远志木部及皮部总皂苷含量比较分析
发表时间:2012-07-17 浏览次数:691次
作者:姜博,季伟鑫,盛宝英 作者单位:1.佳木斯大学临床医学院2006级硕士研究生,黑龙江 佳木斯 154003;2.佳木斯大学化学与药学院2004级药学本科生,黑龙江 佳木斯 154007;3.佳木斯大学第一附属医院神经内科,黑龙江 佳木斯 154003
【摘要】目的:对远志原药材木部及皮部中总皂苷含量进行比较分析,用以指导临床用药。方法:以齐墩果酸为对照品,香草醛-高氯酸为显色剂,采用紫外-可见分光光度法在575 nm处测定远志总皂苷含量。结果:以此方法对远志木部及皮部中总皂苷含量进行比较、分析,为远志皮部总皂苷含量为3.33 %、木部总皂苷含量为0.69 %。结论:远志中皮部总皂苷含量远远大于木部,远志总皂苷主要存在于根皮中。因此,在提取远志中的总皂苷时,应选用根皮为原料药材。
【关键词】 远志总皂苷;含量比较;紫外-可见分光光度法
Comparative analysis of the total saponins content in Polygalaceae phloem and xylem part JIANG Bo,JI Weixin,SHENG Baoying 1.Postgraduate of Grade 06 of the Clinical Medical College of Jiamusi University,Jiamusi 154003, China; 2. Undergraduate of Grade 04 of the College of Chemistry and Pharmacy of Jiamusi University, Jiamusi 154007,China;3.The First Affiliated Hospital of Jiamusi University,Jiamusi 154003,China Abstract:Objective:To make a comparative analysis of the total saponins content in Polygalaceae phloem and xylem parts to guide clinical treatment.Methods:We determined the Polygalaceae total saponins content at the 575 nm with oleanolic acid as a reference substance and vanillin-Perchoric acid as a developer by using UV-visible spectrophotometry.Results:The total saponins content of xylem parts was 3.33%,and that of Polygalaceae phloem was 0.69%.Conclusion:The total saponins content in Polygalaceae xylem parts is much more than that of phloem parts,the total saponins in Polygalaceae mainly exists in xylem parts. Therefore,the xylem parts should be used as raw material to extract the total saponins.
Key words:total saponins in polygalaceae; Comparison of content; UV-visible spectrophotometrydoi:10.3969/j.issn.1008-0104.2009.01.021doi:10.3969/j.issn.1008-0104.2009.01.020
远志Polygala tenuifolia Willd,为远志科Polygalaceae远志属Polygala多年生草本植物。《中华人民共和国药典》(2005版)收载了2种基源植物:远志和卵叶远志P sbirica L,其药用部位为根。味苦,性辛、温,归心、肾、脾经,具有安神益智、祛痰、消肿功效,用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸、神志恍惚、咳痰不爽、疮疡肿毒、乳房肿痛等[1]。其药用成分包括远志皂苷、黄酮类化合物、生物碱和寡糖脂类等[2]。其用药部位,历代本草主张“用之去心取皮”,药材中有远志筒、远志肉和远志棍记载,即其“皮部”和“木部”。目前,市场销售远志药材多为其木部和皮部的混杂品。远志皂苷为镇静、祛痰的有效部位,我们进行的药效学研究结果与此一致,故我们对远志皂苷进行了提取,以齐墩果酸为对照品,采用紫外-可见分光光度法测定远志总皂苷含量。
