阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征红细胞免疫功能的研究

　　作者：苏力　　作者单位：050051 石家庄市，河北省人民医院老年病科

　　【摘要】 目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者红细胞免疫功能的变化以及两者之间的关系。方法 选择OSAHS患者及健康对照组各30例，测定其红细胞C3b受体花环率及红细胞免疫复合物花环率，并评价其相互关系。结果 OSAHS患者红细胞C3b受体花环率显著低于对照组(P<0.01)，红细胞免疫复合物花环率显著高于对照组(P<0.01)。结论 OSAHS患者存在红细胞免疫功能降低，对OSAHS病情进展可能具有一定的意义。

　　【关键词】 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症,红细胞,免疫

　　红细胞免疫是机体免疫系统的一个重要组成部分，可通过红细胞自身表面的补体受体，在细胞因子的产生及淋巴细胞免疫中起到调控作用[1]。本研究旨在了解阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome，OSAHS)患者的红细胞免疫功能，并探讨红细胞免疫功能变化对OSAHS患者疾病进展的影响。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　选择2005年10月至2007年2月在河北省人民医院门诊就诊、住院患者及健康查体者。随机选择OSAHS患者30例(OSAHS组)，均为男性，年龄42～77岁，平均年龄(63±10)岁;体重指数(body mass index，BMI)24～34 kg/m2，平均(30±3)kg/m2;均有不同程度夜间睡眠中打鼾、呼吸暂停及白天嗜睡病史，由多导睡眠图监测确诊。另选择对照组30例，均为男性，年龄43～72岁，平均年龄(62±10)岁;BMI 22～34 kg/m2，平均(28±4) kg/m2。经询问病史及行Stardust便携式睡眠呼吸监测仪初筛检查排除OSAHS。所有研究对象均除外慢性肺部病变、神经肌肉疾病、甲状腺疾病、糖尿病及其他内分泌疾病、营养代谢疾病、冠心病、脑血管意外，2组年龄、体重指数等一般特征差异无统计学意义(P>0.05)。

　　1.2 测定方法

　　1.2.1 睡眠呼吸监测：所有OSAHS患者均行多导睡眠图检查。保证患者在安静、舒适的状态下，在睡眠呼吸监测室应用美国伟康公司Ailce3多导睡眠呼吸监测系统进行夜间至少7 h的睡眠呼吸监测，同步监测脑电图、二导眼动图、下颌颏肌电图、口鼻呼吸、胸腹呼吸运动、心电图、手指血氧饱和度、体位及鼾声。同样环境下，应用Startdust便携式睡眠呼吸监测仪对健康对照组进行初筛，同步监测口鼻呼吸、胸腹呼吸运动及手指血氧饱和度，但无睡眠分期的显示。所有数据自动记录、存储在计算机内，次日晨监测结束后，由人工检查、修正后得出监测结果。包括睡眠呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index，AHI)、睡眠呼吸障碍事件时最低血氧饱和度、平均最低血氧饱和度、SaO2<90%占总睡眠时间百分比等睡眠呼吸监测指标。

　　OSAHS的诊断依据中华医学会呼吸病学分会睡眠呼吸疾病学组制定的诊断标准，即临床上有典型的夜间睡眠时打鼾及呼吸不规律，白天过度嗜睡，经多导睡眠图监测提示每夜7 h睡眠过程中呼吸暂停及低通气反复发作在30次以上，或AHI(平均每小时睡眠中的呼吸暂停低通气次数)≥5次/h。呼吸暂停指睡眠过程中口鼻呼吸气流均停止10 s以上，低通气指睡眠过程中呼吸气流强度较基础水平降低50%以上并伴有血氧饱和度较基础水平下降≥4%。AHI<5 次/h，则排除OSAHS[2]。

　　1.2.2 红细胞C3b受体花环(RBCC3bRR)和红细胞免疫复合物花环(RBCICR)检测：按郭峰法[3]，取冻干补体致敏与未致敏酵母试剂各1支,用生理盐水溶解,2 000 r/min离心3 min,弃上清,重复2次,恢复体积1 ml,浓度为1×108/ml。取末梢血或肝素抗凝血1滴加入2 ml生理盐水洗2次,每次2 000 r/min×3 min,配成1.25×107/ml。取上述致敏酵母菌悬液与未致敏酵母菌悬液各50 μl,加入2支康氏试管,各加红细胞悬液50 μl,混匀,37℃水浴30 min,取出加0.25%戊二醛1滴,轻轻混匀,室温5～10 min,水平抹片,自然干燥,瑞氏染色,湿片镜检,以1个红细胞结合2个或2个以上酵母菌为阳性细胞,计200个红细胞求阳性率。因为红细胞膜上有C3b受体，当C3b致敏的酵母菌上吸附有小白鼠血清的C3b，在红细胞数与C3b致敏的酵母菌数的比例合适时，红细胞可通过C3b受体吸附由C3b致敏的酵母菌，以致红细胞被由C3b致敏的酵母菌包绕，形成酵母菌花环。以高倍镜计数200个红细胞。凡吸附2个以上的酵母菌即为红细胞C3b花环。红细胞免疫复合物花环是因为煮过的酵母菌外膜附有酵母多糖可粘附红细胞膜上所吸附的免疫复合物中的C3b，以致红细胞被酵母菌包绕,形成酵母菌花环。所有试剂由上海第二军医大学长海医院免疫室供给，具体操作按说明书。

