神经钙黏素和上皮钙黏素在肝细胞癌中的表达及其临床意义
发表时间：2009-07-01 浏览次数：795次
作者：杨世忠 张雷达 肖华亮 张毅 郑平 李晓武 董家鸿
【关键词】 神经
【摘要】目的 目的 探讨神经钙黏素和上皮钙黏素在肝细胞癌中的表达及其与临床病理参数的关系。方法 采用免疫组织化学方法对38 例肝细胞癌组织标本进行检测。结果 肝癌组织中上皮钙黏素表达阳性率为39.5%，神经钙黏素表达阳性率57.9%，两者具有显著负相关性（ P <0.05）。上皮钙黏素表达下调和神经钙黏素表达上调与肝癌包膜的完整性和侵袭表型显著相关（ P <0.05），而与肿瘤分化、肿瘤直径、门静脉癌栓、卫星灶等无关（ P >0.05） 。结论 上皮钙黏素表达下调和神经钙黏素表达上调均与肝细胞癌侵袭转移相关，联合检测两个指标有助于判断肝细胞癌的生物学特性。
【关键词】 肝细胞癌; 钙黏素
Expression of N-cadherin and E-cadherin in hepatocellular carcinoma and their clinical significanceYang Shizhong， Zhang Leida， Xiao Hualiang， Zhang Yi， Zheng Ping， Li Xiaowu， Dong Jiahong. Insti-tute of Hepatobiliary Surgery & Southwest Hospital， Third Military Medical University， Chongqing 400038， China【Abstract】 ObjectiveTo investigate the relationship between the expression of E-cadherin and N-cadherin and the clinical pathological parameters in hepatocellularcarcinoma （HCC）. MethodsThe ex-pression of E-cadherin and N-cadherin was detected by immumnohistochemistry technique in 38 cases of HCC. ResultsThe positive rate of E-cadherin and N-cadherin in HCC patients was 39.5% and 57.9%， repectively. Loss of E-cadherin correlated significantly with overexpression of N-cadherin. Both the E-cadherin and the N-cadherin expression were associated with capsule integrity and invasive phenotype of the carcinoma， but not with the tumor differentiation， diameter， portal vein tumor thrombus and satellite focus. ConclusionsBoth the weak expression of E-cadherin and the strong expression of N-cadherin sig-nificantly correlated with HCC invasion and metastasis. Combined detection of E-cadherin and N-cadherin may be helpful in evaluating the biological behavior of HCC.
【Key words】hepatocellular carcinoma; cadherin
钙黏素是一类介导细胞之间同质黏附的钙离子依赖性跨膜糖蛋白，对于维护上皮细胞的结构和形态具有重要作用。上皮钙黏素和神经钙黏素是钙黏素家族的两个成员。目前已有研究提示，上皮钙黏素是肿瘤抑制基因，对于肿瘤侵袭转移具有抑制作用［1］，而神经钙黏素则对肿瘤的侵袭转移具有促进 作用［2］。目前， 笔者尚未检索到关于探讨神经钙黏素 表达对肝细胞癌侵袭转移影响的报道。本研究中，基金项目: 本项目受国家自然科学基金资助（30500495）我们采用免疫组化方法检测了上皮钙黏素、神经钙黏素在肝细胞癌组织中的表达情况，并就其与肝细胞癌临床病理生物学行为之间的关系进行了分析。
1 材料与方法
1.1 材料收集我院2003-2005年肝癌手术切除标本33例，诊断均经病理学证实。按全国肝癌协作组制定的大体分型、组织学分型对肝癌进行分组，HCC参照Edmondson分级。
1.2 方法采用非生物素化辣根酶标记免疫组织化学染色法。鼠抗人上皮钙黏素单克隆抗体购自中杉金桥生物技术有限公司，鼠抗人神经钙黏素单克隆抗体购自Sigma公司，免疫组织化学染色试剂盒PV9000为中杉金桥公司产品。操作步骤按试剂盒说明书进行，显微镜下观察染色强度。以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照，已知阳性切片为阳性对照。
1.3 结果判断胞膜/胞质棕黄色染色为阳性，其中上皮钙黏素以胞膜着色为主，神经钙黏素以胞质着色为主。根据肿瘤细胞的阳性率，按照下列标准进行半定量分析:0级，<5%肿瘤细胞阳性;+级，5%～10%肿瘤细胞阳性; 级，10%～50%肿瘤细胞阳性; 级，>50%肿瘤细胞阳性;标本总阳性率的计算为 和 级数量之和除以总标本数。
1.4 统计学处理采用SPSS10.0统计软件包对阳性率进行χ2 （Fisher's exact test）检验和相关性分析， P <0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 上皮钙黏素在肝细胞癌中的表达在38例HCC组织中，上皮钙黏素表达阳性率为39.5%，见图1。在肿瘤包膜完整的组织中，其阳性率为76.9%（10/13）;在肿瘤包膜不完整时，其阳性率为20%（5/25）， 两组差异有统计学意义（ P =0.001）。但是按照Edmondson 分级 ［（Ⅰ/Ⅱ） vs （Ⅲ/Ⅳ）］ 、肿瘤直径（<5 cm vs ≥5 cm）、 卫星灶（有 vs 无）等参数进行分组比较时，组间差异无统计学意义。详细数据见表1。
