重症肌无力患者血清B淋巴细胞刺激因子、IL6水平检测及临床意义

　　作者：李晓峰 李吕力 罗永坚 肖继东 秦岭 刘晓春 作者单位：广西壮族自治区人民医院神经内科，广西 南宁 530021

　　【摘要】 目的 探讨B淋巴细胞刺激因子(BAFF)和白介素6(IL6)在重症肌无力发病中的作用及临床意义。方法 采用ELISA方法检测32例重症肌无力患者(MG组)和30例健康人(NC组)血清中BAFF及IL6的水平，对32例MG患者病情按许贤豪绝对评分法进行评分，分析BAFF和IL6的临床意义。结果 MG患者外周血清BAFF、IL6水平显著高于正常组(P<0.05),Ⅱ型、Ⅲ型MG患者IL6水平显著高于Ⅰ型患者，IL6水平与患者临床绝对评分呈显著正相关。结论 BAFF、IL6参与MG的免疫病理机制，MG患者血清IL6水平与病情轻重程度密切相关。

　　【关键词】 重症肌无力;血清;B淋巴细胞激活因子;白介素6

　　Detection and clinical significance of the serum levels of B lymphocyte activating factor and interleukin6 in patients with myasthenia gravis

　　LI XiaoFeng, LI LüLi, LUO YongJian, et al.

　　Department of Neurology, the People′s Hospital of Guangxi ChuangAutonomous Region, Nanning 530021, Guangxi, China

　　【Abstract】 Objective To study the pathogenic mechanism and clinical significance of B lymphocyte activating factor (BAFF) and interleukin6 (IL6) in patients with myasthenia gravis (MG). Methods The serum levels of BAFF and IL6 were measured in 32 patients with MG and 30 normal controls (NC) by enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). The absolute scores of 32 patients with MG were rated by XU Xianhao score system. Results The levels of BAFF and IL6 in patients with MG were significantly higher than those of NC group (P<0.05). The levels of IL6 in typeⅡ and Ⅲ MG were higher than that of typeⅠMG. The levels of IL6 were positive correlation with the absolute scores of MG. Conclusions BAFF and IL6 are involved in the pathogenic immunologic mechanisms of MG and IL6 might have an evident correlation with the severity of MG.

　　【Key words】 Myasthenia gravis; Serum; BAFF; IL6

　　重症肌无力(MG)是一种神经肌肉接头传递功能障碍的自身免疫性疾病，其发病机制尚未完全阐明。既往观点认为MG是一种T细胞辅助、抗体介导并补体参与的自身免疫性疾病，与乙酰胆碱受体自身抗体介导的体液免疫密切相关。最近研究发现神经肌肉接头处抗体、胸腺相关抗体、抗原特异性T细胞、细胞因子、遗传因素等在MG的发病中也扮演了重要的角色，MG可能是一种多基因调控、多种机制参与的自身免疫性疾病。细胞因子网络失衡成为目前MG发病机制的研究热点，其中白介素6(IL6)、B淋巴细胞刺激因子(BAFF)在免疫网络调节中具有重要作用。本研究中主要探讨不同Osserman临床分型MG患者的BAFF和IL6的表达水平及其临床意义。

　　1 对象与方法

　　1.1 标本来源

　　MG组病例来源于本院于2007年10月至2008年4月门诊及住院收治初次确诊MG患者32例，排除激素及免疫抑制剂治疗史以及其他自身免疫性疾病患者，其中男性9例，女性23例，平均年龄(38.6±13.3)岁;按照MG改良Osserman临床分型：Ⅰ型6例，Ⅱa型14例，Ⅱb型6例，Ⅲ型4例，Ⅳ型2例，受检前未使用肾上腺皮质激素或其他影响免疫功能药物。对照组为健康正常人30名，其中男性10名，女性20名，均来源于我院体检中心，平均年龄(37.2±11.6)岁，近期未服用影响免疫功能药物。两组性别、年龄、种族构成差异无统计学意义。

　　1.2 方法

　　全部MG病例与正常对照者均于清晨空腹采血5 ml，离心后取上清，置于EP管中-80℃保存。所有标本一次性进行测定，检测方法为ELISA法，试剂盒均由RapidBio Lab提供，严格按照试剂盒说明书进行操作。同时将MG患者按照Osserman临床分型，并根据许贤豪临床绝对评分法〔1〕对病情严重程度评分。

