急性胰腺炎患者血清IL15、IL18和TNFα的表达及意义

　　作者：陈志华，吕世静，邵燕丽 作者单位：(广东省佛山市顺德区北氵窖医院外科，广东佛山 528311;广东医学院临床免疫学研究室，广东湛江 524023)

　　【摘要】 目的 观察白细胞介素15(IL15)、白细胞介素18(IL18) 和肿瘤坏死因子α(TNFα)在急性胰腺炎(AP)发病机制中的作用。方法 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测21例轻型急性胰腺炎(MAP)患者和8例重症急性胰腺炎(SAP)患者血清中IL15、IL18和TNFα的含量，分析它们之间含量表达的相关性。 结果 血清SAP组和对照组的IL15、IL18和TNFα的含量分别为(57.13±5.03)、(68.41±6.14)、(36.13±3.87)ng/L和(53.05±5.12)、(64.71±6.01)、(35.5±3.02)ng/L，均明显高于MAP组[(5.69±1.61)、 (27.91±3.13)、(7.71±1.71) ng/L]，差异有统计学意义(P<0.01)，SAP组与对照组之间则无明显差异 (P>0.05)。血清IL15、IL18在MAP和SAP组中均呈正相关： r分别为0.95、0.91，均P<0.01。结论 血清IL15、IL18和TNFα等细胞因子均参与了急性胰腺炎的炎症反应过程，显示这3种细胞因子的变化对预测急性胰腺炎病情发展及治疗均有较好的指导意义。

　　【关键词】 胰腺炎;白细胞介素15;白细胞介素18;肿瘤坏死因子α

　　基金项目：广东省科技计划项目(No 2002A3050404); 广东省重点学科 (2004Gx308) 基金资助项目

　　急性胰腺炎(AP)是消化系常见的急症之一，临床上根据其病情，按分级标准把AP患者分为轻型急性胰腺炎(MAP)和重症急性胰腺炎(SAP)。其中重症急性胰腺炎病死率极高，就目前临床的治疗方法并不能从根本上降低SAP的病死率及并发症的发生[12]。至今AP的确切发病机制仍未完全阐明，目前主要有“胰腺血循环障碍”学说[3]、“胰腺胰酶自身消化”学说[4]、“肠道细菌移居胰腺组织”学说[5]、“白细胞过度激活”学说[6]、免疫机制、细胞凋亡和氧自由基等学说，这些论述仅在某个侧面对AP的发病机制进行了阐述，而且各学说之间存在相互交叉。鉴于免疫机制学说，本文探讨AP患者血清中IL15、IL18和TNFα 水平的表达及其之间相关性的分析，经进行一步探讨其在AP的发生及病程发展中的作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 标本来源

　　收集2004年7月至2006年6月我院收治的AP患者29例， 其中男18例，女11例，年龄17～53岁。患者均于症状出现后24 h内入院。AP患者分为MAP和SAP组。以血钙浓度≤1.87 mmol/L(7.5mg/L)、APACHEⅡ评分≥8分和Balthazar CT评分≥Ⅱ级者为SAP组共8例，低于以上标准者为MAP组共21例[7] 。另取健康献血者29例作为对照组。

　　1.2 主要试剂

　　试剂盒均购自深圳晶美生物制品公司，其中人 IL15、人 IL18试剂盒为原装进口，产于奥地利 Bender MedSystems;人TNFα试剂盒为深圳晶美公司进口分装(美国产)。酶标仪型号：BioTek ELx800型酶标仪(USA)。

　　1.3 实验方法

　　清晨空腹抽取静脉血3 mL，分离血清，平均分装于2个试管，置-70 ℃冰箱保存，待测血清IL15、 IL18和TNFα含量。采用双抗体夹心ABCELISA法，在492 nm处测定吸光值(OD值)。所有OD值减除空白值后再行计算，绘制标准曲线;根据样品OD值求出标本中各细胞因子含量。

　　1.4 统计学处理

　　所有测定值用平均数±标准差(±s)表示，采用单因素方差分析及q检验作显著性检验, 用直线相关做两因素间相关性分析。统计采用SPSS11.0软件包。

　　2 结果

　　2.1 AP患者血清中细胞因子的含量

　　MAP组患者的血清中IL15、IL18和TNFα含量明显低于SAP组和对照组，差异有统计学意义(P<0.01); SAP组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

　　表1 急性胰腺炎患者血清中IL15、IL18和TNFα的含量(略)

　　注：与对照组及SAP组比较，*P<0.01;SAP组与对照组比较，均P>0.05。

　　2.2 相关性分析

　　血清IL15、IL18在MAP和SAP组中均呈正相关：r分别为0.95、0.91，均P<0.01。

　　3 讨论

　　急性胰腺炎的发病过程与细胞因子的关系，近年来日益受到国内外学者的广泛关注。目前已知IL15能促进细胞因子产生，并参与局部炎症反应[8]。本文显示，AP在早期由于炎性因子的大量释放，IL15呈低浓度表达,发挥其早期保护作用，抑制过多促炎性因子产生，故可防止炎症反应进一步加剧发展。IL15的变化同时提示,随着AP病情进一步加重，IL15在血清中含量的表达也随之增加，从而增加了促炎因子的产生，并加重了患者高细胞因子血症所导致病情发展的恶性循环。MAP组血清IL15的含量低于对照组(P<0.01)，而SAP组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);从而提示血清中的IL15在AP早期主要是起保护作用。也可能是血清中的IL15在入院后24 h内尚未达到高峰水平，而随着疾病病情的发展，处于动态上升。因此，如AP早期血清中的IL15水平升高不明显，预示AP愈后结果良好。若AP早期血清中IL15的含量持续升高，则提示AP愈后不良。

　　本研究显示，在SAP组患者血清中IL18的含量表达显著高于MAP组患者(P<0.01)， 说明IL18与疾病严重程度密切相关。MAP组血清IL18含量显著低于对照组(P<0.01)，而SAP组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。正常人血清中促炎细胞因子和抗炎细胞因子通常处于动态平衡，当在炎症发生的早期，促炎细胞因子在大量产生的同时，也产生抗炎细胞因子，这些抗炎细胞因子具有重要调节功能，能起到限制炎症反应的作用。

　　TNFα主要由活化的单核巨噬细胞产生，是一种具有多种生物学效应的生理炎性介质，可导致炎症、细胞坏死等，适量的TNFα对机体有保护作用，过量时则会对机体产生损伤[8];本文8例SAP血清中的TNFα的含量表达显著高于MAP组(P<0.01)，说明TNFα与AP病情的相关性。

　　总之，本文显示AP患者、轻重症患者IL15、IL18、TNFα在血清中的表达含量，随着病情的恶化，三者同时升高, 且变化趋势相似。研究表明：检测AP患者血清中的IL15、IL18和TNFα的表达水平，对于观察病情变化、愈后预测及指导治疗均有较好的指导意义。

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