慢性前列腺炎病人前列腺液中IL1β、IL8、TNF

侯四川    青岛大学医学院附属医院,山东 青岛 266003

 【摘要】  目的 探讨慢性前列腺炎病人前列腺液中细胞因子IL1β、IL8、TNFα和PGE2的变化与慢性前列腺炎类型、发病机制、症状和前列腺液白细胞计数的关系。方法 以MearesStamey法对100例前列腺炎病人行尿液、前列腺按摩液细菌培养，结合前列腺液常规检查和NIHCPSI评分,将其分为慢性细菌组(Ⅱ型，11例)、慢性非细菌组(Ⅲa型，66例)、前列腺痛组(Ⅲb型，23例)。应用放射免疫法测定各组病人前列腺液中IL1β、IL8、TNFα和PGE2含量,并与20例正常人进行对照。结果 Ⅱ型前列腺炎病人前列腺液中IL1β、IL8、TNFα、PGE2水平明显高于Ⅲa型、Ⅲb型及对照组，Ⅲa型明显高于Ⅲb型及对照组,差异有显著性(F=27.001～59.541，q=3.70～4.50，P<0.01)；Ⅲb型与对照组相比无明显差异(P>0.05)。前列腺炎病人前列腺液IL1β水平与TNFα、PGE2水平呈正相关(r=0.563、0.826，P<0.01)，白细胞计数与IL8水平呈正相关(r=0.547，P<0.01)，IL1β、PGE2水平与NIHCPSI疼痛不适症状评分呈正相关(r=0.506,P<0.01)。结论 慢性前列腺炎病人前列腺液IL1β、IL8、TNFα、PGE2表达增高可作为慢性前列腺炎的诊断依据之一，对慢性前列腺炎分型可能有一定临床意义。 【关键词】  前列腺炎 白细胞介素1β 白细胞介素8 肿瘤坏死因子α 前列腺素E2 放射免疫测定    CLINICAL SIGNIFICANCE OF IL1β,IL8,TNFα AND PGE2 IN PROSTATIC SECRETION IN PATIENTS　ＷITH　CHRONIC PROSTATITISHOU SICHUAN,  FENG YUANFA, WANG CHUNLING(Department of Urology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China) ［ABSTRACT］ObjectiveTo study the levels of interleukin1β (IL1β), interleukin8 (IL8), tumor necrosis factorα (TNFα), and prostaglandin E2 (PGE2) in expressed prostatic secretion (EPS) of patients with chronic prostatitis (CP) and their relation with the type, pathogenesis and diagnosis of CP.MethodsIL1β,IL8,TNFα and PGE2 levels were measured in EPS of 100 CP patients and 20 normal controls by radioimmunoassay. Urine and EPS were cultured according to MearesStamey methods. NIHChronic prostatitis symptom index (NIHCPSI) score was done in all patients. The patients were divided into three types, i.e. type Ⅱ(n=11), type Ⅲa (n=66), and typeⅢb (n=23), according to the urine and EPS culture as well as NIHCPSI score.ResultsThe levels of IL1β, IL8,TNFα, and PGE2 in typeⅡgroup were higher than that in typeⅢa, typeⅢb and control groups (q=3.70,4.20,4.50;P<0.01), those of typeⅢa group were higher than in typeⅢb group and control group (q=2.80,P<0.05). No statistically significant difference between typeⅢb group and control group was noted (P>0.05). A positive correlation existed between the levels of IL1β and TNFα or PGE2 (r=0.563,0.826;P<0.05). WBC count in EPS showed a positive correlation with IL8 level (r=0.547,P<0.01). The levels of IL1β and PGE2 were highly related to the NIHCPSI score of pain  and/or discomfort (r=0.506,P<0.01), but no correlation found between NIHCPSI and the levels of IL1β,IL8,TNFα, and PGE2.ConclusionThe rising of IL1β, IL8, TNFα and PGE2 levels in EPS maybe be used as one of the bases for diagnosis and typing of CP.

