前列腺增生症患者逼尿肌中转化 生长因子的变化及其意义

作者：韩增篪 作者单位：山东大学齐鲁医院泌尿外科， 山东 济南 250012  【摘要】  探讨前列腺增生（benign prostatic hyperplasia ，BPH)造成患者膀胱出口梗阻（bladder outlet obstruction，BOO）后膀胱逼尿肌中转化生长因子β(transforming growth factorβ，TGFβ)的表达变化。 方法：BPH患者54例,分为逼尿肌稳定组（33例）和逼尿肌过度活动（detrusor overactivity，DO）组（21例）。对照组15例为同期在我院因膀胱癌施行开放手术的男性患者，应用免疫组化观察各组逼尿肌中TGFβ的表达。 结果：BPH患者包括逼尿肌稳定组与DO组TGFβ的表达水平均明显高于对照组，在对照组、逼尿肌稳定组、DO组之间两两比较差异均有统计学意义（P<0.01）。 结论：BPH造成BOO后逼尿肌中TGFβ的表达明显增高，这种变化可能与BOO后膀胱逼尿肌纤维化及DO相关。

【关键词】  前列腺增生 转化生长因子β 逼尿肌过度活动

      AChanges of transforming growth factorβ of human detrusor after bladder

    outlet obstruction induced by benign prostatic hyperplasia

    HAN Zengchi1, XU Zhonghua1, LIU Ben2, YAN Lei1, ZHOU Zunlin1, CHEN Xiude1,

    LIU Hainan1, LIU Zhaoxu1, FAN Yidong1, ZHENG Baozhong1

    (1. Department of Urology,  Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China;

    2. Department of Urology, First Affiliated Hospital, School of Medicine, Zhejiang University,

    Hangzhou 310003, Zhejiang, China)

    ［ABSTRACT］  Objective:  To investigate the changes of human detrusor transforming growth factor β(TGFβ) after bladder outlet obstruction (BOO) induced by benign prostatic hyperplasia (BPH).  Methods： Obstructive detrusor stability was found in 33 patients and  obstructive detrusor overactivity in 21 patients; and bladder tumor in 15 men (control) who were operated on in the same period. TGFβ was measured by immunohistochemical staining. Results： The TGFβlevels of the obstructive groups were much higher than those in the control group. There were significant differences among the three groups (P<0.01).  Conclusion：  The TGFβ level is significantly higher after BOO, which might be correlated with denervation supersensitivity and detrusor overactivity.

    ［KEY WORDS］  Prostatic hyperplasia; Transforming growth factor bata； Detrusor overactivity    膀胱出口梗阻（bladder outlet obstruction，BOO）是良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH)的主要病理生理改变之一。BPH引起BOO以后，随着梗阻的加重膀胱也发生相应的改变，出现膀胱逼尿肌结构、功能及神经支配的变化，导致逼尿肌过度活动（detrusor overactivity，DO）、逼尿肌收缩功能受损（impaired detrusor contractility, IDC）和膀胱顺应性的改变等病理变化。研究表明神经生长因子(nerve growth factor, NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)等在这一过程中起作用［12］，但对其他生长因子如TGFβ在BPH引起BOO后膀胱逼尿肌中表达的变化及其与继发逼尿肌病理变化的关系报道较少。本研究即旨在探讨这一问题。

    1  资料与方法

    1.1  标本来源  69例标本均取自山东大学齐鲁医院泌尿外科2001年12月 2004年4月的住院手术患者，BPH患者54例，年龄54 80岁，平均年龄65.96岁，经尿流动力学检查证实存在BOO；其中逼尿肌稳定组33例，DO组21例。对照组15例均为男性，因膀胱癌而施行开放手术，年龄51 82岁，平均64.73岁，经尿流动力学检查证实无BOO及DO，术前未行放、化疗。

    1.2  方法  所有标本均为术中自膀胱切口一侧相同部位（膀胱顶部）切取约1.5?cm×1?cm膀胱壁全层(对照组病例肿瘤边缘距取材处均>5?cm),剔除膀胱外组织和粘膜后，于福尔马林液中固定，石蜡包埋，连续切片，应用SABC免疫组化技术检测3组标本中TGFβ蛋白的表达。

    1.3  结果判定  由2名病理科医师进行评估,每张切片至少观察5个视野并计数100个细胞。评价标准：膀胱平滑肌细胞胞浆内含有棕黄色或棕褐色颗粒为阳性。阳性细胞数<10％为阴性表达（-），≥10％ ＜25％为弱阳性（＋），≥25％ ＜50％为中度阳性表达（＋

2  结  果

    2.1  各组膀胱平滑肌细胞在光镜下的形态表现  光镜下，TGFβ蛋白在对照组、BPH梗阻逼尿肌稳定组和梗阻逼尿肌不稳定组膀胱组织切片中均表现为膀胱平滑肌细胞胞浆内的棕褐色颗粒，与平滑肌细胞的走向一致，含有此类颗粒者即为阳性细胞,见图1。

