精浆NAG和血清FSH联合检测在梗阻性无精子症诊治中的应用

　　无精子症占男性不育的10%，是男性不育症中较为严重的一种类型。无精子症病因按照有无输精管梗阻分为梗阻性无精子症(obstructionazoospermia，OA)和非梗阻性无精子症(nonobstructionazoospermia，NOA)[1]。前者是睾丸有正常的生精功能，但输精管阻塞，精子无法正常排出;而后者通常指睾丸生精功能障碍，不能产生或只能产生极少量精子，导致精液中没有精子。无精子症的病因较为复杂，过去睾丸活检、输精管造影，甚至阴囊探查等是无精子症病因诊断的重要手段，但因创伤性限制其临床使用价值。近几年随着基础研究水平的提高和实验诊断方法的完善，在一定范围内给无精子症病因的实验诊断创造了条件，并已在相当程度上取代了上述有创检查。现就本院生殖中心男科门诊2013年1～12月间24例无精子症患者资料进行分析，对精浆中性α糖苷酶(neutral α-glucosidase，NAG)和血清促卵泡生成素(follicle-stimulatinghormone，FSH)检测在梗阻性无精子症诊断中的意义作初步探讨。

1　资料与方法

1.1　一般资料　分析本院生殖中心男科门诊2013年1～12月无精子症患者24例，年龄18～44岁，平均(32.13±6.84)岁。按照第5版世界卫生组织标准[2]，标本经过3次以上精液常规检查，3000r/min离心15min(离心半径200px)后沉淀物在显微镜未发现精子，确定为无精子症。除此以外，所有24例无精子症患者均经过睾丸活检，包括14例梗阻性无精子症组和10例非梗阻性无精子症组。同时选择16例健康已生育男性为正常对照组，年龄24～42岁，平均(32.44±5.50)岁，精液各项参数均为正常且已生育至少一个健康子女。

1.2　方法

1.2.1　体格检查　采用弗安公司生产的睾丸体积测量器，睾丸体积在2个实木丸之间者采用小的实木丸的体积计算。

1.2.2　标本收集　禁欲2～7d后手淫取精于专用的一次性取精容器内，放置在37℃恒温平板上液化，然后以3000r/min离心15min(离心半径200px)，留取上层精浆，分装后-20℃保存，避免标本反复冻融。

1.2.3　NAG和FSH水平检测　采用酶联免疫吸附试验检测精浆NAG水平，试剂为深圳华康生物医学工程有限公司产品，检测仪器为Rayto公司RT6000酶标分析仪，实验操作依照试剂盒说明书。精浆NAG正常参考值为一次射精大于或等于20mU[2]。FSH检测前3个月内未服用激素类药物，上午8：00～10：00时抽取受检者肘静脉血5mL，分离血清，采用贝克曼DXI800全自动化学发光免疫分析仪检测，试剂盒为罗氏公司产品，FSH正常参考值0.8～5.1IU/L[3]。

1.3　统计学处理　采用SPSS17.0软件进行统计学分析，计量资料以x土s表示，组间比较采用单因素方差分析;计数资料以率表示，组间比较采用χ 2检验。以p<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.1　3组受试者年龄和睾丸体积比较　3组受试者的年龄比较差异无统计学意义(p>0.05)。梗阻性无精子症组与正常对照组的睾丸体积比较差异无统计学意义(p>0.05)，而非梗阻性无精子症组患者的睾丸体积明显比梗阻性无精子症组和正常对照组小，差异有统计学意义(p<0.01)。见表1。

2.2　3组受试者NAG和FSH水平比较　梗阻性和非梗阻性无精子症组NAG水平均低于正常对照组(p<0.01)，且梗阻性无精子症组较非梗阻性无精子症组更低(p<0.01)。梗阻性和非梗阻性无精子症组FSH水平均高于正常对照组(p<0.01)，且非梗阻性无精子症组较梗阻性无精子症组血清FSH水平明显增高(p<0.01)，提示精浆FSH能够作为反映睾丸损伤程度的指标。见表2。

