依达拉奉对缺血性脑卒中患者的治疗作用及对血清MMP2和9的影响

　　作者：王苏平 王梓晗1 彭道勇 作者单位：(大连市中心医院神经内一科，辽宁 大连 116003)

　　【摘要】 目的 探讨依达拉奉对缺血性脑卒中患者的治疗作用及对患者血清中基质金属蛋白酶(MMP)2和9的影响。方法 住院诊治的180例缺血性脑卒中患者随机分为依达拉奉组90例，在常规治疗基础上加用依达拉奉治疗，对照组90例应用常规治疗;两组应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测治疗前、后患者血清中MMP2和9的表达。结果 依达拉奉组治疗总有效率明显增高，治疗后MMP2和9的下降值更明显(均P<0.05)。结论 依达拉奉治疗缺血性脑卒中的效果明显，并能调节血清中MMP2和9的表达。

　　【关键词】 急性缺血性脑卒中;依达拉奉;基质金属蛋白酶2;基质金属蛋白酶9

　　缺血性脑卒中临床常见，且致残率及病死率极高，主要治疗方法是溶栓、抗血小板聚集、抗凝、改善微循环和神经保护等综合治疗。但是临床研究表明，自由基在脑损伤的发生发展中具有重要作用，依达拉奉能很好地清除自由基〔1〕。基质金属蛋白酶家族(MMPs)在其发病中的作用逐渐引起关注〔2〕。本文对缺血性脑卒中患者应用依达拉奉进行临床对照研究，并检测治疗前、后血清中MMP2和9的表达情况，探讨其临床意义，旨在为临床合理诊治提供依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 临床资料 2008年1月至2010年6月在我院确诊为缺血性脑卒中的患者180例，均符合全国第四届脑血管病会议的诊断标准〔3〕。排除合并内脏重要器官疾病和恶性肿瘤的患者，排除近3个月应用免疫抑制剂者。其中男100例，女80例，年龄43～79(平均56.2)岁。依随机数字表法将患者分为依达拉奉组与对照组各90例，两组在性别、年龄、病史等相关因素方面无显著差别，具有可比性。

　　1.2 治疗方法 所有患者应用常规治疗，即脱水降颅压、减轻脑水肿、抗血小板制剂、脑细胞保护剂(自由基清除剂除外)及对症支持治疗。依达拉奉组在常规治疗基础上，加入依达拉奉注射液治疗，时间为2 w。

　　1.3 MMP2和9的检测 患者均于确诊后次日清晨、治疗15 d时的清晨抽取空腹静脉血，立即置于-70℃冰箱中待检。MMP2和9的检测应用酶联免疫吸附实验。具体步骤：①取出冻存标本，在室温下融化，按说明书设标准曲线的抗体标准浓度。②加入已按说明书要求倍数稀释的抗体标准液和标本100 μl至相应孔内，用封板胶纸封住反应孔，室温孵育120 min。③按洗涤方法洗板。④除空白孔外，每孔加按说明书要求稀释的生物素标注的二抗100 μl，封住板孔，室温孵育90 min。⑤按洗涤方法洗板。⑥除空白孔外，每孔加已按要求稀释的酶联物100 μl封住板孔，室温30 min。⑦按洗涤方法洗板。⑧每孔加底物A、B各50 μl，避光10～30 min，视显色情况灵活掌握。⑨每孔加终止液50 μl，即刻在450 nm酶标仪测定标本的吸光度，画出标准曲线，计算出血清样本的表达水平〔4〕。检测过程中严格质控。

　　1.4 疗效判定标准 ①基本痊愈，功能缺损评分减少91%～100%，病残程度为0级。②显著进步，功能缺损评分减少46%～90%，病残程度为1～3级。③进步，功能缺损评分减少18%～45%。④无变化，功能缺损评分无变化或增减17%以下。⑤恶化，功能缺损评分增加18%以内〔5〕。总有效率(%)=(基本痊愈+显著进步+进步)/总例数×100%。

　　1.5 统计学方法 采用SAS6.12统计软件，两组间定量资料比较采用t检验，定性资料采用χ2检验。

　　2 结 果

　　2.1 两组治疗后疗效的比较 观察过程中依达拉奉组2例死亡，对照组3例死亡。依达拉奉组治疗后的总有效率明显优于对照组(P<0.05)，见表1。表1 两组疗效比较

　　2.2 两组治疗前、后血清中MMP2和9表达的比较 两组治疗前MMP2和9表达无差别，而治疗后二组MMP2和9表达均下降(P<0.05)，而且依达拉奉组的下降值明显高于对照组(P<0.05)。见表2。表2 两组治疗前后血清中MMP2和9表达的比较

