急性脑梗死患者血清sCD40L表达变化的研究

　　作者：陈然,张骏　　作者单位：

　　【摘要】目的 观察脑梗死患者及健康成人外周血清可溶性CD40L(sCD40L)的变化，以便为病情的预后评估提供指标。 方法 应用双抗夹心酶联免疫吸附法分别对脑梗死组40例，健康对照组30例血清sCD40L检测。 结果 急性脑梗死组在发病48 h内sCD40L水平明显高于健康对照(P<0 .05)，且与病情的轻重程度相关。 结论 血清可溶性CD40L升高是评估急性脑缺血的可靠的血清学指标。

　　【关键词】 急性脑梗死; CD40L

　　Changes of soluble CD40L of blood serum in patients with acute cerebral infarction and significanceChen Ran, Zhang JunDepartment of Neurology, Luan People's Hospital, Luan 237005[Abstract] Objective To investigate the level of the expression of CD40L of blood serum in patients with cerebral infarction in order to provide new index for the evaluation of prognosis. Methods Totally 30 normal controls and 40 patients with cerebral infarction were selected in Affiliated Hospital of Zunyi Medical College from January to May 2005.The levels of the expression CD40L was analyzed the serum sCD40L levels were measured by enzyme-linked immuno-sorbent assay (ELISA). Results The levels of sCD40L in the patients with cerebral infarction groups were higher than that in control group in 48 hours (P<0.01) and showed significant difference between cerebral infarction(P<0.05). Conclusion Enhanced level of serum sCD40L is a reliable prognostic index for acute cerebral ischemia and it may represent a marker of disease contition.

　　[Key words] Acute cerebral ischemia; CD4OL

　　动脉粥样硬化(AS)是急性脑梗死的基本病因。最近许多研究表明CD40-CD40L相互作用是体液免疫和细胞免疫中一条重要细胞信号转导途径[1]，CD4O/CD4OL在T淋巴细胞和B淋巴细胞的活化及其介导的体液免疫过程中起重要作用。CD4OL是一种跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子(TNF)超基因家族成员，是多种免疫及炎症调节的重要介质。近年来发现，CD40/CD40L广泛存在于动脉粥样硬化斑块的各种细胞中，其相互作用显著影响AS相关细胞的功能，参与了动脉粥样硬化病变的各个阶段及粥样斑块稳定性的改变。近年的许多实验已证明人动脉粥样硬化损伤部位有大量的CD40L+T细胞聚集，病灶部位的血管内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞均能同时表达CD40和CD40L，但正常组织中这3种细胞皆无CD40L表达[2]。目前，对急性脑梗死(ACI)时sCD40L对ACI病情及预后的判断和评价，尚少见报道。为此，本实验通过对脑梗死40例患者发病48 h及健康对照组30例血清中sCD40L水平的检测，来探讨sCD40L水平与脑梗死患者病情变化及预后的关系。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象 2005年1至5月遵义医学院附属医院神经内科脑梗死住院患者40例，其中男性29例，女性11例;平均年龄(67.48±8.56)岁。纳入标准：诊断符合第四届全国脑血管病会议修订标准，并且病例均经头颅CT和(或)MRI证实;排除标准:患者无感染、肿瘤和自身免疫性疾病，采血前未用扩容、扩血管及溶栓治疗，无创伤及手术。健康对照组30例，其中男性17例，女性13例，平均年龄(66.86±7.76)岁，均系无感染、肿瘤及自身免疫性疾病的健康成年人，头颅CT检查无颅内疾病，来自同期遵义医学院附属医院门诊体检中心健康体检者。病例组与健康对照组年龄及性别经统计学检验差异无统计学意义，且各组糖尿病、 高血压、高血脂差异亦无统计学意义。

　　表1 各组入选对象的临床资料

　　1.2 方法

　　1.2.1 主要实验器材

　　酶标仪(ELX800 美国 Bio-tech.Inc 测定样品的OD植型号)，北京普狼公司 ;电子天平，北京赛多利斯电子有限公司产品;自动洗板机，北京普狼公司;台式高速离心机， EBA21，Hettich，Germany; -20℃低温冰箱，德国西门子;-80℃低温冰箱，Forma Scientic 德国;37℃乳育箱，GALLENKAMP，VNK。

　　1.2.2 主要试剂 检测sCD40L试剂盒由(humansCD40LBMS239)奥地利Bender Medsystems公司提供。

　　1.2.3 标本的采集与处理 脑梗死患者发病48 h内抽取全血3 ml放入含浓度为129 mmol/L枸橼酸钠0.5 ml的5 ml试管中，用离心机在3000 r/min条件下离心15 min，然后抽取上层血清贮存在子弹头试管中密封，在-80℃条件下保存2个月待测。健康对照组标本的采集与处理同脑梗死组，实验采用双抗体夹心ELISA法。

　　2 结果

　　表1 神经功能缺损程度与血清sCD40L关系注：不同病情ACI患者sCD40L含量比较结果显示神经功能缺损程度越重，血清sCD40L含量越高，差异有统计学意义(P<0.05)。表2 各组血清sCD40L(ng/ml)的变化(■±S)注：ACI组血清sCD40L含量明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组与健康对照组sCD40L比较，t=3.248,P<0.05。表3 不同病情ACI患者sCD40L含量的比较 (■±S)注：与中度组比较△*P<0.05;与重度组比较△*P<0.05，与重度组比较□P<0.01。

　　3 讨论

　　动脉粥样硬化所致脑血管疾病如脑血栓在人类致残、致死的原因中占有重要地位，它是危害人类健康的主要疾病，对其机制的研究也一直是脑血管病研究领域的热点。长期以来，人们经过详细的临床病理对照研究和动物实验及晚近问世的各种检查(如影像技术、介入技术、血管超声检查技术等)，发现易损斑块(易于破裂、形成血栓和进展迅速的斑块)和易损血液(易于发生血栓的血液)是导致急性脑血管病事件的重要因素。研究己证实CD40L、C反应蛋白、粘附分子、基质金属蛋白酶、核因子-xB等参与了AS斑块内主要细胞成分如血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞等发生的炎症反应和调节过程，与动脉硬化的发生和发展有关。脑动脉的粥样硬化是脑梗死的主要发病原因，在脑梗死病变发生及进展过程中，多种细胞因子如白细胞介素1β[8]、肿瘤坏死因子α (TNF-α )及干扰素(IFN-γ)可促进内皮细胞单核细胞表达CD40L[9]，可激发CD40与CD40L的互联[10,11]，可促进细胞间薪附分子-1(ICAM-1)和血管粘附分子-1(VCAM-1)表达增加。从而介导活化血小板或内皮细胞与中性粒细胞和单核细胞黏附，进一步引起血管功能失调和组织损伤。同时，CD40与CD40L相互作用后产生的基质金属蛋白酶(MMPs)介导结缔组织降解、清除和重建，破坏纤维帽中的胶原，引起斑块破裂，导致血栓形成并最终使动脉管腔闭塞，即参与了脑动脉粥样硬化的发生和发展。本次临床实验研究中，我们通过对脑梗死患者与健康者血清sCD40L检测发现:脑梗死组血清sCD40L水平在发病48 h内明显高于正常对照组(P <0.05)。从本实验可得出：(1)sCD40L可能是动脉粥样硬化性疾病一项炎性指标。(2)脑梗死患者在急性发作期(48 h内)血清sCD40L的水平能较好地反映病情及预后。因此，建议临床工作中在条件许可的情况下定期检测患者血清sCD40L水平，有助于监测病情及判断预后。

　　【参考文献】

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