网织血小板与血常规中血小板相关参数之间的相关性

    作者：孙德华，王 前，郑 磊，裘宇容，平宝红*    作者单位：(南方医科大学南方医院检验科，血液科，广州510515)     【摘要】  目的 探讨静脉血中网织血小板百分比与血常规中血小板相关参数之间的相关性。方法 对72例男性及75例女性静脉血样本同时检测其网织血小板百分比（RP%）与PLT、MPV、PDW、PLCR,并对它们的检测结果进行相关分析，比较RP%与它们之间的相关性。并将MPV进行分组比较，比较两者的差异性。结果 RP%与PLT之间均RP%与PLT之间无相关关系，相关系数分别为男性组r=-0.033(P>0.05)，女性组r=-0.092(P>0.05)，而RP%与MPV、PDW、PLCR之间在男性组及女性组之间均有相关关系，P<0.01。女性MPV≥11.0 fl组RP%高于MPV<11.0 fl组的RP%，二者具有显著性差异，P＜0.01。结论 RP%与PLT之间无相关关系，而RP%与MPV、PDW、PLCR之间均具有良好相关性。

    【关键词】  网织血小板； 血小板的平均容积； 血小板总数； 血常规

    Relationship Between the Reticulated Platelets and the Platelet Parameters of Blood Routine

    SUN Dehua，WANG Qian，ZHENG Lei，QIU Yurong，PING Baohong

    （Nanfang Hospital， Nanfang Medical University， Guangzhou， 510515， China）

    Abstract:   Objective  To study the relationship between the reticulated platelets (RP) and the platelet parameters of  venous blood routine. Methods  At the same time, RP and PLT,MPV,PDW,PLCR were detected by hemacytometer in  72 male and 75 female subjects . The female subjects were divided into two groups by MPV value.Results  The reticulated platelets (RP) and PLT did not show a correlation，relative coefficient r=-0.033 (P>0.05)  at male subjects and relative coefficient r=-0.092(P>0.05) at female subjects . The reticulated platelets (RP) and MPV,PDW,PLCR correlated extremely well at all subjects (P<0.01). A significant difference of the  RP% was observed between MPV≥11.0 fl female subjects and MPV<11.0 fl female subjects（P<0.01）.Conclusion  The reticulated platelets (RP) and PLT did not show a correlation. The reticulated platelets (RP) and MPV,PDW,PLCR correlated extremely well.

    Key words:  Reticulated  platelet;  MPV;  PLT;  Blood routine

    网织血小板是骨髓释放入血循环中最年轻的血小板。它反映了骨髓中血小板的生成状态。其在血小板减少性疾病的诊断和鉴别诊断上，起着重要的作用[13]。血小板的平均容积（MPV）代表单个血小板的平均容积，常用来评价骨髓功能。本文对网织血小板百分比（RP%）与血常规血小板相关参数（PLT、MPV、PDW及PLCR）的关系进行探讨。

    1  对象和方法

    1.1  仪器与试剂  网织血小板测定仪器为美国BD公司的FACS  Calibur型流式细胞仪，流式细胞仪所用试剂均为美国BD公司产品。TO为美国BD公司生产的ReticCOUNTTM 试剂，CD 42b单抗（PE标记）为美国BD公司生产。血小板总数及MPV及PDW、PLCR的测定采用SYSMEX SE9000型全自动血液分析仪进行测定，其试剂为原厂配套试剂。

    1.2  对象  随机抽样于南方医科大学南方医院门诊及住院病人147例,年龄2～73岁。男性72例，女性75例。

    1.3  标本及其采集  早晨空腹抽血。抽血静脉血2 ml，立即注入EDTAK2抗凝的试管中，充分混匀，30 min内上机检测血常规。

    1.4  试验材料及方法

    1.4.1  取EDTAK2抗凝的静脉血5 μl，加入CD 42b（PE）10 μl后分别加入500 μl 1∶2稀释的TO（以生理盐水进行稀释），充分混匀后室温避光静置60 min，上流式细胞仪进行测定。

    1.4.2  流式细胞分析  首先以CD 42b阳性将血小板从其他细胞成分中分离开来，再用TO将RP从血小板中分离开来。测定同时设阴性对照，阴性对照样本以RNA酶处理样本1 h后，加入TO。用前向散射光(FS)和侧向散射光(SS)的对数值作图可清楚地分辨出血小板群，对该群血小板设门进行分析。用对照管来确定阳性阈值，使其99以上血小板位于阴性区域，然后检测测定管中TO阳性的血小板比率。

    1.4.3  用SE 9000全自动血细胞分析仪对其血小板总数（PLT）、MPV以及PDW、PLCR进行测定。

    1.5  数据处理  对男性和女性分组对RP%与PLT、MPV、PDW及PLCR进行非参数相关性分析，计算相关系数r。对PLT、PDW分组之间的RP%平均值比较采用单因素方差分析，对于MPV、PLCR分组之间的RP%平均值比较采用独立样本T检验。

    2  结    果

    2.1  72例男性样本和75例女性样本RP%与PLT、MPV、PDW、PLCR相关性分析。见表1。 表1  RP%与PLT、MPV、PDW、PLCR相关关系表 **P≤0.01；*0.01

    2.2  72例正常男性的RP%和血小板总数非参数相关分析  结果：r=-0.033，P=0.785，男性组RP%与PLT之间无相关关系。75例正常女性的RP%和血小板总数相关分析，结果：r=-0.092，P=0.432，女性组RP%与PLT之间无相关关系。72例正常男性按PLT数量分组分成3组，各组之间进行进行单因素方差分析，F=0.861，P=0.427，各组之间无显著性差异。75例正常女性结果分成3组，各组之间进行单因素方差分析，F=1.366，P=0.262，各组之间不具有统计学差异（表2）。对男性及女性各组结果进行Post Hoc检验，各组间结果也无显著性差异（表3）。 表2  不同PLT数量人群的RP%值表3  不同PLT数量人群的RP%值的多重比较