3　讨　　论 睾丸活检作为诊断无精子症的金标准，准确性高，但创伤大，容易出血、水肿，会留下疤痕或其他后遗症[4]。精囊输精管造影有加重梗阻或造成管腔内新的梗阻点的可能[5]，经直肠超声检查、MRI等方法因需要特殊的探头或由于价格昂贵而无法普及。因此，寻找无创、简便、准确的无精子症分型的诊断方法实属必要。精浆由睾丸液、附睾液、精囊和前列腺分泌物及尿道球腺分泌物等组成。先天性附睾发育异常，输精管阻塞、感染、损伤等都会导致精浆中某些成分的变化。因此，检测精浆中生化成分的变化，有助于了解附属性腺的分泌功能、代谢状态和病理改变，对精浆生化成分的测定可作为梗阻性和非梗阻性无精子症鉴别诊断和输精管道梗阻定位的依据。附睾是精子成熟和储存的场所，具有特殊的分泌功能，NAG来源于附睾，是附睾的标志酶。精浆NAG可预测射精管梗阻与否和评估精囊腺的功能，如附睾炎、射精管阻塞时NAG显著降低或消失[6]，精囊缺如和精囊腺以下射精管阻塞时，NAG也会降低[7]。本文中，梗阻性和非梗阻性无精子症组精浆NAG均低于正常对照组，且梗阻性无精子症组的NAG明显低于非梗阻性无精子症组，表明NAG测定对梗阻性无精子症有较好的诊断意义，符合Soudabeh等[8]的研究结果。除此之外，非梗阻性无精子症组精浆NAG水平低于正常对照组，表明非梗阻性无精子症患者可能存在附睾功能方面的障碍[9]。睾丸生精功能主要受下丘脑垂体睾丸性腺轴调控，下丘脑分泌促性腺激素释放激素(GnRH)作用于脑垂体可促进FSH分泌。FSH的作用主要是促进精母细胞发育成精子细胞和成熟精子。睾丸的生精功能发生障碍时，生精细胞因为发育阻滞而停留在精子发生的某一发育阶段，FSH值会有所改变[10]。FSH受睾丸支持细胞分泌抑制素(inhibin)的负反馈调节，当睾丸上皮细胞正常时，支持细胞分泌的inhibin抑制FSH的分泌，使FSH维持在正常水平;无精子症患者存在睾丸发育不良、生精细胞发育不良和纤维组织化等病理改变，生精小管上皮受损和支持细胞被破坏，使得inhibin分泌减少，导致FSH水平升高，从而引起非梗阻性无精子症。本研究结果显示，无精症患者血清FSH较正常对照组明显增高，且非梗阻性无精子症组较梗阻性无精子症组血清FSH水平明显增高，提示血清FSH可作为反映睾丸生精功能损伤程度的指标。睾丸是分泌雄性激素和产生精子的场所，睾丸体积是衡量睾丸发育是否正常的重要指标。测量睾丸体积可估计睾丸生精小管的发育情况，初步判断其生精功能。Madani等[11]认为FSH和睾丸体积联合检测能代替睾丸活检预测无精症患者有无精子生成。本研究结果显示，梗阻性无精子症组和正常对照组的睾丸体积和质地均正常，而非梗阻性无精子症组睾丸体积明显比其他两组小，质地较软。本文结果支持上述结论，睾丸体积与睾丸的生精功能密切相关。综上所述，通过无创手段联合检测精浆NAG和血清FSH，很大程度上减轻了患者的痛苦，具有经济、快速、安全及无创等优点，对无精子症的诊断和临床指导治疗具有重要意义。

参考文献

[1]PatrickJR.WHOmanualforthestandardizedinvestigationanddiagnosisoftheinfertilecouple[M].London：　　CambridgeUniversityPress，1993：6-34.

[2]世界卫生组织.WHO人类精液检查与处理实验室手册[M].5版.北京：人民卫生出版社，2011：1-23.

[3]王毓斌，陈斌，王鸿祥，等.经皮附睾和睾丸穿刺精子抽吸术在无精子症鉴别诊断中的应用[J].上海交通大学学报：医学版，2009，29(3)：331-333.

[4]杨建华，林俊生，陈康民.附睾抽吸法在无精子症诊断与治疗中的应用[J].中国男科学杂志，2002，16(1)：39.

[5]吴荣佩，邓春华.梗阻性无精子症经直肠B超声像表现及其临床意义[J].中华男科学杂志，2007，13(6)：520.

[6]ElzanatyS，RichthoffJ，MaimJ，etal.Theimpactofepididymalandaccessorysexglandfunctionofspermmotility[J].HumRe-prod，2002，17(11)：2904-2911.

[7]VanderSchootDK，RamosL，WoIdringhGH，etal.ObstructiveazoospermiainmenwhowishtofatherchiIdren：diagnosisandsurgicalspermretrieval[J].NedTijdschrGeneeskd，2003，147(52)：2583-2587.

[8]SoudabehS，ArdekaniAM，HodjatMetal.Comparingseminalplasmabiomarkersbetweennormospermicandazoospermicmen[J].JReprodInfertil，2010，11(1)：39-46.

[9]段玲，尔西丁·买买提，赵金萍，等.非梗阻性无精子症相关病因分析[J].中华男科学杂志，2004，10(8)：616-618.

[10]陈荣安，房秉仁，欧阳贵，等.不同病因无精子症的生殖激素水平[J].生殖与避孕，2002，22(2)：51-53.

[11]MadaniAH，FalahatkarS，HeidarzadehA，etal.SensitivityandspecificityofserumFSHandtestissizeinpredictingtheexistenceofspermatogenesisinazoospermicinfertilemen[J].Andrologia，2011，25(10)：1439-1442.(收稿日期：2013-10-26)