尿液转铁蛋白、微白蛋白检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床意

　　作者：邱晓萍,朱东辉,王燕萍　　作者单位：福建医科大学附属协和医院内分泌科，福州 350001;附属协和医院检验科，福州 350001;附属厦门第一医院肾内科，厦门

　　【摘要】目的 探讨尿转铁蛋白(TRF)、微量白蛋白(mAlb)在糖尿病肾病中的临床意义。 方法 采用速率免疫散射比浊法测定60例2型糖尿病患者及25名健康人24 h TRF、mAlb值，比较两者在糖尿病肾病筛选中的价值。 结果 糖尿病肾病患者尿TRF和mAlb与对照组之间差别均有统计学意义(P<0.01)，TRF在糖尿病正常蛋白尿组与对照组间差别均有统计学意义(P<0.01)。 结论 测定尿TRF和mAlb对早期诊断糖尿病肾病有良好的诊断价值，TRF较mAlb更敏感。

　　【关键词】 尿转铁蛋白,微量白蛋白,糖尿病肾病

　　由糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)所引起的肾功能衰竭是糖尿病患者死亡的主要原因之一。糖尿病肾病包括2个阶段：早期糖尿病肾病(微量白蛋白尿期)和临床糖尿病肾病(大量白蛋白尿期)。在微量白蛋白尿期进行干预性治疗能明显改善糖尿病肾病的预后。尿微量白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate，UAER)是公认的DN早期诊断指标,但除白蛋白外，尚有其他蛋白如尿转铁蛋白(transferrin，TRF)在糖尿病肾病早期排泄率明显增加，似较UAER更能敏感反映糖尿病早期肾损害[1]。本研究通过比较健康人和2型糖尿病尿TRF、微量白蛋白(microalbumin, mAlb)含量，评估其临床诊断糖尿病肾病中的价值。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象 选择2005年1月-2008年1月住院的2型糖尿病患者60例,男性30例，年龄(57.1±6.3)岁(50～64岁)，女性30例,年龄(52.3±11.1)岁(41～64岁)。根据美国糖尿病协会(ADA)1997诊断标准确诊[2]，病程1月～5年，尿常规蛋白定性均阴性。无高血压病史，试验时测血压正常，排除肾结石、狼疮肾、肾小球肾炎、尿路感染等疾病。无发热、创伤等应激状态,女性患者不在月经期。糖化血红蛋白为6.4%～10.8%。血肌酐正常。健康体检者25例，其中男性14例，年龄(51.2±4.3)岁(47～55岁),女性11例，年龄(53.6±3.9)岁(49～57岁);血压、心电图、血糖、肝肾功能和血、尿常规检查均正常。

　　根据尿mAlb水平的不同分为：对照组(A组，健康体检者)25例;正常蛋白尿组(B组，mAlb<30 mg/L)，微量白蛋白尿组(C组，30 mg/L300 mg/L),各20例。

　　1.2 方法 采用美国Backman公司特定蛋白分析系统，利用速率免疫散射比浊法的原理进行检测,离心半径8 cm，室温下2 h内检测完毕。尿肌酐采用苦味酸法在Beckman公司全自动生化分析仪CX23机上检测。全套试剂均由Backman公司提供。

　　患者在饮水、运动和蛋白质摄入等方面无特殊限制,6∶00至次日6∶00留24 h尿,放入4 ℃冰箱内待测。加样前经3 000 r/min离心10 min。为减少机体尿流率对结果的影响，所有尿标本同时测定尿肌酐(Cr)，TRF结果用TRF/Cr 表示。

　　1.3 统计学处理 数据以x±s表示，采用单因素方差分析(analyis of variance，ANOVA)，组间比较用最小显著差法，以P<0.05为差别有统计学意义。

　　2 结果

　　B组mAlb/Cr与A组接近，只有24 h尿TRF/Cr高于A组,差别有显著性意义(P<0.01);而C、D组与A组比较，24 h尿TRF/Cr及mAlb/Cr均明显增高(P<0.01或P<0.001)。糖尿病患者3组间比较：C组的TRF/Cr及mAlb/Cr值较B组高(P<0.05)，D组的TRF/Cr及mAlb/Cr值较B组更高(P<0.001)。此外，D组TRF/Cr及mAlb/Cr值也较C组高，差别有统计学意义(P<0.001)。