    2.3  72例正常男性的RP%和MPV 非参数相关分析  结果：r=0.407，P=0.000，男性组RP%与PLT之间有相关关系。对75例正常女性的RP%和MPV 非参数相关分析，结果：r=0.452，P=0.000，女性组RP%与PLT之间有相关关系。72例正常男性、75例正常女性按MPV结果分组分成2组，各组之间进行进行独立样本t检验，男性组t=-0.984，P=0.329，各组之间差异无显著性。女性组性组t=-3.198，P=0.003，差异呈显著性。女性组MPV≥11.0 fl组RP%高于MPV<11.0 fl组的RP%。见表4。表4  不同MPV人群的RP%结果

    2.4  72例正常男性的RP%和PDW非参数相关分析  结果：r=0.408，P=0.000，男性组RP%与PDW之间有相关关系。对75例正常女性的RP%和PDW进行非参数相关分析，结果：r=0.455，P=0.000，女性组RP%与PDW之间有相关关系。72例正常男性按PDW结果分组分成3组，各组之间进行进行单因素方差分析，F=4.224，P=0.019,各组之间差异无显著性。75例正常女性结果分成3组，各组之间进行单因素方差分析，F=6.804，P=0.002，各组之间具有统计学差异（表5）。对男性及女性各组结果进行Post Hoc检验（表6），男性PDW<15.5组与15.5≤PDW≤18.1组RP%结果有统计学差异，男性PDW<15.5组RP%结果低于15.5≤PDW≤18.1组；女性PDW>18.1组与15.5≤PDW≤18.1、PDW<15.5组RP%结果有统计学差异；其余各组结果均无统计学差异。 表5  不同MPV人群的RP%结果表6  不同PDW数量人群的RP%值的多重比较

    2.5  72例正常男性的RP%和PLCR非参数相关分析   结果：r=0.421，P=0.000，男性组RP%与PLCR之间有相关关系。对75例正常女性的RP%和PLCR非参数相关分析，结果：r=0.447，P=0.001，女性组RP%与PLT之间有相关关系。72例正常男性、75例正常女性按和PLCR结果分组分成2组，各组之间进行进行独立样本t检验，男性组t=-0.839，P=0.404，两组之间差异无显著性。女性组性组t=-2.750，P=0.008，差异有显著性,女性组PLCR≥30组RP%高于MPV<30组的RP%（表7）。表7  不同PLCR人群的RP%结果

    3  讨    论

    MPV与RP%均可反映血小板的生成状态，二者之间的关系己有探讨[4,5] 。

    本文对147例样本的MPV与RP%之间的关系进行了研究，发现随着MPV的增大，RP%呈现了上升的趋势，RP%与MPV呈正相关关系，并且我们对MPV进行了分组分析，发现MPV≥11.0 fl组RP%高于MPV<11.0 fl组，二者之间具有统计学差异。但是RP%MPV的结果并不是一一对应的，一些人MPV增高，但RP%正常，一些人MPV正常，但RP%却显著增高，这可能与小红细胞及红细胞碎片对MPV测定结果的影响有关。我们同时测试了MPV与PDW及PLCR之间的相关性，结果发现了MPV与PDW之间高度相关，MPV与PLCR之间同样高度相关。随着MPV的增大，PDW与PLCR呈现了明显的上升趋势，这主要是由于随着血小板体积增大，造成了血小板直方图右移，直方图的右移必将造成平均血小板分布宽度的增大，及大血小板的比率的增大，因而这3个指标具有良好的相关性。由于MPV、PDW、PLCR的良好的相关性，我们在测试RP%与PDW及PLCR的相关性时，出现了同RP%与MPV相类似的结果，随着PDW及PLCR的增大，RP%同样出现了上升趋势。血小板总数是检测外周血血小板浓度的参数，与RP%之间无相关关系。MPV与RP%均是反映骨髓血小板生成的指标，虽 MPV与RP%之间呈正相关关系，但不存在一一对应关系。

    但是MPV受小红细胞、红细胞碎片及大血小板的干扰较大，在很多情况下不能反映血小板实际体积的大小。因此，我们检测RP%时采用的TO/antiCD42b双标法，可以有效的去除小细细胞、红细胞碎片及大血小板的干扰，从而使RP%能够更好地反映骨髓巨核细胞的生成状态，为临床提供更加翔实的资料。

【参考文献】［1］ INGRAM M, Coopersmith A. Reticulated platelets following acute blood loss［J］. Br J Haematol， 1969， 17(3):225229.

［2］ AULT KA, KNOWLES C. In vivo biotinylation demonstrates that reticulated platelets are the youngest platelets in circulation［J］. Exp Hematol，1995 ，23(9):9961001.

［3］ KIENAST J , SCHMITZ G. Flow cytometric analysis of thiazole Orange uptake by platelets: a diagnostic aid in the evaluation of thrombocytopenic disorders［J］. Blood,1990 ，75: 116 120.

［4］ 宋红蕾,冯萍,朱雪明. 网织血小板与MPV、血小板数量的关系探讨[J]. 临床输血与检验,2004,(2).9192.

［5］ BUTKIEWICZ AM,KEMONA H,DYMIC KAPIEKARSKA V,et al.Platelet count, mean platelet volume and thrombocytopoietic indices in healthy women and men［J］. Thromb Res， 2005， 31（8）：3033.