　　1.3 统计学分析

　　计量资料以±s表示，组间比较用t检验，有关指标之间的相关关系采用直线相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 OSAHS患者红细胞免疫功能的变化

　　OSAHS患者红细胞C3b受体(RBCC3bRR)花环率明显低于对照组(P<0.01)，红细胞免疫复合物(RBCICR)花环率明显高于对照组(P<0.01)，见表1。表1 2组红细胞免疫功能检测结果(略)

　　2.2 OSAHS患者病情严重程度与红细胞免疫功能的关系 OSAHS患者RBCC3b受体花环率与AHI呈负相关(r=-0.417，P<0.05)。

　　3 讨论

　　OSAHS是一种睡眠期间发生部分或完全上呼吸道闭塞，导致呼吸暂停和(或)低通气，主要表现为上呼吸道充血，水肿，体内长期慢性缺氧的睡眠紊乱性疾病。研究已经证实，OSAHS患者机体正常的免疫功能，尤其是白细胞系统参与的细胞及体液免疫功能会出现不同程度的损伤[4]。

　　近年来，现代医学研究证实，红细胞不仅具有呼吸功能、而且还参与机体的免疫防御机制，是机体免疫功能的重要组成部分。红细胞免疫复合物受体Ⅰ(erythrocyte complement receptorⅠ，ECRⅠ，亦称为C3b受体)是红细胞最重要的免疫复合物质，与红细胞多种天然免疫功能密切相关。通过该受体的免疫粘附作用，红细胞产生清除循环免疫复合物、识别和储存抗原、清除机体氧自由基、参与细胞因子的调控等免疫功能，以维持机体内环境的稳定性。同时在多种疾病的发病过程中，红细胞免疫功能的低下亦起到了重要作用[2]。

　　本研究表明，OSAHS患者RBCICR水平明显地升高，RBCC3b 水平明显地降低(P<0.01)，说明：OSAHS患者红细胞免疫功能的损害以RBCC3b降低和红细胞免疫复合物增高为主的免疫损伤。红细胞免疫功能参与了OSAHS的病理损伤过程，且与OSAHS病情的严重程度明显相关(r=-0.417)。其原因可能与下列因素有关：(1)长期打鼾的振动刺激，使上呼吸道防御功能降低[5]，而长期缺氧，使上呼吸道局部造成慢性病理损伤[6，7]，可进一步影响机体免疫系统，这种非特异免疫功能降低，使机体易受细菌、病毒等病原微生物的侵害，造成体内经常处于感染状态，最终使机体细胞免疫紊乱，(2)长期慢性缺氧致使肝脾功能受损，红细胞灭活能力下降，红细胞数量增多，导致血流动力学异常[8]，循环免疫复合物(CIC)增多，占据红细胞CR1受体位点，使其活性下降，(3)睡眠呼吸紊乱时机体儿茶酚胺类物质分泌增多，导致氧自由基产生增加[9]，(4)长期缺氧使红细胞抗氧化能力受损[10]，氧自由基可以破坏红细胞膜正常结构，使红细胞清除氧自由基能力产生进一步下调，可能是机体红细胞免疫功能受损并导致病情的进展的重要原因。故在OSAHS 治疗过程中，调节免疫机制、改善通气、纠正缺氧和二氧化碳潴留、适当应用氧自由基消除剂治疗，减小氧自由基对人体的损害是重要的环节。

　　【参考文献】

　　1 郭峰,钱宝华,张乐之主编.现代红细胞免疫学.第1版.上海：上海第二军医大学出版社,2002.6162.

　　2 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征诊治指南(草案).中华结核呼吸杂志，2002，25:195198.

　　3 郭峰,卢紫茜,赵中平,等.红细胞免疫功能的初步研究.中华医学杂志,1982,62:715716.

　　4 王丽菌.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征病因初探.河北医药，2006，28：213.

　　5 Kirkness JP,Madronio M,Stavrinou R,et al.Surface tension of upper airway mucosal lining liquid in obstructive sleep apnea/hypopnea syndrome.Sleep，2005，28:45763.

　　6 Devouassoux G,Levy P,Rossini E,et al.Sleep apnea is associated with bronchial inflammation and continuous positive airway pressureinduced airway hyperresponsiveness.J Allergy Clin Immunol，2007，119:597603.

　　7 O'Brien LM,Serpero LD,Tauman R,et al.Plasma adhesion molecules in children with sleepdisordered breathing.Chest，2006，129:947953.

　　8 Dikmenoglu N,Ciftci B,Ileri E,et al.Erythrocyte deformability, plasma viscosity and oxidative status in patients with severe obstructive sleep apnea syndrome.Sleep Med，2006，7:255261.

　　9 Minoguchi K,Yokoe T,Tanaka A,et al.Association between lipid peroxidation and inflammation in obstructive sleep apnoea.Eur Respir J，2006，28:378385.

　　10 Barcelo A,Barbe F,de la Pena M,et al.Antioxidant status in patients with sleep apnoea and impact of continuous positive airway pressure treatment.Eur Respir J，2006，27:756760