胸水中TB-Ab TB-DNA联合检测对结核性胸膜炎的诊断价
发表时间：2011-09-28 浏览次数：413次
作者：江明凤 作者单位：310002 杭州第四医院检验科
【关键词】 胸水
结核性胸膜炎是一种常见病、多发病，尤其是老年人，近年的发病率更有显著上升趋势[1]。由于该病在临床上缺乏特异性表现，用细菌学方法检测敏感性不高，胸膜活检又存在一定的创伤性和危险性，所以给初诊患者的确诊带来了一定难度[2]。现对结核性胸膜炎患者的胸水进行TB-Ab和TB-DNA检测及联合检测，并与传统的胸水涂片抗酸染色、罗氏培养检测结果比较，以探讨其在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2005年5月至2007年1月本院结核科收治的113例结核性胸膜炎患者为治疗组，因其连续发热、胸痛等症状，结合临床综合诊断得以确诊。其中男79例，女34例;年龄19～79岁;体重47～67kg。另以同期本院肿瘤科和心内科35例非结核性胸膜炎住院患者为对照组，男19例，女16例;年龄22～78岁;体重47～65kg。其中癌症患者21例，心力衰竭14例。各组在性别、年龄、体重方面差异无显著性。
1.2 试剂 金标免疫斑点渗滤试剂盒及结核分枝杆菌PCR荧光检测试剂均产自上海，罗氏培养基参照《结核病诊断细菌学检验规程》[3]，由本院自行配制。
1.3 方法 常规胸穿，取所有试验者的胸水，用5000r/min的离心泵对胸水标本离心10min，取上层清液备用;于沉淀物中加入5 ml灭菌蒸馏水再次离心10min后取沉淀物备用。选用离心后的上层清液进行TB-Ab测定，操作严格按试剂说明;选用沉淀物进行TB-DNA测定，具体为直接取50μl的TB-DNA提取液加入备用沉淀物进行混合;将此混合物煮沸10min，并以10000r/min的速度离心5min，上层清液用于扩增;该清液放入PCR扩增体系中，以6000r/min的速度再次离心，之后放于93℃环境2min，接着依次置于93℃及55℃环境中以45s、120s的时间循环30次。扩增结果由荧光检测仪自动记录，并以其循环阈值(CT)进行结果的阴阳判定。
1.4 统计学处理 数据采用SPSS 11.0软件，计数资料比较采用χ2检验。
2 结果
2.1 治疗组和对照组之间各项指标检测结果。
2.2 结核性胸膜炎患者组中TB-Ab、TB-DNA单测及其联合检测的敏感性、特异性、准确性结果比较。
3 讨论
临床上以检测结核菌作为结核诊断的金标准，但传统方法使其在胸水中的检出率相当低，如本试验结果显示：抗酸染色及罗氏培养在治疗组中的阳性率均为2.86%，而且在治疗组和对照组中的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)，这给临床对结核性胸膜炎的确诊工作带来了困难。
现以斑点免疫金渗法检测TB-Ab，由于结核分枝杆菌的特异性外膜抗原，使得TB-Ab可以作为诊断结核性胸膜炎的一个特异性检测指标。本试验结果显示：TB-Ab在结核性胸膜炎中的敏感性和特异性分别达到59.91%、93.27%，此结果与相关报道一致[4]。TB-DNA是一种结核分枝杆菌的遗传物质，本试验通过荧光探针PCR法检测，其敏感性和特异性分别达到65.21%、93.33%，显著高于抗酸染色和罗氏培养的结果。TB-Ab、TB-DNA的联合检测结果显示：其阳性检出率显著高于两者的单测结果，且敏感性和特异性分别达到了76.17%、100.00%，可以认为联合检测大幅度提高了结核性胸膜炎的诊断敏感性。
结核病的发生、发展过程与机体的免疫功能息息相关，目前认为是细胞免疫功能低下，体液免疫功能增强[5]所致。在本试验中，TB-Ab单测及TB-Ab、TB-DNA联合检测在对照组的2例癌症患者中测出结核杆菌，阳性率为5.71%，认为这可能与癌症患者免疫力低下有关，从而造成了在患者原发病的基础上出现结核的再次感染。
综上所述，临床上使用TB-Ab和TB-DNA的联合检测可以使结核性胸膜炎的诊断敏感性进一步提高，并且仍具有极高的特异性。为此，作者认为运用胸水标本开展TB-Ab和TB-DNA的联检工作，方法简便，准确性高，对临床结核性胸膜炎的诊断具有很高的应用价值。
【参考文献】
1 文景宪主编.胸腔积液.北京：中国医药科技出版杜，1990.68.
2 邓念强.血清及胸腔积液抗PPD-IgG检测对结核性胸腔积液的诊断价值.中国防痨杂志，2001，23(6)：348～350.
3 中国防痨协会.结核病诊断细菌学检验规程.中国防痨杂志，1996，18(1)：28～31.
4 Valdés L, San José E, Alvarez D, et al. Adenosine deaminase (ADA) isoenzyme analysis in pleural effusions: diagnostic role, and relevance to the origin of increased ADA in tuberculous pleurisy. Eur Respir J， 1996， 9(4):747～751.
5 潘毓宣.分子生物学的启示-兼论结核病基础研究的前景.中国防痨杂志，1993，15(3)：139～142.
