血清hsCRP TNFα及IL6在脑梗死老年患者的表达

　　作者：莫 文， 焦桂萍**， 袁志柳， 王先勇 作者单位：(贵州省人民医院 干部医疗保健科， 贵州 贵阳 550002)

　　【摘要】 目的： 分析高敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL6)在老年脑梗死患者血清的表达及意义，探讨它们在老年脑梗发病过程中的作用及意义。方法： 对25例脑梗死患者和30例对照者用胶乳增强免疫比浊法检测血清hsCRP ，用双抗体夹心ELISA 法测定血清TNFα、IL6。结果： 实验组hsCRP、TNFa、Ⅱ6的血清浓度值明显高于对照组，两者之间比较有显著性差异(P<0.01)。结论： hsCRP、TNFα、IL 6在老年脑梗死患者血清中明显增高，提示三者可能参与了老年患者脑梗死的发生发展过程。

　　【关键词】 脑梗塞; 老年人; C反应蛋白; 肿瘤坏死因子; 白细胞介素6

　　脑梗死已成为危害老年人健康的常见疾病，其发病率呈逐渐上升的趋势。随着脑梗死机制研究的不断深入，脑缺血早期的炎症反应及其损伤作用日益受到关注，作为机体非特异性炎性反应的敏感标志物血清高敏C反应蛋白(hsCRP)、 肿瘤坏死因子(TNFα)、 白细胞介素(IL6)成为研究的热点。对25例脑梗死老年患者血清hsCRP、TNFα、IL6进行了检测，以探讨其在脑梗死发病中的作用及临床意义。

　　1 资料与方法

　　1.1 对象及分组

　　根据实验设计，分对照组和实验组。对照组为贵州省人民医院门诊体检健康人群，无肺、心、脑、肝、肾等疾病，无吸烟史，共30例。男28例，女2例。年龄65～84岁，平均(74.5±6.3)岁;实验组为2007年收住贵州省人民医院干部医疗保健科患脑梗死(急性期)的老年患者。所有病例均依据第4届全国脑血管会议(1995年)制定的标准诊断，且经CT或MRI证实,共25例，男24例，女1例;年龄65～87岁，平均(75.8±5.4)岁。两组患者的性别、年龄相比无显著性差异。

　　1.2 标本采集与保存

　　实验组及对照组均于清晨空腹抽取正中静脉血，用EDTA抗凝后，离心分取血清，置-20 ℃冰箱保存待检。

　　1.3 实验仪器及试剂

　　全自动酶标仪，美国BiTek公司生产，型号为WLX80;KC4定量软件，天津秀鹏生物开发有限公司;hsCRP测定试剂盒购于北京九强公司;人TNPα ELISA 和人IL6 ELISA试剂盒购于晶美生物工程有限公司。

　　1.4 实验方法

　　用胶乳增强免疫比浊法测定标本hsCRP的OD值，用双抗体夹心ELISA 法测定标本TNFα和IL6的OD值。分别建立标准吸收曲线，并通过KC4定量软件分别计算出hsCRP、TNFa及IL6的曲线方程，以OD值代人各自的曲线方程测定样品中hsCRP、TNFα及IL6的浓度。

　　1.5 统计学处理

　　两组实验数据用均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS10.0统计学软件包先进行正态性检验，然后用两组独立样本的t检验进行统计学分析，P<0.05示差异具有统计学意义。

　　2 结果

　　实验组 hsCRP、TNFα及IL6浓度明显高于对照组，且差异具有统计学意义(P<0.01)。见表1。表1 血清hsCRP、TNFα及IL6的浓度(ng/L,x±s)

