胃癌患者血清胰岛素样生长因子-Ⅱ检测及其临床意义

　　作者：卢圣爱　陈自平　刘倩　徐昌青　贾欣永　郭荣 作者单位：1济南市中心医院　保健科　(山东　济南　250013)2山东省千佛山医院　消化科　(山东　济南　250014)

　　【摘要】目的： 探讨胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)与胃癌的关系。方法： 采用放射免疫法对31例胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平进行检测，并与10例正常组、10例慢性萎缩性胃炎伴肠腺化生(CAGGM)组及10例慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生(CAGD)组作对照。比较20例胃癌患者手术前后血清IGF-Ⅱ水平的变化，分析其与胃癌病理分期、恶性程度、肝转移及与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的关系。结果： 血清IGF-Ⅱ水平胃癌组和CAGD组较正常组均明显升高(P<0.001，P<0.01)，且胃癌组较CAGGM组、CAGD组血清 升高 (P<0.001，P<0.001)，CAGD组与CAGGM组比较 亦有显著性差异(P<0.01);术后2周血清IGF-Ⅱ水平较术前显著下降(P<0.001)。中、晚期胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较早期患者显著升高(P<0.01);差分化型胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较分化型明显升高(P<0.05);胃癌有无肝转移、是否伴Hp感染其血清IGF-Ⅱ水平均无明显差异。结论： 血清IGF-Ⅱ水平升高是胃癌发生、发展的重要因素之一;检测血清IGF-Ⅱ水平的变化，对胃癌的诊断、手术切除是否彻底、判断病情变化有一定临床价值。Hp感染与血清IGF-Ⅱ水平升高可能分别作为独立因素，共同参与胃癌的发生、发展。

　　【关键词】 胃肿瘤　胰岛素样生长因子-Ⅱ

　　Detection and clinical significance of serum insulin growth factor-Ⅱ in patients with gastric carcinoma

　　LU Sheng-ai1, CHEN Zi-ping2，LIU Qian2， XU Chang-qing2，JIA Xin-yong2， GUO Rong2

　　1 Department of Health, Jinan Central Hospital(Jinan 250013, China)

　　2 Department of Digestive，Shandong Provincial Qianfoshan Hospital(Jinan 250014，China)

　　【ABSTRACT】 Objective: To investigate the relationship between the serum insulin growth factor-Ⅱ (IGF-Ⅱ) and gastric carcinoma (GC). Methods: Levels of serum IGF-Ⅱwas detected by radioimmunoassay in 31 cases of GC, 10 cases of chronic atrophic gastritis glandular metaplasia (CAGGM), 10 cases of chronic atrophic gastritis dysplasia (CAGD), and 10 age-matched healthy controls. The variation of serum IGF-Ⅱwere compared in 20 cases of GC. The relationship between variation of serum IGF-Ⅱwith pathogenetic condition, malignancy degree, liver metastasis and helicobacter pylori (Hp) infection of GC were analyzed. Results: Serum levels IGF-Ⅱ in GC group and CAGD group increased significantly higher than those in healthy controls (P<0.001, P<0.01). There was significant difference between CAGGM group and CAGD group (P<0.01). Two weeks after operation, IGF-Ⅱwas decreased significantly (P<0.001). IGF-Ⅱwas elevated in mid-advanced carcinoma of stomach than those in early stage (P<0.01), and it was increased in undifferentiatial type patients than that of differentiatial type patients (P<0.05). No differences were found in the patients with liver metastasis and Hp infection. Conclusion: The elevation of serum IGF-Ⅱ in patients with gastric cancer may be one of the most important factors for occurrence and development of GC. Hp infection and IGF-Ⅱmay be two independent factors to participate the occurrence and development of GC.