    2.2  TGFβ在各组膀胱逼尿肌细胞中的表达水平  TGFβ平均表达水平在对照组、逼尿肌稳定组、逼尿肌不稳定组中依次升高（见图2）。对照组与梗阻稳定组(P＜0.05)、对照组与梗阻不稳定组(P＜0.05)、梗阻稳定组与梗阻不稳定组(P＜0.05)两两之间差异均有统计学意义。根据评价标准，各组膀胱平滑肌细胞中TGFβ的表达水平见表1。表1  各组膀胱逼尿肌细胞中TGFβ的表达水平

    3  讨  论

    BPH是一种老年男性常见的疾病,其可引起一系列临床症状(包括尿频、进行性排尿困难、尿潴留以至影响肾功能)。BPH致膀胱出口梗阻后，随着梗阻的存在及逐渐加重，膀胱也逐渐发生相应的改变，其中膀胱壁纤维化及DO是其重要的病理生理改变。BOO早期膀胱排尿压上升,尿流率变小,排空速度减慢,平滑肌细胞肥大,结缔组织增生,晚期则发生排尿功能减退,此时即使解除梗阻,膀胱功能也难以恢复正常。邓春华［3］等研究表明BPH的逼尿肌超微结构主要特点为：①平滑肌细胞肥大、扭曲变形,排列不齐;②平滑肌细胞之间的间隙明显增宽,内有大量胶原纤维,细胞间中间连接明显减少。

 本研究中BOO患者组（包括逼尿肌稳定组和DO组）较同龄对照组TGFβ表达水平明显升高,与动物模型实验的结果相符［4］，其中的原因可能是BPH患者膀胱内压力升高,可导致膀胱壁缺血,而膀胱缺血可引起TGFβ表达增加［5］,有研究表明TGFβ是启动和终止组织修复的细胞因子,它主要作用于胶原的转录和翻译过程,诱导前胶原mRNA产生,从而促进胶原蛋白的形成和沉积［6］，在多种器官纤维化病变中起重要作用。Howard等［7］应用TGFβ处理体外的膀胱逼尿肌细胞结果发现处理后的平滑肌细胞肥大并且间质纤维明显增生。因而BPH患者出现BOO后TGFβ表达增加进一步促进逼尿肌纤维化，使膀胱顺应性降低。同时我们的实验结果揭示DO组较逼尿肌稳定组表达水平亦有明显升高，说明TGFβ可能与DO的发生有关。目前对BOO患者的膀胱DO病因尚无定论，TGFβ在其中的作用及其机制尚需进一步研究。

    本研究初步探讨了BPH所致BOO病人膀胱逼尿肌的病理生理变化机制及TGFβ在其中的作用，在今后的研究中我们还需要了解其他相关因素的在此病程中的变化及其机制。目前，对肝、肺纤维化的治疗已取得一定进展：应用TGFβ单克隆抗体可减轻肺的纤维化程度［8］、抑制肝星状细胞L钙通道的表达从而防治肝纤维化［9］；从而为抗器官纤维化病变的治疗提供了理论基础和实验依据。同样，临床上应用TGFβ单克隆抗体及反义寡核苷酸也有可能用于膀胱逼尿肌纤维化及DI的治疗,这有待于今后作深入研究。

【参考文献】  ［1］ 〖ZK(#]Samu Yamaguchi. Response of bladder smooth muscle cells to obstruction: Signal transduction and the role of mechanosenors［J］. Urology, 2004, 63(Suppl 3A):1116.

［2］ 刘 ?，郑宝钟，周尊林，等.前列腺增生所致膀胱出口梗阻病人逼尿肌中NGFmRNA的变化及意义［J］.中华外科杂志，2004, 42(14):874876.

［3］ 邓春华，梅 骅，郑克立.前列腺增生症的逼尿肌超微结构变化［J］.中华泌尿外科杂志，1997,18（１２）：744746.

［4］ Joon Chul Kim J, Hyun PY, Hwang TA. Changes in detrusor and urinary growth factors according to detrusor function after partial outlet obstruction in the rat［J］. Urology, 2001, 57(2):371375.

［5］ Azadzoi KM, Tarcan T, Siroky MB, et al. Atherosclerosis induced chronic ischemia causes bladder fibrosis and noncompliance in the rabbit［J］. J Urol, 1999, 161(5):1?6261?635.

［6］ 刘维田,王吉耀,朱无难,等.转化生长因子β1对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍRNA表达的影响［J］.中华肝脏病杂志,1996,4（２）:97100.

［7］ Howard PS, Kucich U, Coplen DE, et al. Transforming growth factorbeta1induced hypertrophy and matrix expression in human bladder smooth muscle cells［J］. Urology, 2005, 66(6):1?3491?353.

［8］ 李京红，何 冰，翁保迎.转化生长因子β单克隆抗体对大鼠肺纤维化的治疗观察［J］.中华结核和呼吸杂志，1997,20(3):347349.

［9］ 高庆华,刘殿武,刘雅馨.TGFβ抗体和PDGF抗体对肝星状细胞L型钙通道的影响［J］. 中国老年学杂志,2005,25(9):1?0771?079.