表1 HCC病理学参数与上皮钙黏素和 神经钙黏素表达的关系上皮钙黏素神经钙黏素 临床病理因素nP 值P 值 0/+/0/+/ 肿瘤直径<5 cm22 1210715≥5 cm16 115 0.50697 0.188 Edmondson分级Ⅰ/Ⅱ15 11469Ⅲ/Ⅳ23 1211 0.310 1013 1.000 卫星灶有118347无27 1512 0.470 1215 0.729 包膜完整1331094不完整25 205 0.001718 0.020 门静脉癌栓有106437无28 1711 1.000 1315 0.469 图1 肝细胞癌组织上皮钙黏素表达阳性（×200）
2.2 神经钙黏素在肝细胞癌中的表达在38例HCC组织中， 神经钙黏素表达阳 性率 为57.9%， 见图2。在肿瘤包膜完整的组织中，其阳性率为30.8%（4/13）; 在肿瘤包膜不完 整时， 其阳性率为72%（18/25）， 两组差异有统计学意义（ P =0.02）。但是按照Edmondson分级 ［（Ⅰ/Ⅱ） vs （Ⅲ/Ⅳ）］、肿瘤直径（<5 cm vs ≥5 cm）、 卫星灶 （有 vs 无）等参数进行分组比较时，组间差异无统计学意义。详见表1。图2 肝细胞癌组织神经钙黏素表达阳性（×200）2.3 上皮钙黏素表达与肝细胞癌侵袭转移表型的关系当主瘤旁有卫星灶、肿瘤包膜不完整、肉眼或镜下发现门静脉癌栓者视为高侵袭性肝癌，共26例。其余12例为低侵袭性肝癌。高侵袭性肝癌中上皮钙黏素表达阳性率为23.1%（6/26），低侵袭性肝癌中阳性率为75%（9/12），两组间差异有统计学意义（ P =0.004）。 2.4 神经钙黏素表达与肝细胞癌侵袭转移表型的关系根据上述肝癌侵袭表型的分组，神经钙黏素在高侵袭组中表达阳性率为73.1%（19/26），在低侵袭组中阳性率为25%（3/12），两组间差异有统计学意义（ P =0.012）。
2.5 上皮钙黏素表达与神经钙黏素表达的相关性在23例上皮钙黏素表达阴性的肝细胞癌组织中，有17例神经钙黏素表达阳性，进行相关分析发现两者表达呈负相关（ r =-0.402， P =0.012）。3 讨论 上皮钙黏素参与介导上皮细胞同质黏附，是细胞黏附连接的主要组分。上皮钙黏素表达下调可影响细胞间的黏附，使细胞相互分离。肿瘤细胞从原发部位脱落是肿瘤转移的重要环节，与细胞黏附功能降低密切相关;目前已经有大量研究提示，在肝细胞癌等肿瘤组织中，上皮钙黏素的表达下调与 肿瘤细胞侵袭转移相关［3］。本研究结果与文献报道一致，上皮钙黏素在高侵袭性肝细胞癌中表达下调。 神经钙黏素作为一种间叶标志物，通常在上皮细胞无表达或者表达水平比较低。目前已经有研究提示，神经钙黏素可以提高肿瘤细胞的侵袭转移能力［2］。 在肝细胞癌组织的研究中，笔者目前尚未检索到关于神经钙黏素表达的研究报道。本研究发现，神 经钙黏素在肝细胞癌组织的阳性率达到57.9%，尤其在高侵袭性肝癌组织，其阳性率达到73.1%，提示神经钙黏素与肝细胞癌侵袭转移行为相关。上皮钙黏素的表达下调和神经钙黏素的表达上调均与肝细胞癌侵袭转移相关，作为钙黏素家族的两个成员，上皮钙黏素和神经钙黏素在肝癌侵袭转移中似乎扮演了相反的角色，两者间的表达变化 是否存在内在联系呢?Tomita等［4］已经发现，在前列腺癌组织中，上皮钙黏素表达下调时，神经钙黏素表达会上调，因此提出“cadherin switch”理论。本研究中，我们也发现上皮钙黏素和神经钙黏素表达存在负相关性，这高度提示在肝癌细胞中发生了“cadherin switch”。为了进一步验证本研究的结论，并探讨“cadherin switch”发生的分子机制，相关的细胞实验正在进行中。
参考文献
［1］Inayoshi J， Ichida T， Sugitani S， et al . Gross ap-pearance of hepatocellular carcinoma reflects E-cad-herin expression and risk of early recurrence after surgical treatment［J］. J Gastroenterol Hepatol，2003，18（6）:673-677.［2］ Li G， Satyamoorthy K， Herlyn M. N-cadherin-medi-ated intercellular interactions promote survival and migration of melanoma cells［J］. Cancer Res，2001，61（9）:3819-3825.［3］ Inayoshi J， Ichida T， Sugitani S， et al . Gross ap-pearance of hepatocellular carcinoma reflects E-cad-herin expression and risk of early recurrence after surgical treatment［J］. J Gastroenterol Hepatol，2003，18（6）:673-677.［4］Tomita K， van-Bokhoven A， van-Leenders G J， et al. Cadherin switching in human prostate cancer pro-gression［J］. Cancer Res，2000，60（13）:3650-3654.
作者单位: 1 400038 重庆，第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所、中国人民解放军西南肝胆外科医院; 2 400042 重庆，第三军医大学大坪医院病理科通讯作者: 董家鸿; 电话: 023-68754168; E-mail: jhdong@ hbsky. org.cn