　　【KEY WORDS】 Gastric carcinoma· Insulin-like growth factor-Ⅱ

　　近年研究发现，胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)与肿瘤的关系密切[1]，对细胞DNA、蛋白及多糖合成有促进作用，是一种强烈的致有丝分裂剂[2];通过促细胞增殖、抗凋亡作用，参与肿瘤的发生、发展。目前血清IGF-Ⅱ水平变化与胃癌的关系国内外研究甚少。从2004年3月~2005年7月，我们通过对胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平检测，比较其手术前后血清IGF-Ⅱ水平的变化，分析血清IGF-Ⅱ水平与胃癌病理分期、恶性程度、肝转移及与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的关系，探讨IGF-Ⅱ在胃癌发生、发展中的作用。

　　1　资料与方法

　　1.1　临床资料 胃癌组31例，均经内镜或手术病理证实为腺癌。其中男27例，女4例;年龄24~82(60±9.8)岁。分化型10例，包括高、中分化型乳头状腺癌、管状腺癌;差分化型21例，包括低分化腺癌、印戒细胞癌和黏液腺癌。早期胃癌9例，包括肿瘤浸润至黏膜、黏膜下层;中、晚期胃癌22例，包括肿瘤浸润至肌层、浆膜层和穿透浆膜层合并侵袭邻近脏器;有肝脏转移者7例，无肝转移者24例，均经B超和/或CT诊断证实。所有患者采血前均未接受化疗等治疗措施，其中20例患者进行了手术前后血清IGF-Ⅱ水平动态检测 。另选慢性萎缩性胃炎伴肠腺化生(CAGGM)组10例，其中男8例，女2例;年龄43~70(57±7.2)岁。慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生(CAGD)组10例，其中男9例，女1例，年龄46~80(57±9.6)岁。正常对照组10例，其中男8例，女2例;年龄39~60(54±8.2)岁，均为正常胃黏膜者。所有患者均经内镜活组织检查病理证实。

　　1.2　检测方法 采集所有受试者空腹静脉血，分离血清2ml，置于-20℃下冻存，集中检测。

　　125I-IGF-Ⅱ试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所提供。采用双抗体放射免疫法测定，双管检测。SU-695B型智能放免γ-测定仪由上海原子核研究所日环一厂制造。

　　14C-尿素呼气试验(14C-UBT)和Hp-DNA检测(采用 PCR 法)均阳性者判定为幽门螺旋杆菌阳性。 14C-UBT 检测仪由深圳市海得威生物科技有限公司提供。14C-UBT≥100dpm(同位素丰度)/mmolCO2可判断为Hp阳性。

　　Hp-DNA检测。引物1：5'-GCCAATGGTAAA -TTAGTT-3'，引物2：5'-CTCCTTAATTGTTTTTAC-3'。PE-5700型PCR扩增仪由美国ABI公司制造。

　　1.3　 统计学处理

　　应用SAS6.12软件对检测数据进行成组设计的两样本均数比较的t检验和最小显著差法(LSD法)。P<0.05为差异有统计学意义。

　　2　结果

　　2.1　四组血清IGF-Ⅱ水平测定结果。见表1。

　　2.2　胃癌患者手术前后血清IGF-Ⅱ水平的变化见表2。胃癌患者术后1周血清IGF-Ⅱ水平较手术前无明显变化(P>0.05)。而术后2周时其血清IGF-Ⅱ水平较手术前显著下降(P<0.001)，接近于正常组水平。

　　2.3　血清IGF-Ⅱ水平与胃癌病理分期、分化程度、肝转移及Hp感染的关系　见表3。

　　中、晚期胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较早期患者显著升高(P<0.01)。差分化型胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较分化型也明显升高(P<0.05)，而胃癌患者是否有肝转移、Hp感染其血清IGF-Ⅱ水平均无明显差异(P>0.05，P>0.05)。

　　3　讨论

　　人类IGF-Ⅱ基因位于染色体的短臂11P15.5，长30kb，含有9个外显子，4个启动子，可转录成3~4种IGF-ⅡmRNA，按其结构分为两类：在胚胎发育期出现为胚胎型IGF-ⅡmRNA，是在启动子P2、P3、P4作用下形成的，此种IGF-ⅡmRNA在出生后消失，代之以由P1启动子作用形成的成年型IGF-ⅡmRNA。成熟IGF-Ⅱ由67个氨基酸残基组成，含有3个二硫键，分子量为74KD。胚胎型IGF-Ⅱ正常存在于胚胎的肝、肾、胃肠、肌肉及神经组织中;成年型IGF-Ⅱ主要由肝细胞分泌，但其量少，一般较难检出。在正常成人血清、脑组织及脑脊液中占IGF-Ⅱ总量的10%~20%，但在11~14岁儿童、肢端肥大症患者以及许多肿瘤中大量存在[3]。

