ERβ、C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其与内分泌治疗效果的关系

ERβ、C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其与内分泌治疗效果的关系作者：孔丽凤 赵峰, 李景英, 房新志    作者单位：新疆医科大学附属肿瘤医院病理科， 新疆 乌鲁木齐    【摘要】  目的: 检测乳腺癌组织中ERβ蛋白、C-erbB-2蛋白表达情况，探讨ERβ、C-erbB-2表达对乳腺癌患者预后和内分泌治疗的影响。方法: 应用免疫组织化学PV-9000法检测86例乳腺癌患者肿瘤组织中ERβ、C-erbB-2的表达，并结合临床病理指标和预后作对比分析。采用χ2检验、Kaplan-Meier法计算生存率。结果: （1）ERβ的阳性表达率与临床分期、腋淋巴结转移相关（P＜0.05），与年龄、肿瘤大小、组织学分级及月经状况无显著相关性（P＞0.05）；C-erbB-2的阳性表达率与肿块大小，腋淋巴结转移相关（P＜0.05），与年龄、临床分期、组织学分级及月经状况无显著相关性（P＞0.05）；（2）ERβ阴性患者中接受内分泌治疗组患者的5年总生存率、无瘤生存率（分别为87.29%和84.06%）高于未接受内分泌治疗组（分别为53.87%和53.87%），差异有统计学意义（P＜0.05）。结论: (1) 乳腺浸润性导管癌中ERβ、C-erbB-2阳性表达与肿瘤的发生发展密切相关。(2)ERβ阴性患者内分泌治疗效果明显，检测ERβ的表达水平是预测内分泌治疗效果的有用指标。    【关键词】  ERβ； C-erbB-2； 乳腺癌； 内分泌治疗    Correlation between expression of ERβ and C-erbB-2 and endocrine therapy effective  in breast cancer patients  KONG  Li-feng,   ZHAO Feng,   LI Jing-ying, et al (Department of Pathology, Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University,Urumqi 830011, China)    Abstract： Objective：  To study the expression of ERβ,C-erbB-2 in breast cancer  and to analyze the correlation between the expression of ERβ and C-erbB-2 and endocrine therapy effective and prognosis in breast cancer patients.  Methods：  ERβ, C-erbB-2  were detected by PV-9000 immunohistochemical technique in 86 cases of breast invasive ductal carcinoma. The data was analyzed combining with clinicolpathological character and prognosis using χ2  test and Kaplan-Meier method. Results：（1）The expression of ERβ was significantly correlated with lymph node metastasis, clinical stage (P<0.05), and no significant correlation with age, tumor size, menopause or not and pathological grading (P>0.05); The expression of  C-erbB-2  was significantly correlated with tumor size and lymph node metastasis (P<0.05), and no significant correlation with age, clinical stage, menopause or not and pathological grading (P>0.05);（2） For  ERβ negative group, the 5-year overall and disease free survival rate in endocrine therapy group were 87.29%  and  84.06%,  in non-endocrine therapy group  they  were  53.87%  and  53.87% respectively, there  were  