尿液NMP22 UBC及BTA联合检测在膀胱癌早期诊断中的意义研究
发表时间：2009-09-17 浏览次数：600次
作者：李扬 ， 林章礼， 郑衍平， 许瑞明， 张敬成， 卢小卓 作者单位：广东省汕头市中医医院， 广东 汕头 515031
【摘要】 目的：评价膀胱癌抗原核基质蛋白22、尿膀胱癌抗原、膀胱肿瘤抗原在诊断膀胱癌中的应用价值。方法：应用酶联免疫吸附试验( ELISA) 检测膀胱癌疑似尿中NMP22、UBC、BTA的浓度，并与正常组进行对比，评价NMP22、UBC、BTA在诊断时的价值。结果：膀胱癌患者的NMP22 、UBC、BTA含量与正常组比较差异均有显著性( P < 0. 01)。当NMP22 的临床判断值为10. 0 U/ ml 时，NMP22检测敏感性76.5% (26 /34)，特异性72% (18 /25)，阳性预测值为78.8％，阴性预测值为69.2%；UBC临床判断值为12μg/L时，检测敏感性67.5% (23 /34) ，特异性76% (19 /25)，阳性预测值为79.3％，阴性预测值为63.3％；BTA临床判断值为11. 2U/ L 时，检查敏感性73. 5% (25 /34)，特异性64% (16 /25)，阳性预测值为73. 5%，阴性预测值为64%。NMP22和BTA敏感性和阳性预测值显著高于UBC，NMP22和BTA敏感性和阳性预测值差异不显著。UBC和NMP22特异性显著高于BTA，NMP22阴性预测值显著高于UBC和BTA。3种肿瘤标志物联合检测敏感性97.1％(33 /34)，特异性为80% (20 /25)，阳性预测值为86.8％，阴性预测值为95.2％。联合检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值显著高于任何单一肿瘤标志物检测。对于膀胱癌不同分级和分期，NMP22、UBC含量和阳性率随着膀胱移行细胞癌分期、分级的升高而显著增加， BTA含量和阳性率在各分级和分期之间差别无显著性意义。结论：尿中NMP22 、UBC、BTA检测可用于膀胱癌的诊断，三者联合应用对膀胱癌的诊断价值优于单独检测。
【关键词】 核基质蛋白22； 尿膀胱癌抗原； 膀胱肿瘤抗原； 膀胱癌
The Detecting Significance of NMP22, UBC and BTA
in the early Diagnosis of Bladder Cancer
LI Yang， et al
(Shantou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Shantou, 515031 China)
Abstract： Objective： To evaluate the clinical value of NMP22, UBC and BTA in the early diagnosis of bladder cancer. Methods: Enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect the concentration of NMP22, UBC and BTA in the urine in suspected patients, and the concentration were compared with that in the normal people. Results:The concentration of NMP22, UBC and BTA in urine in people with bladder cancer were significantly higher than that in normal people. When the clinical value for NMP22 was 10.0 U/ ml, the sensitivity was 76.5%, the specificity was 72%, the positive prediction was 78.8％, the negative prediction was 69.2%; When the clinical value for UBC was 12μg/L, the sensitivity was 67.5%; the specificity was 76% , the positive prediction was 79.3％, the negative prediction was 63.3％; When the clinical value for BTA was 11. 2U/ L, the sensitivity was 73. 5%, the specificity was 64% , the positive pre diction was 73. 5%, the negative prediction was 64%. The sensitivity and specificity of NMP22 and BTA were significantly higher than that of BTA; the specificity of UBC and BTA were significantly higher than BTA. while the negative prediction of NMP22 was significantly higher than that of UBC and BTA.The sensitivity ,specialty, positive prediction and negative prediction in the combined detection of NMP22, UBC and BTA were significantly higher that in any single detection, they were 97.1％, 80%, 86.8％, 95.2％, respectively. The concentration of NMP22 and UBC improved with the rise of grade and stage of bladder transitional cell carcinoma, while the concentration of BTA didn’t differ according grade and stage. Conclusions: NMP22, UBC and BTA could be used to diagnose bladder cancer, and the combined detection is better than any single detection.
