴坦与上述其它种类药物比较的耐药率较低，是因为亚胺培南独特的结构特点使它具有极广谱的抗菌活性，以及快速穿透细菌外膜能力和对细菌β-内酰胺酶高度的稳定性。
【参考文献】
1 叶任高,陆再英，主编.内科学. 第6版. 北京：人民卫生出版社，2005.797.
2 National committee for clinical laboratory standards. Performance Standards for antimicrobialdisk susceptibility tests.M100-S9 NCCLS,1999,19:101～103.
3 华杰,李艳霞. 肺炎克雷伯菌医院感染及耐药性检测.中华医院感染学杂志,2006,16(10):1172～1173.
4 滕琳,苏芬,刘婷等,肺部感染产超广谱β—内酰胺酶细菌的耐药性及危险因素分析. 中华医院感染学杂志,2006,16(9):1602.
5 胡云建,陈戈林,福地邦彦,等. 铜绿假单胞菌脉冲场凝胶电泳分型及耐药性研究.中华医学检验杂志,1998,21:342～344.
6 李宗清,崔颖鹏,陈求刚,等.常见革兰阴性杆菌的分布及耐药分析.中国微生态学杂志,2006,17(1):71～72.