significantly different （P＜0.05）. Conclusion：（1）ERβ and  C-erbB-2 may play important roles in the carcinogenesis  and development of breast invasive ductal carcinoma. (2) Endocrine therapy is effective in  ERβ negative breast cancer patients. Detecting ERβ  is significant in judging the effect of endocrine therapy for breast cancer patient.    Key words： ERβ;  C-erbB-2; breast  carcinoma; endocrine therapy    60年代Jensen等［1］ 在乳腺癌的癌细胞浆内发现有雌激素受体ERα，受体的状况对评估乳腺癌患者的预后和内分泌治疗方面有肯定作用。1996年随着另一种雌激素受体即ERβ相继在小鼠、大鼠中发现，特别是1997年，Dotzlaw等［2］在人乳腺组织中发现了ERβ，引起人们对ERβ表达临床意义的关注。本实验通过检测乳腺癌组织中ERβ与C-erbB-2蛋白表达情况，探讨ERβ及C-erbB-2与乳腺癌患者内分泌治疗效果和预后的关系。1  材料与方法    1.1  材料  收集新疆医科大学附属肿瘤医院1995～2001年收治乳腺浸润性导管癌患者手术标本86例，均为女性，年龄27～76岁，平均年龄46.3岁，临床及病理资料均完整。    1.2  试剂及方法  所有标本均经10%的福尔马林固定、石蜡包埋，4 μm厚连续切片，行免疫组织化学PV-9000二步法染色。 C-erbB-2鼠抗人单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术公司，ERβ鼠抗人单克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。用已知ERβ、C-erbB-2阳性乳腺癌组织切片作为阳性对照，TBS代替一抗作阴性对照。    1.3  结果判定  ERβ为细胞核着色呈棕黄色颗粒，阳性细胞数≥10%为阳性。C-erbB-2为细胞膜着色呈棕黄色颗粒，阳性细胞数≥10%为阳性。    1.4  随访资料  本组所有患者均进行随访，最短随访56个月，最长随访148个月，中位随访时间97个月。随访方式为电话随访、信访及门诊随访。    1.5  统计学处理  采用SPSS10.0软件包进行统计学分析。用χ2检验，Kaplan-Meier法计算各组生存率，并采用Log-rank法进行显著性检验，检验水准α=0.05（双侧）。2  结果    2.1  ERβ、C-erbB-2的表达与临床病理因素的关系    2.1.1  ERβ的表达与临床病理因素的关系  ERβ的阳性表达率在不同的临床分期各组差异有统计学意义（P＜0.05）；ERβ的阳性表达率在腋淋巴结无癌转移组（58.18%）高于腋淋巴结有癌转移组（32.26%），差异有统计学意义（P＜0.05）。ERβ在不同年龄、不同肿瘤大小、不同组织学分级、不同月经状况各组中的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）,见表1。    2.1.2  C-erbB-2的表达与临床病理因素的关系  C-erbB-2阳性表达率在肿块不同大小组间差异有统计学意义（P＜0.05）；在腋淋巴结有癌转移组（70.97%）高于腋淋巴结无癌转移组（36.36%），差异有统计学意义（P＜0.05）。C-erbB-2在不同的年龄、不同的临床分期、不同的组织学分级、不同的月经状况各组的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）,见表2。表1  ERβ的表达与临床病理因素的关系表2  C-erbB-2的表达与临床病理因素的关系    2.2  ER表达与内分泌治疗效果的关系  本组患者中有51例患者接受了内分泌治疗，在ERβ阴性组中，接受内分泌治疗患者的5年总生存率与无瘤生存率均高于未接受内分泌治疗者，差异有统计学意义（P＜0.05），在ERβ阳性组中，接受内分泌治疗组患者的5年总生存率和无瘤生存率与未接受内分泌治疗组患者无统计学差异（P＞0.05）,见表3。表3  ERβ表达与内分泌治疗效果的关系3  讨论    3.1  ERβ与乳腺癌的关系    3.1.1  ERβ在乳腺癌中的表达及其意义  乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，内源性雌激素ERα与乳腺癌关系密切。 ERβ与ERα一样，同属甾体激素受体家族成员，二者在DNA结合区和和配体结合区具有高度同源性，氨基酸同源序列分别高达96%和58%，而在A/B区，铰链区（D）区和F区同源性差［3］，只有17.5%～30.0%。