　　3 讨 论

　　MMP2和9是重要的MMPs，可由多种细胞分泌、如结缔组织细胞、内皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、胸腺细胞、粒细胞、角质细胞、成纤维细胞等〔6，7〕。对缺血性脑卒中的研究发现，MMP9激活和脑血管关键蛋白成分降解与出血和水肿的发展相关。在缺血性脑卒中的病理过程中，动脉闭塞后产生一系列的缺血级联反应和细胞因子，可能其中的某些细胞因子能诱导MMP9酶原产生，并使MMP9表达显著增加〔2〕。有研究认为细胞外基质构成毛细血管基底膜的基本骨架，对于维持血脑屏障和脑血管完整性具有重要作用，MMP9浓度与缺血性脑卒中的严重性有关〔8〕。依达拉奉的主要成分为3甲基1苯基2吡唑啉5酮，是一种强效的羟自由基清除剂及抗氧化剂，也是一种新型的神经保护剂，其血脑屏障的穿透率约60%，静脉给药后迅速在脑内达有效治疗浓度，可抑制脂质过氧化反应，防止脑水肿〔9〕。清除自由基和抑制脂质过氧化对脑缺血再灌注损伤具有重要作用，自由基清除剂对脑缺血后组织损伤及延迟的神经细胞死亡有保护作用，已成为缺血性脑卒中急性期的有效治疗手段之一〔10〕。本实验结果提示依达拉奉对缺血性脑卒中有较好治疗作用时，并能对血清中MMP2和9有效地进行调节，临床中可以应用于治疗中。而且依达拉奉还能抑制各种因子引起的过氧化损伤，对大脑半球梗死和短暂性脑缺血有较好的保护作用，抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤，并能对急性缺血性脑卒中的再灌注损伤有很好的治疗作用。MMP2和9可以削弱动脉粥样硬化纤维帽的保护作用，因此，通过减少局部MMP2和9的产生是目前临床上可以实施的治疗方法〔11〕。自由基可以直接通过对MMPs的氧化或亚硝基化导致MMPs的活化，激活蛋白水解酶对基底膜的降解作用。而依达拉奉作为一种合成的自由基清除剂和抗氧化剂，通过清除自由基，进而调节水解酶对基底膜的降解，对疾病恢复有重要作用。

　　【参考文献】

　　1 Yagi K，Kitazato KT，Uno M,et al.Edaravone，a free radical scavenger，inhibits MMP9related brain hemorrhage in rats treated with tissue plasminogen activator〔J〕.Stroke，2009;40(2)：62631.

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　　3 全国第四届脑血管病学术会议.脑卒中患者临床神经功能操作程度评分标准〔J〕.中华神经科杂志，1996;29(3)：3813.

　　4 薛 冰，李清贤，孙景芝.老年冠心病患者100例血清hsCRP、IL6和IL18的检测及临床意义〔J〕.中国老年学杂志，2010;30(7)：9978.

　　5 郭道骝.探讨依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效及对高敏C反应蛋白的影响〔J〕.中国医药指南，2010;8(8)：99100.

　　6 刘爱东，庞久玲，刘士生.胃癌中基质金属蛋白酶9和CD105表达关系的研究〔J〕.中国老年学杂志，2009;29(7)：8867.

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　　8 赵仁亮，相 波，王奉霞，等.老年急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶9浓度的动态变化及临床意义〔J〕.中华老年医学杂志，2007;26(9)：6834.

　　9 Sano H，Kamijo T，Ino T,et al.Edaravone，a free radical scavenger，in the treatment of idiopathic sudden sensorineural hearing loss with profound hearing loss〔J〕.Auris Nasus Larynx，2010;37(1)：426.

　　10 Shinohara Y，Saito I，Kobayashi S,et al.Edaravone (radical scavenger) versus sodium ozagrel (antiplatelet agent) in acute noncardioembolic ischemic stroke(EDO trial)〔J〕.Cerebrovasc Dis，2009;27(5)：48592.

　　11 苏彦果，台立稳，王惠娟.阿托伐他汀对急性脑梗死患者基质金属蛋白酶9表达的干预作用〔J〕.中华老年心脑血管病杂志，2008;10(9)：714.