［KEY WORDS］prostatitis; interleukin1β; interleukin8; tumor necrosis factorα;  prostaglandin E2; radioimmunoassay

    细胞因子是由机体内的免疫细胞和某些非免疫细胞受刺激后合成和分泌的一类小分子的多肽类因子，在介导及调节免疫应答和炎症反应、参与组织修复过程中起重要作用，许多炎性病理过程中均可检测到细胞因子的改变。为了解慢性前列腺炎（CP）病人前列腺局部的免疫反应状况，本文对100例CP病人前列腺按摩液(EPS)中4种细胞因子IL1β、IL8、TNFα和PGE2的含量进行检测，并与CP的类型、白细胞计数、美国国家健康研究院慢性前列腺炎症状评分（NIHCPSI）进行相关分析。现将结果报告如下。

    1  资料与方法

    1.1  一般资料

    收集2006年5～9月青岛大学医学院附属医院泌尿外科门诊就诊，具有完整相关病史、诊疗记录的CP病人100例作为研究对象，年龄20～56岁，平均36.4岁。其中未婚31例，已婚69例。病程3～36月，平均6月。应用MearesStamey四杯法收集初段尿(VB1)、中段尿(VB2)、EPS、前列腺按摩后尿(VB3)行尿液、EPS细菌培养，并对前列腺液进行镜检。用NIH法对病人进行分型。选择同期查体健康男性20人作为对照组，年龄22～34岁，平均26.6岁，排除其他慢性炎症，无任何不适症状，前列腺液常规、尿常规、精液常规检查正常，两杯法尿细菌培养阴性。

    1.2  方法

    1.2.1  标本收集  标本采集前禁欲至少5 d，清洗消毒阴茎头和尿道外口，收集VB110 mL，排尿200 mL 后收集VB2 10 mL，胸膝位行前列腺按摩，将开始多数前列腺液滴于无菌载玻片上，最后1滴滴于无菌拭子上,然后收集VB3 10 mL。载玻片上前列腺液无菌条件下移入Eppendrof管中,10 min内贮存于-70 ℃冰箱待检。剩余前列腺液涂片，于高倍镜(400倍)下观察5个视野,计数白细胞数，计算平均白细胞数。

    1.2.2  检测指标及方法  放射免疫法检测EPS中IL1β、IL8、TNFα、PGE2含量。IL1β、IL8、TNFα放射免疫分析试剂盒购自北京北方生物技术研究所。3H前列腺素E2放射免疫试剂盒购自解放军总医院科技开发中心放免所。

    1.2.3  统计学方法  结果采用SPSS 11.0统计软件进行处理，数据间比较应用单因素方差分析。相关性采用Pearson相关分析。

    2  结    果

    2.1  细菌培养

    100例CP病人中11例细菌培养阳性，其中3例为大肠埃希菌，3例为表皮葡萄球菌，3例为凝固酶阴性葡萄球菌，1例为大肠埃希菌和粪肠球菌混合感染，1例为变形杆菌。

    2.2  CP病人的分型

    根据细菌培养结果，按NIH分类法，11例细菌培养阳性者为Ⅱ型前列腺炎；89例培养阴性者为Ⅲ型慢性前列腺炎，其中白细胞计数＞10/HP者66例为Ⅲa型，＜10/HP者23例为Ⅲb型。

    2.3  NIHCPSI症状评分

    CP各型之间NIHCPSI评分、疼痛不适症状评分比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。表1  CP病人各类型NIHCPSI症状评分比较类型  NIHCPSI疼痛不适症状评分Ⅱ型19.2(12～27)9.1(7～13)Ⅲa 型18.9(10～28)9.0(6～14)Ⅲb 型18.2(9～30)8.6(4～15)

    2.4  前列腺液中4种细胞因子的含量

    Ⅱ型CP病人前列腺液IL1β、IL8、TNFα、PGE2水平明显高于Ⅲa型、Ⅲb型及对照组，Ⅲa型明显高于Ⅲb型及对照组,差异均有显著性(F=27.001～59.541，q=3.70～4.50，P<0.01)；Ⅲb型与对照组相比无明显差异(P>0.05)。 见表2。