ERα定位于第6号染色体的长臂，ERβ位于14号染色体长臂22-24区段，ERα与ERβ受体均为独立的基因产物，他们在调节基因表达方面发挥不同的作用。Gustafsson等［4］发现，在ERβ基因被敲出的小鼠表现为乳腺上皮异常增生，Ki67过表达，随着鼠年龄增大，出现严重的囊性乳腺病变，因此认为ERβ对正常乳腺具有保护作用。Jarvinen等［5］采用免疫组织化学法并配合原位杂交法检测了92例乳腺癌组织内ERβ的阳性表达情况，结果显示：腋淋巴结无癌转移组ERβ阳性表达率高于腋淋巴结有癌转移组（P＜0.001）。本实验86例浸润性导管癌患者中，ERβ的阳性表达率在不同的临床分期组差异有统计学意义（P＜0.05），临床分期越晚阳性率越低，呈现出递减趋势；ERβ的阳性表达率在腋淋巴结无癌转移组（58.18%）高于腋淋巴结有癌转移组（32.26%），差异有统计学意义（P＜0.05），提示ERβ可能在乳腺癌疾病进展中发挥重要作用而且是保护性因素。    3.1.2  ERβ与乳腺癌内分泌治疗的关系  内分泌治疗耐药是影响乳腺癌治疗效果的重要因素。三苯氧胺临床应用广泛，对其耐药机制的研究也成为热点，随着ERβ在乳腺癌中的深入研究，有人认为其在三苯氧胺耐药机制中扮演重要角色。1999年，Speires［6］利用RT-PCR方法检测了TAM治疗敏感和耐药两组患者的ERβmRNA表达，结果耐药组明显升高，分析对TAM耐药的原因，可能由于ERβ与抗雌激素结合，启动AP-1反转激活途径使抗雌激素成为强的激活剂，由此TAM对肿瘤内ERβ阳性细胞可能是一种增殖信号，是潜在的转录激活因子，而不是作用靶点，正性调节了与细胞增殖有关的基因表达。有研究提示，ERβmRNA水平与表皮生长因子受体（EGFR）的表达呈正相关［7］。EGFR常与内分泌治疗不敏感、PR表达下降有关。本实验结果显示有51名患者接受了内分泌治疗，在ERβ阴性组中，有32例接受内分泌治疗，接受内分泌治疗患者的5年累计总生存率和5年无瘤生存率均高于未接受内分泌治疗的患者（P＜0.05）。在ERβ阳性组中，有19例接受了内分泌治疗，接受内分泌治疗患者的5年的累计总生存率及5年无瘤生存率与未接受内分泌治疗组差异无统计学意义（P＞0.05），表明ERβ阴性的患者内分泌治疗效果明显，内分泌治疗改善了ERβ阴性组患者的预后。    3.2  C-erbB-2在乳腺癌的关系    3.2.1  C-erbB-2在乳腺癌中的表达及其意义  C-erbB -2 又称HER-2或neu，它编码一个性质极为类似EGFR的蛋白，具有酩氨酸蛋白激酶活性，定位于17q21。在乳腺癌中扩增的阳性率为6%～46%(平均17%)，过度表达的阳性率为9%～66%(平均19. 5%) ［10］。叶锋等［8］人研究表明，C-erbB-2的高拷贝扩增和癌基因蛋白高水平表达常与较大的原发瘤体积，较多的腋窝淋巴结转移，较差的治疗反应性有关，它预示着较早的术后复发和较短的存活期。有人在一组无淋巴结转移的乳腺癌患者中发现，C-erbB-2基因扩增的患者有较高的术后复发率，总体生存时间变短。他们由此认为C-erbB-2的表达是一个不依赖于其他指标的重要预后指标。本实验86例乳腺癌组织标本中，C-erbB-2阳性表达率在不同的肿块大小各组差异有统计学意义（P＜0.05）；C-erbB-2的阳性表达率在腋淋巴结有癌转移组（70.97%）高于腋淋巴结无癌转移组（36.36%）差异有统计学意义（P＜0.05）。C-erbB-2在不同的年龄、临床分期、组织学分级、月经状况中的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05），与国内外研究结果一致。    3.2.2  C-erbB-2与乳腺癌内分泌治疗的关系  Benz等［9］报道C-erbB-2过表达的MCF-7细胞存在雌激素依赖性但对他莫昔芬耐药，与多数研究得出的结果相似。C-erbB-2癌基因高表达的乳腺癌患者在临床上往往表现出对三苯氧胺耐药甚至加速某些癌细胞的转移，其机制可能是直接干扰TAM在细胞膜与雌激素受体ER作用并影响细胞间信号转导通路过程，改变细胞间信号传递［10］。C-erbB-2基因表达阳性者可使ERα阳性病人对内分泌治疗的反应率降至20%;ERα阴性病人内分泌治疗几乎无效。C-erbB-2基因扩增或过度表达的乳腺癌对内分泌治疗具有抵抗性。体外生长研究显示激素反应性乳腺癌伴C-erbB-2阳性者对他莫昔芬耐药，体内研究结果也支持ERα阳性，C-erbB-2阳性的肿瘤对他莫昔芬耐药。一些临床前期试验表明选择性酪氨酸激酶阻抑C-erbB-2可转他莫昔芬抵抗［11］。本组实验结果显示ERβ与内分泌治疗效果有关，提示对乳腺癌患者联合检测ERα、ERβ、C-erbB-2可作为预测内分泌治疗效果的有用指标。【参考文献】  ［1］ Jensen EV, Jacobson HI. 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