前列腺素E2局部注射建立肌腱病动物模型及与凋亡关系的实验研究
发表时间：2010-03-27 浏览次数：601次
作者：崔清波，李昭铸，韩福友 （哈尔滨医科大学附属二院小儿外科，黑龙江 哈尔滨 150086）基金项目: 黑龙江省教育厅海外学人科研资助项目（1054HQ019）
摘要: 本文建立肌腱病动物模型，探讨其与凋亡的关 系。结果显示局部注射前列腺素（PGE2）可成功建立肌腱病 动物模型; 退变肌腱中存在着过量凋亡。
关键词: 肌腱病; 前列腺素
肌腱病（tendinopathy）在各种运动中的发病率都很高［1］， 它是一种过度使用性损伤。目前仍缺乏与人类肌腱病极相 似的动物模型以及恰当可行、科学的研究方法来阐明肌腱病 的病理改变和凋亡与肌腱病的关系以及理想的治疗方案，笔 者采用前列腺素（PEG2）局部注射建立其动物模型，并进行 了有关实验研究，现报道如下。材料与方法
1 动物模型的建立
新西兰大白兔48只（2.20～2.65kg） （由哈尔滨医科大学动物实验中心提供）随机分为3组，每组 16只。选取距兔跟腱的跟骨附着点近端约2.0cm处为注射 部位，每次注射0.2ml溶液。每组内随机选7只兔注射小剂 量PGE230ng/0.2ml（每周1次），另7只兔注射大剂量PGE2 300ng/0.2ml（每周1次）; 1只兔注射生理盐水0.2ml（每周 1次），1只兔为空白对照。分别于注射后第1、3、5周取材。 PGE2由美国sigma公司提供。
2 方法
从形态学及光镜下对HE染色的组织切片进行病 理学观察，并采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末 端标记法（TUNEL）检测凋亡细胞; 应用SPSS软件对所得数 据进行统计学分析。
3 结果
3.1 HE染色组织切片的病理学观察（由哈尔滨医科大学病 理学教研室提供）形态学上，退变区域肌腱变软，灰褐色，呈 无定形的外观。 光镜下，注射不同剂量PGE2的跟腱均发生肌腱病，出现 了不同程度的细胞增生，血管增生和胶原纤维结构的破坏与 松弛。低倍镜下，胶原纤维失去了纵行平行排列的结构，小 剂量组胶原纤维多出现不规则卷曲，变松或波浪起伏的增 加，变得细小而且排列紊乱，失去光泽，相邻胶原束之间失去 清晰的界限，而大剂量组胶原纤维排列则更加紊乱，多出现 胶原的断裂、溶解; 高倍镜下可见肌腱细胞增生，表现为细 胞的密度不均，一些区域挤满了圆形核的腱细胞，小剂量组 仅表现为轻或中度增生，而大剂量组多表现为重度增生; 肌 腱退变的另一个典型特征是毛细血管和动脉的增生，高倍镜 下发现小剂量组的肌腱血管成纤维反应，大剂量组中的肌腱 血管呈散乱的生长，有时甚至与胶原纤维呈直角; 另外，高 倍镜下观察发现，大剂量组的肌腱有时表现为脂肪变性。
3.2 TUNEL法检测结果（由哈尔滨医科大学病理学教研室 提供） 通过TUNEL法显色后，光镜下放大400倍，发现空 白对照和注射生理盐水的跟腱中，每视野约有（7.00±1.15） 个正常细胞而无凋亡细胞，小剂量组有凋亡细胞（13.67±2. 27）个，而大剂量组凋亡细胞有（23.00±3.66）个。同时还意 外发现，增生的血管内皮细胞中凋亡也出现了异常的增高。
3.3 统计学分析 对所得数据进行两因素三水平方差分 析，α=0.05。不同剂量的PGE 2组之间的差异在统计学上具 有显著意义（P<0.05）; 而在不同时间点上发生凋亡的细胞 数目差异无统计学意义（P=0.12>0.05）。讨 论 肌腱病是一种内外多种因素共同作用而引起的肌腱损 伤。退变肌腱组织中，凋亡细胞数量的增加会影响胶原的合 成和修复，蛋白质合成功能障碍会更加削弱肌腱组织，甚至 有断裂的危险。显然，需要在这个途径中加入许多细节。本 实验模型的建立为肌腱病的预防和治疗创造了条件。
参考文献:
［1］ Alessio S.The effects of prolonged peritendinous administration of PGE1to the rat Achilles tendon: a possible animal model of chronic tendinopathy［J］.J Orthop Sci，2001，6:349-357.