1 仪器、试剂和材料
1.1 仪器
RE-52A 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),紫外-可见分光光度计-757型(上海精密科学仪器厂),JHBE-50S闪式提取器(北京金鼎科技发展有限公司)。
1.2 试剂
正丁醇(天津市恒兴化学试剂制造有限公司),三氯甲烷(天津市北方天医化学试剂厂),无水乙醇(沈阳市红日化工厂),石油醚(哈尔滨市新达化工厂),乙酸乙酯(天津市科密欧化学试剂开发中心),高氯酸(天津市东方化工厂),以上试剂均为分析纯。
1.3 材料
远志,购于佳木斯东北药店,产地山西,经鉴定为Polygala tenuifolia Willd的干燥根。齐墩果酸对照品,批号110709-200505,购于天津一方科技有限公司。D101型大孔吸附树脂,购于天津市汇达化工有限公司。
2 方法与结果
2.1 供试品制备
将远志干燥根用少量水润湿,放置3h。手工分离皮部及木部,干燥后分别研成粗粉。取远志皮部及木部粗粉各10g加水浸泡3h,将粉末浸泡液倾入闪式提取器中,转速5,提取时间0.5min。弃去滤渣,浓缩至150mL。将浓缩液上D101型大孔树脂,分别用蒸馏水、30%乙醇、70%乙醇各3BV以1BV/h速度依次洗脱,收集70%乙醇洗脱部位,并蒸去乙醇。石油醚脱脂,保留水液。用正丁醇萃取,蒸干正丁醇液,即得远志粗皂苷。精密称取粗皂苷0.1g,置50mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀备用。
2.2 对照品溶液制备
精密称取齐墩果酸对照品,加甲醇制成每1mL含0.1118mg的溶液,作为对照品溶液。
2.3 最大吸收波长选择
精密吸取皮部供试品溶液、对照品溶液0.5mL于具塞试管中,按标准曲线项下方法显色,于450~600nm扫描测定最大吸收度,结果显示,对照品及供试品溶液均在575nm处有最大吸收,故选择575nm为测定波长。
2.4 标准曲线的制备
精密吸取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于5支10mL容量瓶中,水浴加热挥去溶剂,于每支容量瓶中分别精密加入加1.0mL 5%香兰素试剂、4.0mL高氯酸,密塞,摇匀,于60℃水浴恒温加热25min,取出后立即用冰水浴冷却2~3min,用冰醋酸定容。于575nm波长处测定吸光度,随行试剂作空白参比,以吸光度A为纵坐标,齐墩果酸对照品的浓度(mg/mL)为横坐标,求得回归方程Y=60.12X+0.0101(r=0.9987),对照品在0.02~0.1mg浓度范围内呈良好线性关系。
2.5 精密度试验
精密量取齐墩果酸对照品溶液0.5mL,置具塞试管中,水浴挥干,余项操作同前,在575nm处,重复5次测定其吸光度,RSD=0.3%。
2.6 稳定性试验
精密量取齐墩果酸对照品溶液0.5mL,置具塞试管中,水浴挥干,余项操作同前,在575nm处,从0min起,每隔10min测定一次吸光度。1h后测定的吸光度下降了6%,说明此比色反应在1 h范围内基本稳定,要保证所测得的吸光度准确可靠,测定应在显色后1h内完成。
2.7 重现性试验
精密量取皮部远志粗皂苷甲醇溶液0.5mL 5份,分别置具塞试管中,水浴挥干,余项操作同前,在575nm处测定其吸光度,RSD=0.58%。
2.8 加样回收率试验
精密量取皮部远志粗皂苷甲醇溶液0.5mL 5份,置具塞试管中,各加入精密量取的熊果酸标准品溶液0.5mL,水浴挥干,余项操作同前,在575nm处测定其吸光度,计算其回收率,结果平均回收率为96.57%,RSD=1.39%。
2.9 供试品测定
由远志皮部及木部提得粗皂苷于575nm波长处测定吸光度,得皮部中远志总皂苷含量为3.33%,木部中为0.69%。
3 讨论
《中华人们共和国药典》规定远志以干燥根入药,而历代本草主张“用之去心取皮”,即以根皮入药,但市场中销售的绝大多数都是未去除木心的远志筒和远志肉,这与远志传统为根皮入药不相符。本实验通过分析发现,木心中所含的皂苷成分与根皮基本相同,只是含量甚微,因此,去除木心,用根皮入药还是具有一定的科学道理,建议在进行远志总皂苷提取时使用根皮作为原料药材。
【参考文献】
[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2005,4445
[2]姜勇,屠鹏飞.远志的化学成分研究[J].中草药,2002,33(10):875877