  表2  各组4种细胞因子含量(ρ/ng·L-1,±s)组别nIL1βIL8TNFαPGE2Ⅱ组110.296±0.18911.183±4.99640.725±18.247364.607±263.381Ⅲa型组660.187±0.1736.480±2.04628.600±12.835256.430±116.470Ⅲb型组230.135±0.1313.943±2.40222.881±10.897188.882±131.529对照组200.123±0.1343.838±1.90922.223±8.807179.707±106.834

    2.5  各种细胞因子的相关性

    CP病人IL1β与TNFα、PGE2水平呈正相关(r=0.563、0.826,P<0.01)，与IL8无相关性(r=0.207,P>0.05)；白细胞计数与IL8水平呈正相关(r=0.547，P<0.01)，与IL1β、TNFα、PGE2水平无相关性(P>0.05)；IL1β、PGE2水平与NIHCPSI疼痛不适症状评分呈正相关(r=0.506,P<0.01)，IL8、TNFα与NIHCPSI疼痛不适症状评分无相关性(P>0.05)；IL1β、IL8、TNFα、PGE2水平与NIHCPSI评分、排尿症状评分、生活质量评分均无相关性(P>0.05)。

    3  讨    论

    CP是泌尿男科最常见的疾病，其病因及发病机制还不是很清楚，大多数学者趋向于认为慢性非细菌性前列腺炎是多因素作用的结果。目前关于CP发病机制方面的研究,已从原来研究炎症反应中的细胞功能过渡到研究炎症反应应答的调节机制,其中最重要的是细胞因子[1]。

    IL1β主要由单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞等产生，具有广泛的免疫调节作用，并有致热和介导炎症的作用。可以促进胸腺细胞、T细胞的活化、增殖和分化，还可以直接刺激单核细胞和巨噬细胞产生IL6和TNF，并通过单核细胞和巨噬细胞产生IL8介导对中性粒细胞的趋化作用[2]。IL8是一种趋化因子，它可以趋化和激活中性粒细胞，使其外形改变，促进脱颗粒，激活中性粒细胞并使其释放超氧化物(O-2、H2O2)和溶酶体酶。在单核细胞存在时可趋化部分静止的CD+4或CD+8T细胞，在局部可使T细胞明显增多。TNFα是一种单核因子，可提高中性粒细胞的吞噬能力，增强抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)，可使内皮细胞及MHCⅠ类抗原（主要组织相容性抗原Ⅰ）、ICAM1(细胞间黏附分子1)的表达，IL1、GMCSF(粒巨噬细胞集落刺激因子)和IL8的分泌增加，并促进中性粒细胞黏附到内皮细胞上，从而刺激机体局部炎症反应[3]。PGE2是产花生四烯酸环氧化酶途径的代谢产物之一，主要是由巨噬细胞合成和释放, 它是一种免疫调节剂，具有很强的免疫抑制活性,可作用于免疫系统的很多方面, 通过对Ｔ细胞以及一些炎性递质、趋化因子的抑制作用,对机体产生作用，如使炎症时血管扩张、水肿加剧，还可以引起发热和疼痛。ALEXANDER等[4]通过检测辅助Ｔ细胞活性和血清前炎性细胞因子水平,认为自身免疫性因素是慢性非细菌性前列腺炎的病因之一。孙文东等[5]研究显示，IFNγ和IL10在Ⅱ型和Ⅲa型CP病人EPS中明显升高，认为二者在CP病程中起重要的作用。NADLER等[6]用ELISA法检测了72例不同类型CP（CPPS）病人精浆中的IL1β与TNFα,结果显示，CPPS病人Ⅲa组精浆中的IL1β与TNFα水平明显高于Ⅲb组和正常对照组,认为检测精液中的细胞因子有助于慢性非细菌性前列腺炎慢性骨盆疼痛综合征的诊断与分型。这些均说明细胞因子参与了CP炎症变化的全过程。

