血管内皮生长因子的表达与移植肾功能的相关性研究

　　作者：贾晓梅,朱素英,李文平,庞书舰　　作者单位：050011 河北省石家庄市第一医院泌尿外科(李、朱素英、庞书舰、袁申如);河北省人民医院普外三科(贾晓梅);河北医科大学第三医院泌尿外科(李文平)

　　【摘要】 目的 本研究通过检测肾移植前后血浆中血管内皮生长因子(VEGF)的水平，探讨其与移植肾缺血再灌注损伤后肾功能恢复的相关性和意义，进而为指导肾移植术后的临床管理提供理论依据。方法 选取肾移植患者35例，分别于术前1天，术后1、3、7、14 d抽取空腹静脉血4 ml，以3 000 r/min离心10 min后取血浆，置-70℃低温冰箱保存待测。血浆VEGF浓度采用双抗体夹心ELISA法测定，同时另抽取静脉血4 ml，分离血清后当天在生化室检测，包括尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、血糖(GLU)等项指标。结果 肾移植前后患者血浆中的VEGF浓度呈现一个先下降再轻微回升的趋势。肾移植前后患者血浆中的VEGF浓度变化与各项肾功能指标(BUN、Cr、UA)的变化呈正相关，血浆中VEGF的浓度变化与血糖的变化无明显的相关关系。结论 VEGF作为调节免疫应答分子为移植肾功能恢复换供一个新的检测指标。

　　【关键词】 肾移植;血管内皮生长因子;肾功能;缺血再灌注

　　The correlative study of VEGF and the renal function after renal transplantation

　　LI Shen, JIA Xiaomei, ZHU Suying, et al. 

　　Department of Urinary Surgery, The First Hospital of Shijiazhuang, Shijiazhuang 050011

　　【Abstract】 Objective To detect the concentration of BUN, Cr, UA, GLU and VEGF in blood, and analyze the relationships between them.Methods 35 patients who ever underwent renal transplantation were enrolled in this study. 4 ml blood samples were taken from each patient at the day of operation and 1 day, 3 days, 7 days and 14 days after operation respectively. Plasm was isolated by centrifugating the blood sample at 3 000/minute for 10 minutes, frozen and stored at -70℃ until they were assayed. Meanwhile, serum BUN, Cr, UN GLU were determined in the same day before and after the operation by taking another 4 ml vein blood samples from each patient. Measurement data was analyzed with Software package of SPSS for windows 11.5.P<0.05 was regarded as statistic significance level.Results The plasma level of VEGF descended at first then elevated a little within 14 days after renal transplantation. There was a positive correlation between the level of VEGF and the concentration of BUN, Cr and UA in patients underwent renal transplantation; while the changes of GLU had no relationship with VEGF after renal transplantation.Conclusion Being a regulating molecule of immune response, VEGF can serve as a new detection index for functional restoration in patients performed renal transplanion.

　　【Key words】 renal transplantation; VEGF; renal function; ischemia reperfusion

　　随着器官移植技术的发展，肾移植已成为治疗慢性肾功能衰竭的最佳手段之一。器官移植过程启动了十分复杂的各种细胞因子。本文通过检测肾移植前后血浆中血管内皮生长因子(VEGF)，探讨其与移植肾缺血再灌注损伤后肾功能恢复的相关性及意义。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 选取河北医科大学第三医院及石家庄市第一医院泌尿外科2003年2月至2006年2月肾移植患者35例，男20例，女15例;年龄26～62岁，平均年龄41.4岁。术前诊断均为慢性肾小球肾炎，慢性肾衰尿毒症患者;病程1～8年，平均病程3.06年;供肾热缺血时间均<8 min，冷却血时间为3～10 h;术后免疫抑制治疗均采用新三联法，即环孢霉素(CsA)+霉酚酸酯+泼尼松，移植肾功能恢复良好，所有患者CsA浓度保持在正常范围，无急、慢性排斥反应。急性排斥和慢性排斥的诊断，依多种临床指标和肾穿病理综合判断。

　　1.2 实验方法

　　1.2.1 留取血浆标本：分别于术前1 d，术后1、3、7、14 d清晨空腹抽取肘部静脉血2份，各4 ml。一份提取血浆用，一份送生化室检测血糖(GLU)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)等肾功能指标。

　　1.2.2 标本预处理：VEGF血样处理，取肘静脉血2 ml，注入含7.5%EDTA二钠30 μl试管中，混匀、40℃、3 000 r/min离心10 min，分离血浆放于-70℃冰箱保存。