　　3 讨论

　　DN是糖尿病微血管病变的一部分，是糖尿病的一个严重并发症，直接关系到病人的预后,故DN的早期诊断和干预治疗，对延缓肾病的发生与发展具有重要价值。尿mAlb的检测已被公认作为诊断早期DN的可靠标志,并将mAlb排出率>20 μg/min和<200 μg/min定义为早期DN。临床实验证实，尿TRF是比mAlb更敏感的早期肾小球受损的指标[3]。

　　A：对照组;B：正常蛋白尿组;C：微量白蛋白尿组;D：临床蛋白尿组. TRF：尿转铁蛋白;mAlb：尿微量白蛋白;Cr：尿肌酐. 与A组比较，☆：P<0.01;☆☆：P<0.001;与B组比较，#：P<0.05，##：P<0.001;与C组比较，△：P<0.001.

　　TRF为单链糖蛋白，相对分子质量为76.5×103，大小为4.0 nm，等电点PI为5.6～6.6，半衰期7～10 d，易通过带阴电荷的肾小球滤过膜，并且TRF在糖尿病发生非酶糖化比mAlb少，蛋白质发生非酶糖化后使负电荷增多，尤其在糖尿病肾损伤早期[4]。有报道显示，尿TRF的阳性率大于尿mAlb的阳性率[5]。蛋白质通过肾小球滤过膜需经过选择性滤过屏障(体积屏障)和排斥性屏障(电荷屏障)。DN时，肾小球毛细血管内皮细胞与基底膜分离，上皮细胞足突融合，系膜区面积扩展。肾小球基底膜结构改变，孔径增大，使肾小球体积屏障受损，蛋白质漏出。由于TRF的分子较白蛋白大，故能更早反映肾小球体积屏障选择性的受损。此外，因TRF携带阴离子电荷较白蛋白少，而肾小球滤过膜富含的硫酸肝素糖蛋白、唾液酸糖蛋白带有大量负电荷，当TRF通过滤过膜时，受到的电荷排斥力较白蛋白小，更易漏出，也能更敏感反映肾小球电荷屏障受损[6]。所以，选择TRF作为早期肾小球损害的指标可能更敏感，在早期肾损害时其增加常较尿白蛋白出现更早。

　　本研究采用Cr作校正，检测并比较尿TRF与mAlb 2个指标，结果显示这2种肾小球源性蛋白在糖尿病肾病患者已表现出异常增高，且尿TRF/Cr在糖尿病正常尿蛋白组即表现出异常增高，表明TRF/Cr能更敏感地反映肾小球的损伤，可作为早期诊断糖尿病肾病的重要实验室指标，以便临床及时采取相应的治疗措施，以逆转或延缓糖尿病肾病的发展。

　　【参考文献】

　　[1] Kanauchi M, Nishika H, Hashimoto T,et al. Diagnostic significance of urinary transferrin in diabetic nephropathy[J]. Nippon Jinzo Gakkai Shi, 1995,37(11)：649654.

　　[2] The expert committee on the diagnosis and classification of diabetes mellitus. Report of the expert committee on the diagnosis and classification of diabetes mellitus[J]. Diabetes Care，2003，26(Suppl 1)：520.

　　[3] 周永列,张学军. 糖尿病患者尿液转铁蛋白检测的临床意义[J]. 中华内科杂志, 1997,36(3)：165168.

　　[4] Ghigger G M,Candiano G,Delfino G,et al. Electrical charge of serum and urinary albumin in normal and diabetic humans[J]. Kidney Int, 1985,37(11)：168177.

　　[5] 陈 燕,赵 敏,张家红,等. 尿微量蛋白检查对糖尿病早期肾损伤的诊断价值[J]. 中华检验医学杂志, 2003,26(9)：562564.

　　[6] 沈道江, 蒋 群, 叶 芳,等. 尿视黄醇结合蛋白与尿转铁蛋白诊断传染性单核细胞增多症早期肾损害的价值[J]. 浙江医学, 2007,29(4)：309310.