　　3 讨论

　　脑梗死系指脑血管由于各种原因引起相应血管的闭塞，并由此产生血管供应区脑功能损害和神经症状的一群临床综合征。动脉粥样硬化则是最常见的病因[1]。实验室和临床证据已证实动脉粥样硬化不是一种简单的脂质沉积病，而动脉粥样硬化的实质则是血管壁细胞遭受各种有害物质刺激的慢性炎症过程，在这一过程中脑血管内皮细胞合成和释放的炎性细胞因子如TNFα、IL6等是增强的[2]。TNFα、IL6等大量炎性细胞因子，导致肝细胞产生hsCRP等，所以hsCRP常反映炎症在动脉粥样硬化中的作用[3]。

　　hsCRP是主要在肝脏内合成的一种微量蛋白，是反映体内炎症活动的精确、客观指标，正常情况下以微量形式存在健康人血清中。本次研究结果发现脑梗死的老年患者血清中hsCRP水平明显高于健康对照组(P<0.01)。这是因为在脑梗死的形成病因中，最重要的是动脉粥样硬化导致的管腔狭窄和血栓形成，hsCRP与动脉粥样硬化发生的重要环节相关[4]。Pasceri[5] 等经研究发现hsCRP对人血管内皮细胞有直接的致炎症效应。hsCRP通过经典途径激活补体系统，产生大量终末攻击产物造成血管内膜受损，继而激活血小板，引起血小板聚集、粘附，形成不稳定粥样硬化斑块，其次，hsCRP可诱导人内皮细胞粘附分子的表达，参与动脉样硬化形成过程中平滑肌的迁移和增殖，加速动脉粥样硬化发展。hsCRP作为一种具有高度敏感性的炎性标记物直接参与了动脉硬化的形成过程[6]。因此，hsCRP与脑梗死发生、发展有关。

　　TNFα是一种具有多种生物活性的细胞因子，主要来源于单核细胞和巨噬细胞，它是炎症反应的起使因子之一，TNFα在体内的大量产生和释放会破坏机体的免疫平衡，和其它炎症因子一起产生多种病理损伤。本研究结果显示老年脑梗死组血清TNFα水平明显高于健康对照组(P<0.001)，提示TNFα是脑梗死的一个重要标志。在脑梗死病人中，TNFα水平突然急剧升高，触发了有害的神经毒性连锁反应。TNFα能通过促进凝血，增加内皮细胞通透性，诱导黏附分子的产生，加重组织损害，还可释放氧化酶、蛋白酶等，引起继发性脑损伤[7]。Lavine等[8]预先静脉内给予TNFα中和抗体，可明显减轻皮层和皮层下的损伤，提高再灌注时的脑血流，同时改善神经功能。因此，TNFα也参与脑梗死发生、发展。

　　IL6是由212个氨基酸组成、分子量为26 kD的糖蛋白，是一种具有广泛免疫调节作用的细胞因子，主要由T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞、内皮细胞及脑组织中的小胶质细胞产生，是一种重要的促炎性细胞因子。本文显示老年脑梗死组的血清IL6水平明显高于对照组(P<0.001)，这是因为脑梗死后，由于脑组织缺血坏死，不仅产生大量抗原刺激了免疫系统，且有大量炎症细胞浸润和激活，引起强烈的免疫应答过程，致使T淋巴细胞、B淋巴细胞和单核巨噬细胞等被激活，从而产生大量IL6[9]。IL6可直接损伤血管内膜，影响血管通透性，增强血管内皮与血细胞的黏附性，使自由基产生增多，抑制血栓调节因子蛋白C、蛋白S系统，促进凝血，引起炎性介质增多、髓鞘损伤和少突胶质细胞溶解，从而导致细胞死亡[10]。脑缺血再灌注损伤的机制之一即过度的炎症反应，而IL6是主要的促炎因子，促进凝血，破坏血脑屏障，增加兴奋性氨基酸及自由基释放等[11]。因此，IL6也参与脑梗死发生发展。

　　本研究结果表明, hsCRP、TNFa及IL 6共同参与了老年脑梗死的发生发展过程，三者相互激活，协同作用，共同介导脑梗死的炎症反应过程，但具体机制有待进一步研究。三者联合检测对于阐述脑梗死的发病机制提供了新的思路，也为脑梗死的治疗提供了新的途径。

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