Key words: NMP22； UBC； BTA； Bladder Cancer
膀胱癌是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，早期诊断较为困难。长期以来，膀胱镜检和尿细胞学检查仍是膀胱癌早期诊断和随访监测的“金标准”［1］，但由于膀胱镜检的有创性和尿细胞学的低敏感性，其对膀胱肿瘤早期诊断的作用受到限制。因此，对膀胱癌肿瘤标志物，特别是多种标志物联合检测对膀胱癌早期诊断意义的研究一直受到国内外学者的高度重视［2］。本实验旨在研究尿液NMP22、UBC及BTA对膀胱癌的诊断价值，并探讨三者联合检测的意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料：研究对象为2005年11月至2007年11月住院或门诊膀胱癌疑似患者59 例，其中男43 例，女16 例，年龄41～81 岁，平均59.5岁。所有患者均伴有不同程度的血尿或尿频、尿急、尿痛等与膀胱肿瘤相关的症状。经膀胱镜检和病理活检证实膀胱移行细胞癌34 例。对照组为50例成人健康体检者，其中男35 例，女15 例，年龄46～75 岁，平均56. 5岁。
1.2 标本收集和检测：所有患者留取标本检查前一周内避免行膀胱镜、导尿等泌尿道腔内操作。留取晨尿清洁中段尿50～100 ml ，分组编号，经1500g 离心后，吸取上清液，置- 20 ℃冰箱保存待检。每例尿样分为3份，分别进行NMP22、UBC及BTA检查。膀胱镜检查肿瘤部位、大小、数目，并作肿瘤活检，根据病理进行肿瘤分级和分期。
尿NMP22 和BTA 试剂盒购自天津普生公司。按照ELISA 法进行检测，采用抗NMP22和BTA地高辛接合物和地高辛-辣根过氧化物酶显示系统。UBC检测试剂盒购自瑞典IDL生物技术公司，其中单克隆抗体对细胞角蛋白(CK)18有特异性，同时对CK8 有交叉反应。采用ELISA 法进行，按照说明书进行操作，酶标仪检测。根据本试验标本测定值作ROC(Receiver operating curve) 曲线，确定NMP22临界值为10.0 U/ ml，UBC临界值为12μg/L，BTA临界值为11.2U/L。
1.3 统计方法：统计学分析采用SPSS13. 0软件，对四格表资料采用Fisher 确切概率法，多组间差异采用Kruskal-Wallis 非参数秩和检验，两组间差异采用Mann-Whit-ney 秩和检验。
2 结 果
2.1 肿瘤标志物检查诊断膀胱癌的敏感性和特异性：59例膀胱癌疑似患者中，经膀胱镜检和病理活检证实膀胱移行细胞癌34 例。按TNM分期标准，其中Ta ～T1 23 例， T2 ～T4 11 例；按WHO分级标准，G1 8 例，G2 19例，G3 7 例。
34例膀胱癌标本中，NMP22检测阳性者26例，敏感性76.5% (26 /34), 阳性预测值为78.8％；UBC检测阳性者23例，敏感性67.5% (23 /34) ，阳性预测值为79.3％; BTA检查阳性者25例，敏感性73. 5% (25 /34)，阳性预测值为73. 5%。NMP22和BTA敏感性和阳性预测值明显高于UBC，差异有非常显著性( P < 0. 01) ，NMP22和BTA敏感性和阳性预测值差异不显著。25例组织学证实为非膀胱癌的患者中，NMP22值阳性7例，阴性18例，特异性72% (18 /25) ，阴性预测值为69.2%；UBC值阳性6例，阴性19例，特异性76% (19 /25)，阴性预测值为63.3％；BTA检查阳性者9例，阴性16例，特异性64% (16 /25)，阴性预测值为64%。UBC和NMP22特异性显著高于BTA，NMP22阴性预测值显著高于UBC和BTA。
34例膀胱癌标本中，三种肿瘤标志物联合检测阳性者33例，敏感性97.1％(33 /34)，阳性预测值为86.8％。25例非膀胱癌的患者中，阴性者20例，特异性为80% (20 /25) ，阴性预测值为95.2％。联合检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值显著高于任何单一肿瘤标志物检测。三种肿瘤标志物的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值比较见表1 。表1 三种肿瘤标志物的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值比较