    本文研究结果显示，Ⅲb型CP病人4种细胞因子水平与正常对照组比较差异无统计学意义。其原因可能是CP的 Ⅲb型病人与其他类型相比较，诊断上有较大的主观性和不确定性，一些非前列腺部位引起的症状，如慢性精囊炎、盆底肌肉痉挛性疼痛、不易检查到的附睾睾丸炎、甚至一些精神心理因素等都可能产生一些与前列腺炎相似的症状而被诊断为Ⅲb型CP。Ⅱ型和Ⅲa型CP的4种细胞因子明显高于对照组和Ⅲb型，提示可能与前列腺炎的类型有关，是极有价值的指标。IL1β、PGE2水平与NIHCPSI疼痛不适症状评分呈正相关，IL1β与TNFα、PGE2水平呈正相关，说明3种细胞因子共同存在于同一个炎症免疫调节网络，IL1β可以使T、B细胞及NK细胞等广泛激活, COX2表达急剧增加，PGE2大量合成，促使中性粒细胞脱颗粒释放溶酶体,从而加剧局部炎症细胞浸润,促进炎症发生。IL1β也可以通过促进TNFα的分泌，促进炎症反应。IL1β、PGE2与疼痛不适症状评分相关系数不高，这可能与个人对疼痛的敏感程度、精神心理因素等有一定的关系。

 本研究结果表明WBC>10/HP标本IL8水平较WBC<10/HP标本明显升高，并且与白细胞计数呈正相关，这与HOCHREITER等[1]的研究结果一致。原因可能为IL8是炎症趋化因子，能够趋化中性粒细胞和单核细胞离开血液循环进入炎症区域[8]。JOHN等[7]报道，非炎性慢性盆腔疼痛综合征病人疾病初期血清和精液IL8水平升高, IL8可能在前列腺炎早期发挥作用。因此，前列腺液中IL8水平可配合白细胞计数作为早期前列腺炎的诊断指标。

    CP病因复杂,临床上尚无理想的特异诊断指标,与临床症状相比,细胞因子的变化可能更早、更准确体现前列腺的炎症状况。IL1β、IL8、TNFα、PGE2水平变化在前列腺炎的发病过程中起重要作用，可作为前列腺炎的诊断、分型的参考依据。

【参考文献】[1]HOCHREITER W W, NADLER R B, KOCH A E, et al.Evaluation of the cytokines interleukin 8 and epithelial neutrophil activating peptide 78 as indicators of inflammation in prostatic secretions[J]. Urology, 2001,56(6):10251029.

[2]WANG L, GAO X Y, ZHANG M Z, et al. The gene expressions of nerve cell proliferation associated factors following cerebral ischemia reperfusion in rats[J]. 青岛大学医学院学报, 2006,42(1):2731.

[3]王海波,周岩冰,张建立,等. Th1 Th2细胞因子含量变化在胃癌病人免疫偏移中的意义[J]. 青岛大学医学院学报, 2003,39(3):225227.

[4]ALEXANDER R B, PONNIAH S, HASDAY J, et al. Elevated levels of proinflammatory cytokines in the semen of patients with chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome[J]. Urology, 2001,52:744749.

[5]孙文东,赵升田,张怀强,等. 慢性前列腺炎病人前列腺液IFNγ和IL10的表达变化及意义[J]. 中国男科学杂志, 2006,20(6):1921.

[6]NADLER R B, KOCK A E, CALHOUN E A, et al. IL1β and TNFα in seminal plasma are indications in the evaluation of men with chronic prostatitis[J]. Urololgy, 2003,164(1):214218.

[7]JOHN H, BARGHORN A, FUNKE G, et al. Noninflammatory chronic pelvic pain syndrome: immunological study in blood, ejaculate and prostate tissue[J]. Euro Urol, 2003,39:7278.