　　本文研究发现，胃癌组、CAGD组血清IGF-Ⅱ水平较对照组均明显升高，且胃癌组较CAGGM组、CAGD组血清IGF-Ⅱ水平升高亦显著。可能的机制为IGF-Ⅱ“基因印迹”松弛或“丢失”，失去正常的“基因印迹”，激活沉默的胚胎型IGF-ⅡmRNA，使其表达增强，总量增多。基因过度表达使IGF-Ⅱ产生过多，释放至外周血液中[4]。胃癌细胞产生过多的IGF-Ⅱ，破坏了细胞因子网络的动态平衡，导致促生长作用加强，细胞增殖失控，最终发生癌变[5]。提示检测胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平对其诊断可能有重要临床意义。CAGD组与CAGGM组比较，血清IGF-Ⅱ水平亦有显著性差异。故对CAGD患者检测其血清IGF-Ⅱ的变化，对其血清IGF-Ⅱ水平升高者，应动态随访。胃癌患者手术后1周血清IGF-Ⅱ水平较手术前无明显变化，而在手术后2周时其血清IGF-Ⅱ水平较手术前显著下降，与文献报道较一致[6]。提示动态检测胃癌患者手术前、后血清IGF-Ⅱ变化，对判断手术是否切除彻底、有无术后复发等可能具有重要意义。

　　本资料显示，中、晚期胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较早期患者显著升高。差分化型胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平较分化型明显升高。其原因可能为肿瘤细胞自分泌大量IGF-Ⅱ，直接作用于自身或邻近细胞的IGF-Ⅱ受体，在细胞浆内形成短路循环，加速或放大了细胞IGF-Ⅱ生长信号的传递，促进细胞周期从G1→S期转变，加快细胞增殖[7]，同时可通过下调Fas表达，阻止细胞凋亡发生的结果[8]。提示检测胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平的变化对判断其病情变化也可能有一定临床指导意义。本文发现胃癌肝转移组血清IGF-Ⅱ水平与无肝转移组比较无明显差异。提示胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平的升高，并非因肝细胞分泌的IGF-Ⅱ增加所致，主要因肿瘤细胞分泌的IGF-Ⅱ增加引起。

　　新近研究发现，胃癌患者Hp感染可引起许多细胞因子如IL-2、IFN-γ水平下降，IL-4、IL-8、IL-10及IGF-Ⅱ产生增加，共同促进肿瘤的发生[9]。本组资料表明，采用14C-UBT和Hp-DNA检测Hp均阳性者13例，其阳性率为41.9%，与文献报道基本一致。Hp(+)组患者血清IGF-Ⅱ水平较Hp(-)组无明显升高，提示Hp感染和IGF-Ⅱ水平的变化无明显关系，二者可能作为独立因素共同参与胃癌的发生、发展。

　　总之，胃癌患者血清IGF-Ⅱ水平升高，是胃癌发生、发展的重要因素之一，检测血清IGF-Ⅱ水平的变化，对胃癌的诊断、手术切除是否彻底、判断病情变化有一定临床价值;Hp、IGF-Ⅱ可能分别作为独立因素，共同参与胃癌的发生、发展。

　　【参考文献】

　　[1] Wittrock J, Schweizer P, Girgert R, et al. Induction of N-myc in neuroblastoma by autocrine IGF-Ⅱdepends on farnesylated Ras. Application of farnesyl- transferase inhibitors[J]. Anticancer Res, 2002,22(6): 4205-4209.

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　　[6] Lee D, Yang D, Kang C, et al. Serum insulin-like growth factors (IGFs) and IGF binding protein (IGFBPs)-3 in patients with gastric cancer: IGFBP-3 protease activity induced by surgery[J]. J Korean Med Sci, 1997,12(1): 32-39.

　　[7] LeRioth D, Rpberts CT. The insulin-like growth factor system and cancer [J]. Cancer Lett, 2003,195(2): 127-137.

　　[8] Byrne A, Southgate J, Brison D, et al. Effects of insulin-like growth factorⅠandⅡon tumor necrosis factor alpha induced apoptosis in early murine embryos[J]. Reprod Fertil Dev, 2002,14(1-2): 79-83.

　　[9] Buruk F, Berberoglu U, Pak I, et al. Gastric cancer and Helicobacter pylori infection [J]. Br J Surg, 1993, 80(3): 378-379.