慢性阻塞性肺疾病患者sTREM1的测定及其意义

　　作者：戴斌　　作者单位：咸宁学院临床实验教学中心,湖北 咸宁

　　【摘要】 目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血和诱导痰液中可溶性髓样细胞表达的激发受体1(sTREM1)的浓度及其与病情严重程度的关系。方法 分别测定12例COPD急性加重期(AECOPD)患者治疗前、治疗2周、稳定期的外周血和痰液中sTREM1的浓度及白细胞计数(WBC)，以及12名健康人的外周血sTREM1的浓度。分析COPD各组外周血与痰液中sTREM1 浓度与第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%预计值)的关系。 结果 COPD治疗前组和治疗2周组痰液中的sTREM1浓度都明显高于稳定期组(P<0.05)。治疗前组、治疗2周组和稳定期组外周血中sTREM1与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。COPD治疗前组痰液中的 sTREM1浓度与相对应FEV1%预计值呈负相关，对FEV1%影响从大到小依次为痰液sTREM1浓度和性别。结论 痰液中sTREM1浓度可以反映COPD气道炎症的程度并作为判断肺功能预后的参考指标，外周血sTREM1浓度并不能真实反映气道炎症严重的程度。

　　【关键词】 慢性阻塞性肺疾病;气道炎症;可溶性髓样细胞表达的激发受体1;白细胞计数;肺功能

　　Expression of sTREM1 in Patients with Chronic Obstructive Pulmonary Disease DAI Bin(Clinical Experimental Teaching Center,Xianning University,Xianning Hubei 437100,China)

　　ABSTRACT: Objective To investigate the contents of sTREM1 in peripheral blood and sputum from patients with COPD, and to analyze the correlation between sTREM1 and severity of COPD. Methods The levels of sTREM1 in peripheral blood and sputum were determined by ELISA in 12 acute exacerbation of COPD subjects, 2 weeks after treatment, stable COPD subjects, and 12 healthy individuals. The total white cell counts, pulmonary function tests were performed at the same time. The relationship between the content of sTREM1 in sputum from patients with acute exacerbation of COPD and FEV1 was analyzed. Results The content of sTREM1 in sputum from acute exacerbation of COPD group and 2 weeks after treatment was significantly higher than that in stable group, but in peripheral blood, they was no significant diference as compared with control group. The level of sTREM1 in sputum from acute exacerbation of COPD was significantly negative correlated with FEV1%. Conclusion The airway inflammation can be reflected by the content of sTREM1 in sputum from patients with acute exacerbation of COPD, and the level of sTREM1 may be a prognosis index of FEV1%. KEY WORDS: COPD;Airway inflammation;sTREM1;WBC;Pulmonary function

　　慢性阻塞性肺疾病(COPD)是以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征的病变[1]。研究表明[2]，感染为COPD急性加重的主要诱发因素，其中细菌感染在发病中起重要作用，而频繁的发作是肺功能下降的重要原因。Bouchon A等[3，4]鉴定出可溶性髓样细胞表达的激发受体1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cell1，sTREM1)主要在中性粒细胞和单核细胞/巨噬细胞等髓系细胞上表达，并证实sTREM1在炎症疾病的病理生理中起重要的作用。本研究旨在了解急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)患者外周血和痰液中sTREM1的浓度及其与病情严重程度的关系，为揭示COPD气道感染机制和抗感染提供临床参考。

　　1 材料和方法

　　1.1 标本采集对象

　　抽取从2005年6月至2006年9月在我院附属第一医院住院确诊的12例AECOPD患者治疗前、治疗2周及稳定期外周静脉血共36份，并同时进行诱导痰液。取健康人的外周静脉血12份做对照。COPD患者及健康对照组的一般情况。COPD患者及健康对照组的一般情况

　　1.2 确定入选标准

　　根据COPD诊治指南[1]：COPD 的诊断应根据病史、危险因素接触史、体征及实验室检查等资料综合分析确定。存在不完全可逆性气流受限是诊断COPD 的必备条件。急性加重期标准 [1]：患者短期内咳嗽、咳痰、气短和(或) 喘息加重，咳痰量增多,呈脓性或粘液脓性,可伴发热等炎症明显加重的表现。稳定期标准[1]：指患者出院3个月后咳嗽、咳痰、气短等症状稳定或症状轻微，期间没有再次急性发作。对照组入选标准：对照组与治疗组年龄匹配，研究期间没有任何感染的症状和体征，体检正常，既往史无特殊。

　　1.3 剔除标准

　　①排除患哮喘、支气管扩张、肺结核、支气管肺癌等其他呼吸系统疾病者。②排除患心功能不全及风湿病、甲亢、糖尿病等自身免疫性疾病者。③排除大咯血、气胸、严重肺大疱、近期曾行胸腹手术、严重高血压、有自发性出血倾向、神志不清及意识模糊不宜行肺功能检查者。④排除长期激素治疗、肿瘤患者。

　　1.4 外周血和痰液标本收集及处理

　　所有受试者抽取静脉血12ml, EDTA管2ml，用作白细胞计数和分类。留取血清并存于-70℃冰箱待测。患者在痰液诱导前15min接受万托林一喷，通过雾化器吸入3%的盐水15min，第1次咳痰舍去，中间有痰可咳入试验用试管内。整个过程最多进行30min后停止或患者出现任何不适立即停止。