　　1.3 检测方法 血浆VEGF检测采用双抗体夹心ELISA方法测定。

　　1.4 统计学分析 应用SPSS 11.5统计学软件，计量资料以±s表示。对数据采用完全随机的单因素方差分析进行显著性检验，同一因素两两比较采用Dunnett t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　分析35例肾移植患者血浆VEGF及GLU、BUN、Cr、UA检测结果见表1，其变化趋势见图1。

　　表1 术前与术后35例患者血浆VEGF、GLU、BUN、Cr、UA检测结果(略)

　　注：与术前1 d比较，P<0.05

　　图1 检测指标变化趋势图(略)

　　对检测指标的BUN、Cr、UA、GLU与VEGF的相关性分析显示，BUN、Cr、UA的变化与VEGF的变化具有正相关性，相关系数(r)分别为0.953、0.896和0.900，均有统计学意义(P<0.01)。

　　3 讨论

　　VEGF是血管内皮细胞特异性的促有丝分裂原，有强大的促新血管生成作用[2]。组织缺血缺氧及血管损伤可以促进VEGF表达增高，产生的VEGF能够促进血管内皮细胞的增殖、迁移从而诱导血管生成[3]。

　　本研究表明肾移植前与移植后VEGF表达存在显著的差异(P<0.01)。慢性肾功能衰竭患者血中VEGF升高可能与肾小球毛细血管损伤的修复增强、保护和维持肾功能有关，肾功能损害越重血中VEGF表达越多。

　　肾脏为高灌注器官，对缺血以及缺血再灌注均敏感，缺血再灌注是肾移植中影响移植肾早期功能恢复的重要因素。在肾移植手术过程中，冷热缺血再灌注损伤是不可避免的。除直接导致术后移植肾功能损害外，这种损伤还可作为一种非免疫因素，通过影响免疫机制促进急性排斥反应的发生[4，5]。

　　本35例肾移植患者在14 d内均未见发生排斥，肾功能随着移植时间逐渐恢复正常，而术后14 d VEGF与正常值差异无统计学意义(P>0.05)。表明VEGF与BUN、Cr、UA呈正相关。VEGF术前浓度与正常值比较明显升高，与术后1、3、7、14 d浓度差异有统计学意义(P<0.05)，术后是下降趋势。

　　肾移植术后，肾功能测定能直接反映氮质血症的改善程度、移植肾功能恢复状况以及是否需要血液透析的重要指标。本研究表明肾移植前、后VEGF与除血糖外其他肾功能指标均有相关性，VEGF作为调节免疫应答小分子是否能在排斥反应早期较肾功能指标提前作出反应，将为临床因排斥反应引起的移植肾功能损害，提供一个新的检测指标。也为临床工作如何保护移植肾功能提供一理论上的依据。

　　随着移植排斥反应研究不断深入，VEGF表达的研究越来越重要，已确定VEGF可以在同种异体移植的排斥反应过程中表达。夏家红等[5]发现VEGF在大鼠移植急性排斥期有高表达。实验表明移植心排斥过程中伴有VEGF表达增高，说明VEGF在移植心排斥过程中是一个积极的促免疫炎症因素，而不仅仅是只有促血管新生的作用。还有实验发现VEGF在术后第1天就开始明显高表达，且持续增高至高峰期，结合已知的移植物中由于损伤造成的早期低氧状态所诱导表达的低氧因子[6]，提示VEGF不但在移植的免疫排斥过程中有促进作用，而且还是一种早期作用因素，早于目前大量研究的淋巴细胞因子。并在其后的淋巴细胞免疫排斥反应过程中，特别是启动和增强过程发挥重要作用，其表达水平与移植物存活时间有密切关系，对VEGF的研究为移植肾功能的监测提供一个新的检测方法。

　　【参考文献】

　　1 Shweiki P,Iein A,Soffer D,et al.Vasal Lar endothelial grouth faceor induced by hypoxia may mediate hypoxiainitiated angiogenesis.Nature,1992,359:843846.

　　2 石艳华，叶红，关丽华，等.大肠正常粘膜、腺瘤及癌组织中VEGF及其受体 Flk1表达的意义.河北医药，2007，29：107108.

　　3 Carpenter CB.Longterm failure of renal tnasplant: adding in sult to infusing.kidney int,1995,48:40.

　　4 Foegh Ml. Cnronie rejection: graft arteriosclerosis.Trarsplant Proc,1990,22:119.

　　5 夏家红，徐鹏，张向辉，等.血管内皮生长因子鼠心脏移植急性排斥其的表达，中华实验外科杂志，2005，22：453455.

　　6 Shwiki D,Itin A,Soffer D,et al.Vascular endothelial growth factor in duced by hypoxia may mediate hypoxiainitiated angiogenesis.Nature,1992,359:843848.