CD44v6 、VEGF、 CEA水平检测对良恶 性胸腔积液鉴别的意义

　　作者：刘志波 李积德 李 淼 作者单位：(1.青海大学医学院;2.青海大学附属医院;3.苏州大学)

　　【摘要】 目的 探讨CD44v6、VEGF、CEA单项和联合检测对鉴别良恶性胸腔积液的价值。方法 选取70名胸腔积液患者，其中良性疾病组患者35例，恶性疾病组患者35例。采用ELISA法检测胸腔积液CD44v6、VEGF、CEA 水平。 结果 在恶性疾病组中，CD44v6、VEGF、CEA的平均检测值分别为(45.50±24.94)ng/ml、(458.66±194.26)pg/ml和(29.92±20.57)ng/ml，在良性疾病组中CD44v6、VEGF、CEA平均检测值分别为(13.64±10.75)ng/ml、(137.88±73.72)pg/ml、(10.56±9.33)ng/ml。在单项检测中CD44v6、VEGF、CEA的敏感度分别为85.7%、91.4%、80.0%，特异度分别为80.0%、85.7%、71.4%;在联合检测中，VEGF+ CD44v6组的敏感度为81.4%，特异度为90.0%;CD44v6+CEA组敏感度为68.6%，特异度为91.4%;VEGF+ CEA组的敏感度为72.9%，特异度为94.3%;VEGF+ CD44v6+CEA组敏感度为62.9%，特异度为96.2%。 结论 恶性疾病组胸腔积液CD44v6、VEGF、CEA水平分别明显高于良性疾病组，差异有显著性。单项检测中，VEGF和CD44v6有较高的敏感度和特异度，而在联合检测中，以VEGF+ CD44v6和VEGF+CEA的敏感度和特异度相对较高。 刘志波(1977～)，男，汉族，辽宁籍，青海大学医学院2005级研究生

　　【关键词】 胸腔积液 CD44v6 VEGF CEA 联合检测 鉴别诊断

　　THE DIAGNOSTIC VALUE OF CD44v6, VEGF and CEA IN DET

　　ERMINATION of BENIGN or MALIGNANT PLEURAL EFFUSION

　　Liu Zhibo1 ，Li Jide 2，Li Miao3

　　(1.Qinghai University Medical College; 2.Qinghai University Affiliated Hospital;3.Suzhou University)

　　Abstract Objective To observe the diagnostic value of CD44v6 ,VEGF and CEA　 in determination of benign or malignant pleural effusion. Methods Among 70 patients with pleural effusion, 35 patients suffered from benign disease and 35 patients suffered from malignant disease. The expressions of CD44v6, VEGF and CEA in pleural effusion were detected with ELISA technique. Results In the group of malignant diseases, the average value of CD44v6, VEGF and CEA were 45.50 ±24.94ng/ml, 458.66±194.26pg/ml and (29.92±20.57) ng /ml, respectively. In the group of benign disease, the average value of CD44v6, VEGF and CEA were 13.64±10.75ng/ml,137.88±73.72pg/ml and 10.56±9.33ng/ml, respectively. In single determination, the sensitivity of CD44v6, VEGF, CEA were 85.7%, 91.4% and 80%, respectively. The specificity were 80%, 85.7% and 71.4%,respectively; In combined determination, the sensitivity of VEGF+ CD44v6 was 81.4% , and the specificity was 90.0%; The sensitivity of CEA +VEGF was 72.9% and the specificity was 94.3%; The sensitivity of CEA+ CD44v6 was 68.6%, the specificity was 91.4%; The sensitivity of VEGF+CD44v6+CEA was 62.9%, the specificity was 96.2%. Conclusion The value of CD44v6, VEGF and CEA in malignant disease group is higher than that in benign disease group. There showed significant difference. In single detection, VEGF and CD44v6 have higher sensitivity and specificity. In combined detection, the groups of VEGF + CD44v6 and VEGF+CEA have higher sensitivity and specificity.

　　Key words pleural effusion CD44v6 VEGF CEA differential diagnosis

　　胸腔积液常见于各种良性和恶性疾病[1]，对两者的鉴别具有重要的临床意义。胸水脱落细胞学检查是最简单、最特异的检测方法，但其阳性率仅有30%左右，即使反复抽液送检其阳性率也仅有50%左右[2]。在胸水细胞学检查呈阴性的恶性肿瘤患者中，仅有7%～12%的患者依靠再次行胸水细胞学检查最终得到确诊[3]。目前，寻找胸腹腔积液中高敏感度、高特异度的可溶性肿瘤标志物成为人们研究的一个热点。本实验选择敏感度和特异度较高的3个肿瘤标志物-CD44v6(粘附分子)、VEGF(血管内皮生长因子)、CEA(癌胚抗原)进行检测和分析，探讨其在胸腔积液性质鉴别中的诊断价值。

　　1 资料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 标本：采自2007年3～8月送检青海大学附属医院病理科的胸腔积液标本，所有患者在胸腔积液采集前均未行化、放疗治疗。恶性疾病组胸腔积液标本35份;男性患者21例，女性患者14例，年龄41～77岁，平均年龄54.9岁;所有恶性疾病组患者均经病理学确诊，其中肺癌患者18例，乳腺癌患者2例，食道癌患者6例，大肠癌患者8例，胃癌患者1例。良性疾病组胸腔积液标本35份;男性患者19例，女性患者16例，年龄28～69岁，平均年龄36.7岁，其中结核性胸腔积液患者26例，慢性非特异性炎症性胸腔积液患者9例。