　　1.5 测定外周血和痰液中sTREM1的浓度

　　外周血和痰液中sTREM1的浓度测定均采用美国R&D公司生产的Human TREM1 ELISA 试剂盒，经MULTISKAN MK 3型自动酶标仪比色分析获取样本的吸光率OD值，根据标准曲线，将测试样本的OD值转化为浓度值(pg/ml)。操作严格按说明书进行。

　　1.6 肺功能测定

　　早上测定前24h不能使用支气管扩张剂。COPD不同治疗阶段患者和对照健康人分别在接受检查前均安静休息15min以上，取坐位完成3～5次用力呼气，观察FV曲线，得到最佳2次FVC及FEV1的变异<5%或绝对值<0.2L。可逆实验采用吸入舒喘灵200μg，20min后重复测试。测定主要指标为FVC、FEV1、FEV1/FVC。

　　1.7 统计学处理

　　用SPSS13.0统计软件处理，实验数据以 ±s表示，对不同组间数据采用单因素方差分析(One WayANOVA)。遵循正态分布、方差齐者，组间两两比较采用LSD法分析，方差不齐者采用GamesHowell法。相关分析采用Pearson相关分析法。P<0.05表示差异有统计学意义。多元线性回归分析采用逐步回归法。

　　2 结 果

　　2.1 外周血白细胞计数(109/L)

　　与对照组(7.0±3.4)比较，COPD治疗前组外周血白细胞计数(12.3±5.3)显著增加(P<0.05),COPD治疗2周组(7.6±2.8)无显著性差异(P>0.05),稳定期组(6.9±2.2)亦无显著性差异(P>0.05)。

　　2.2 痰液白细胞计数 (109/L)

　　痰液白细胞计数与COPD治疗前组(12.6±6.2)比较，稳定期组(2.6±1.2)和治疗2周组(5.7±2.8)明显减少，差异均有显著性(P均<0.01)。稳定期组痰液WBC总数与治疗2周组之间比较，无显著性差异(P>0.05)。

　　2.3 痰液及血清sTREM1浓度

　　COPD治疗前组及治疗2周组痰液sTREM1浓度与稳定期组比较，有显著性差异(P均<0.05), 治疗前组与治疗2周组比较没有显著性差异(P>0.05)。COPD各组血清sTREM1的浓度与对照组比较均无显著性差异(P均>0.05)。见表2。表2 各组痰液及血清中sTREM1浓度比较与稳定期组进行比较, *P<0.05

　　2.4 COPD患者痰液中sTREM1浓度与肺功能(FEV1%)的关系与肺功能(FEV1%)的关系

　　2.5 以肺功能为因变量的多元线性回归分析

　　COPD影响FEV1%的相关因子，对FEV1%影响从大到小依次为痰液sTREM1浓度和性别。回归方程(校正后)：FEV1= -0.687 X1+0.424 X2 。自变量为痰sTREM1浓度、Sex，“男”=1;“女”=2。痰sTREM1浓度的斜率为-1.354、标准回归系数分别为-0.687(P<0.01)。Sex的斜率为18.106、标准回归系数分别为0.424(P<0.01)。

　　3 讨 论

　　AECOPD可由多种原因引起，但2/3由下呼吸道感染所致，其中以细菌感染为主[5,6]。69.6%的AECOPD患者下呼吸道分泌物中可分离到细菌，气道内细菌总数与气道炎症及肺功能下降程度明显相关[7,8]。本实验发现sTREM1在外周血髓样细胞上的表达COPD组与健康对照组无显著性差异，提示TREM1的激活路径可能仅限于感染肺实质。同时AECOPD外周血中sTREM1 浓度与对应的外周血白细胞计数不呈平行关系，这也反映外周血中的sTREM1浓度并不能真实反映COPD气道炎症的严重程度。但不排除在白细胞缺乏或免疫低下的患者，是否会因为白细胞和炎症反应的不足而导致外周血中sTREM1无法真实反应肺部的感染。

　　通过测定患者痰液中sTREM1的浓度表明COPD治疗前组与稳定期组有显著性差异，治疗前组明显增高，说明sTREM1在AECOPD气道炎症中发挥重要作用。但是，治疗前与治疗2周组sTREM1的浓度没有显著性差异，表明目前抗感染治疗的效果较差，这反映AECOPD时sTREM1在肺髓样细胞上长时间表达，sTREM1能成为肺部气道感染的可靠生物学标记，尤其是在痰液中。而且，本实验各组痰液中sTREM1的浓度差异与各组痰液白细胞计数差异相符，这充分表明sTREM1与细菌感染的严重程度相关,是反映感染的一个新指标，可以成为气道炎症治疗疗效的一个判断标准。

　　COPD治疗前组痰液中sTREM1的浓度与相匹配的肺功能的相关分析，痰液中sTREM1浓度与其相应的FEV1呈负相关，多因素分析也发现AECOPD对FEV1的影响因子从大到小依次为痰液sTREM1浓度和性别。这表明气道炎症可能是加剧不完全可逆性气流受限的因素之一。受限的原因主要是由于炎性细胞聚集、支气管内粘液渗出等。因此，AECOPD痰液中sTREM1浓度不断增加的患者需要更加强调控制炎症，以减缓肺功能的进一步恶化。

　　【参考文献】

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