　　1.3 统计学处理

　　采用SPSS13.0软件，结果以x±s表示，组间比较采用t检验、方差分析及相关性分析。

　　2 结 果

　　2.1 两组血清BAFF和IL6的水平

　　MG患者血清中BAFF和IL6的水平明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)，见表1。表1 两组血清BAFF和IL6的水平(略)

　　2.2 各型MG患者血清BAFF、IL6水平比较

　　不同临床分型的MG患者血清中两项指标的变化不尽相同，各型MG患者之间BAFF水平差异无统计学意义(P>0.05);Ⅱb型和Ⅲ型MG患者中血清IL6水平均显著高于Ⅰ型患者，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)，IL6的水平随着MG患者临床症状严重程度而增高。见表2。表2 各型MG患者血清BAFF、IL6水平(略)

　　2.3 MG患者血清BAFF和IL6的水平与临床绝对评分的相关性分析

　　MG患者血清IL6的水平与许氏临床绝对评分呈显著正相关(r=0.723，P<0.05)，在Ⅱb型、Ⅲ型MG患者中，这种变化更为明显。在MG者各亚型组中BAFF与肌无力绝对评分相关性不大(r=0.207，P>0.05)。

　　3 讨 论

　　MG的发病机制尚未完全阐明，传统观点认为MG的发病与乙酰胆碱受体自身抗体(AChRAb)介导的体液免疫密切相关〔2〕，由AChRAb直接与抗乙酰胆碱受体(AChR)的α亚单位结合导致，但抗体水平与肌无力程度之间缺乏直接的相关性，提示存在其他细胞或体液免疫机制在MG发病中起作用。

　　IL6是多功能的细胞因子，在免疫应答、急性期反应、造血调节中发挥重要作用，IL6可促进B细胞增殖、分化和分泌抗体，在活化、增值的B细胞分化为浆细胞的过程中起关键作用，同时诱导T细胞活化、增殖和分化，对机体的天然免疫和获得性免疫都具有重要的调节作用。既往研究表明，用AchR体外短期培育单核细胞，发现MG患者AchR反应性IL6、IL10、IL12等的mRNA表达阳性细胞数比正常对照组高〔3〕;Mocchegiani〔4〕等发现中青年非胸腺瘤的MG患者和老年伴胸腺瘤的MG患者的IL6、IL2、AchRAb水平显著高于正常人并相互关联，Bongioanni〔5〕等研究证明，MG患者血清IL6及IL6受体水平均增高，可能是AchRAb刺激机体的免疫系统致使外周血中的T、B淋巴细胞被激活所致。本研究发现提示IL6在MG的发病中起重要作用。

　　B细胞激活因子是Ⅱ型跨膜蛋白，既往研究〔6～8〕发现外周淋巴细胞高表达BAFF，主要表达在单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DC)、生长因子刺激的中性粒细胞和活化的T细胞表面，BAFF信号对T淋巴细胞的活化发挥着共刺激作用〔9，10〕， BAFF以膜结合蛋白和可溶性配体(hsBAFF)两种形式存在。hsBAFF与全长BAFF具有相同的生物学活性，hsBAFF能够增强B细胞、CD4+T细胞、NK细胞的活性，使机体的免疫应答增强〔11〕。BAFF缺乏可导致免疫功能低下，BAFF过度表达可以导致B细胞严重增生、降低B细胞的耐受性，促进体内自身抗体产生，产生自身免疫反应。本研究发现，BAFF在MG患者中明显升高，特别在Ⅱb型和Ⅲ型MG患者中增高最为显著，同时，随IL6水平的变化呈相关性改变。说明BAFF可能通过促进自身反应性B淋巴细胞存活或成熟，在MG发病机制中发挥着关键的作用。

　　IL6、BAFF在初诊MG患者外周血清中水平显著升高，说明MG发病过程中，T淋巴细胞、B淋巴细胞的功能及活化的变化是MG患者病情进展的关键因素之一，IL6、BAFF在Ⅱb型和Ⅲ型MG患者中表达一致增高，证明了T、B淋巴细胞在MG发病中的协同作用。控制二者的功能异常变化，特别B淋巴细胞的功能异常是治疗MG的关键〔12〕。同时，也提示控制BAFF和相关性细胞因子的变化可能成为探讨MG治疗的新途径。

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