　　1.1.2 主要试剂：检测CD44v6、VEGF 和CEA 之ELISA试剂盒由上海天呈医流生物制品有限公司提供。

　　1.1.3 主要仪器：采用美国BIO-TAK INSTRUMENTS.INC.公司的ELX800全自动酶标仪及其配套洗板机。

　　1.2 操作步骤

　　常规胸膜腔穿刺后，抽取胸腔积液50ml即送实验室离心(4000r/min)10 min，分离上清液置于冰箱(-30℃)集中冻存。采用ELISA法检测CD44v6、VEGF、CEA。

　　1.3 良恶性胸腔积液临界值的确定

　　分别假设CD44v6、VEGF、CEA各检测值为临界值，计算出一系列的敏感度和特异度[4]，选取对应的敏感度和特异度之和最大的检测值作为各单项检测鉴别良恶性胸腔积液的临界值。

　　1.4 统计学处理方法

　　所有实验数据用x±S表示,采用SPSS13.0统计软件进行独立样本t检验和相关性分析。

　　2 结果

　　2.1 良恶性疾病组中胸腔积液CD44v6、VEGF、CEA水平比较结果

　　恶性疾病组中胸腔积液CD44v6、VEGF、CEA水平明显高于良性疾病组，差异有显著性(见表1)。

　　表1单项检测平均值一览表 注：*与良性疾病组比较.

　　2.2 良恶性疾病组胸腔积液CD44v6、VEGF 和CEA水平之间相关性分析结果

　　良性疾病组和恶性疾病组患者胸腔积液CD44v6与VEGF水平呈显著正相关，r=0.728 , P<0.01，见图1。CD44v6与CEA水平及VEGF与 CEA水平相关性无统计学意义。 图1 CD44v6与VEGF水平相关趋势图

　　2.3 CD44v6、 VEGF 和CEA的诊断效能判定结果

　　图2是用构图方法揭示CD44v6、 VEGF 和CEA敏感性和特异性的相互关系，它通过将CD44v6、 VEGF 和CEA的各个测量值设定成多个不同的临界值，依此计算出一系列敏感度和特异度，再以敏感度为纵坐标，1-特异度为横坐标绘制成曲线，曲线下面积越大，诊断准确性越高[5]。

　　图2 CD44v6、 VEGF 、CEA的受试者工作特征曲线(ROC)图

　　计算图2 ROC曲线下面积,可以判断诊断效能：VEGF> CD44v6>CEA。

　　2.4 CD44v6、VEGF 和CEA各单项检测鉴别良恶性胸腔积液的诊断分界点值及敏感度与特异度结果(表2)

　　表2单项检测结果一览表

　　检测项目诊断分界点敏感度表2显示，VEGF和CD44v6有较高的敏感度和特异度，而CEA的敏感度和特异度相对较低。

　　2.5 CD44v6、VEGF 和CEA联合检测的敏感度和特异度结果(见表3)

　　表3联合检测结果一览表表3显示，VEGF+CEA和VEGF+ CD44v6的敏感度和特异度相对较高。

　　3 讨论

　　本实验发现VEGF、CD44v6 、CEA三项指标中以VEGF的敏感度和特异度为最高，CD44v6的敏感度和特异度较高,而CEA敏感度和特异度相对较低，但与其他两项指标联合检测则可较好地满足临床检验的需要。在以上3个因子联合检测的诊断效能方面，VEGF+ CD44v6组合的敏感度为81.4%,特异度为90.0%;VEGF+CEA组合的敏感度为72.9%，特异度为94.3%,以上两个组合的敏感度和特异度较高，具有较好的临床应用价值，而三项联合检测虽然特异度有所增加，但敏感度却大幅下降，故临床检验应用价值不大。

　　本实验还发现在良恶性胸腔积液中 CD44v6与 VEGF的检测结果有较高的相关性,可能的机制如下：当肿瘤细胞由原发部位脱落并转移到机体其他部位时，CD44v6可能促进肿瘤细胞与血管或淋巴管内皮细胞之间、肿瘤细胞与基膜之间及肿瘤细胞穿破基膜与器官组成细胞之间的粘附;VEGF诱导肿瘤新生血管形成，同时增加毛细血管通透性，促进血浆蛋白外渗。两者共同作用促进肿瘤的转移和胸腔积液形成。而CEA与VEGF及CEA与CD44v6的相关性均较低，考虑主要与CEA是一种腺上皮来源的肿瘤标志物[6]及入组病例数较少有关。通过本实验，作者认为可以将胸腔积液中肿瘤标志物检测应用于临床以弥补脱落细胞学检测阳性率过低的缺点。

　　【参考文献】

　　[1]孙渝,王良兴,王惠军,等. VEGF、CD44v6、MMP联合检测对良、恶性胸水的鉴别意义.温州医学院学报，2006,36(4):350-353

　　[2]Braunschweig R,Yan P,Guillert I, et al. Detection of malignant effusions;comparison of a telomerase assay and cytologic examination[J].Diagn Cytopathol,2001,24(3):174-180

　　[3]Taubert J.Management of malignant pleural effusion[J].Nurs Cin North Am,2001,36(4):665-683

　　[4]李康.连续变量诊断试验数据的ROC分析.中国医院统计,2007,14,(3):1-4

　　[5]鄢军,刘军,李承彬,等.ROC曲线在多项指标鉴别胸腹腔积液性质中的应用.现代检验医学杂志,2006,21(5):25-27

　　[6]陈敏,杨昕,徐丽萍.ADA和CEA在诊断良恶性胸腹水中的价值[J].淮海医药,2006,07:270-271