2.2 NMP22、UBC、BTA在膀胱癌各分级和分期中的含量及敏感性:NMP22、UBC含量和阳性率随着膀胱移行细胞癌分期、分级的升高而显著增加， 并且明显高于正常人（NMP22：2. 6 U/ml，UBC：3.5μg/L），虽然BTA含量显著高于正常人5.6 U/L，但其含量和阳性率在各分级和分期之间差别无显著性意义。三种肿瘤志记物在不同病理分级分期中的含量及敏感性比较见表2。表2 三种肿瘤标志物在不同病理分级分期中的含量及敏感性比较
3 讨 论
膀胱癌为泌尿系最常见的肿瘤，初发时约70 %为浅表性病变，其中10 %～20 %可进展为侵犯肌层的病变，影响患者的生存率。肿瘤的复发和进展与肿瘤的级别和期别密切相关。低级别Ta 期病变的复发率为50 %～70 %，进展率为5 % ，而高级别T1期病变三年内复发率可达80 %以上, 进展率达50 %。因此，膀胱癌的早期诊断和及时正确的治疗仍是临床泌尿外科医师面临的挑战。尽管膀胱镜检和尿细胞学检查目前仍是膀胱癌早期诊断的“金标准”［3］，但由于膀胱镜检具有创伤性，尿细胞学的敏感性太低，国内外学者正在探索新的肿瘤标fnu 物用于膀胱癌的早期诊断。
NMP22为核有丝分裂复合体蛋白的重要成分，与核骨架的组成、DNA 复制、RNA 合成、激素吸附及基因表达有关。正常人尿液中NMP22 的含量极低，而膀胱肿瘤组织的坏死、脱落、炎症、再生等，可引起尿液中NMP22 碎片量增高。Soloway等的研究及临床实践证明NMP22是膀胱癌的诊断、术后复发监测有效的肿瘤标志物［4］。同年经美国食品及药物管理局( FDA) 的批准，NMP22 作为一种肿瘤标志物。尿细胞角蛋白作为膀胱癌标志物之一，越来越受到人们的关注。UBC是细胞角蛋白(CKs)家族中CK8和CK18的混合物，主要是肿瘤直接释放而来,肿瘤与尿液的接触面越大,其释放的角蛋白越多。有研究表明［5］，尿路移行细胞癌患者尿液中UBC含量显著高于泌尿系非移行细胞癌患者，可作为膀胱癌标志之一［6］。BTA实质为膀胱基底膜分解产物［7～9］，研究发现测定尿液中BTA可了解膀胱癌的发生情况。
本研究结果显示， NMP22检测敏感性76.5% (26 /34), 特异性72% (18 /25)，阳性预测值为78.8％，阴性预测值为69.2%；UBC检测敏感性67.5% (23 /34) 特异性76% (19 /25)，阳性预测值为79.3％，阴性预测值为63.3％；BTA检查敏感性73. 5% (25 /34)，特异性64% (16 /25)，阳性预测值为73. 5%，阴性预测值为64%。NMP22和BTA敏感性和阳性预测值明显高于UBC， NMP22和BTA敏感性和阳性预测值差异不显著。UBC和NMP22特异性显著高于BTA，NMP22阴性预测值显著高于UBC和BTA。三种肿瘤标记物联合检测敏感性97.1％(33 /34)，特异性为80% (20 /25)，阳性预测值为86.8％，阴性预测值为95.2％。联合检测的感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值显著高于任何单一肿瘤标志物检测。
本研究对不同分级和分期之间膀胱癌患者NMP22、UBC和BTA含量和阳性率进行了比较，结果发现NMP22、UBC含量和阳性率随着膀胱移行细胞癌分期、分级的升高而显著增加，并且明显高于正常人（NMP22：2. 6 U/ml，UBC：3.5μg/L），虽然BTA含量显著高于正常人5.6 U/L，但其含量和阳性率在各分级和分期之间差别无显著性意义。
从膀胱癌早期诊断的角度，理想的肿瘤标志物检测应具有简便、快捷、价廉、易标准化、可重复性地通过尿脱落细胞检测出，以及有高敏感性、高特异性等特点。本实验结果表明，NMP22、UBC和BTA是诊断膀胱肿瘤较好的无创性检测方法，三者联合应用比单个肿瘤标志物更可能成为诊断膀胱癌的有效工具。
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