survivin与鼻咽癌的研究现状

　　作者：陈兰花(综述)，孙宁(审校) 作者单位：(广东医学院病理学教研室，广东湛江 524023)

　　【摘要】 鼻咽癌是我国南方常见的恶性肿瘤之一，放射治疗是首选的治疗方法，单纯放疗后5a生存率可达50%，然而还有部分患者对放疗不敏感，预后较差。survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一，是目前发现的最强的凋亡抑制因子，能抑制细胞凋亡，调节细胞周期，促进细胞分裂，参与血管形成。它特异性表达于胚胎组织及人类大多数恶性肿瘤组织中，而在分化成熟的正常成人组织中不表达或低表达，这种高度的组织表达特异性提示survivin是一个具有潜在价值的肿瘤标志物，与肿瘤的诊断、预后密切相关，有望成为肿瘤靶向治疗的理想新靶点。研究发现，Survivin在鼻咽癌组织中存在高表达现象，以survivin为靶点的治疗方法可能为临床鼻咽癌治疗开辟新途径。本文就survivin与鼻咽癌的研究现状作一综述。

　　【关键词】 生存素/survivin;鼻咽癌;综述文献

　　survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一，是目前发现的最强的凋亡抑制因子，它具有高度的组织表达特异性及强大的抗凋亡活性，自发现以来即成为肿瘤学家研究的重点。本文主要就survivin的结构和生物学功能以及survivin与鼻咽癌关系的研究现状做一综述。

　　1 Survivin的结构及生物学功能

　　1.1 survivin的结构

　　survivin是Ambrosini等[1]于1997年利用人类效应细胞蛋白酶受体1(effector cell proteasereceptee1，EPR1)的cDNA在人类基因库中筛选分离出的一种凋亡抑制基因，该基因定位于染色体17q25，全长15kb，含4个外显子和3个内含子，

　　其编码的蛋白包含142个氨基酸，分子量为16.5KD。survivin是IAP家族中分子量最小但抗凋亡活性最强的成员，IAP家族一般含有2～3个串联的含有半胱氨酸/组氨酸共有序列在内的由70个氨基酸组成的杆状病毒凋亡抑制蛋白重复结构(baculovirus IAP repeat, BIR)，以及羟基末端的环指结构，其中BIR是发挥抗凋亡作用功能的结构。survivin只含单一的BIR序列，且羧基末端不含环指结构，代以44个氨基酸形成的交织螺旋结构(coiledcoil)，该结构是survivin与纺锤体微管结合的位点。

　　1.2 survivin的异构体

　　survivin前体mRNA经选择性剪接后可产生不同的剪接异构体。1999年Mahotka等[2]首先在肾癌细胞中发现了两个survivin的异构体，即survivin△Ex3和survivin2B，前者序列中缺少外显子3，具有抗凋亡活性，而后者是把内含子作为隐蔽的外显子，不具抗凋亡活性，相反可以作为天然存在的survivin的拮抗剂。进一步研究还发现了第3个survivin异构体survivin3B，该异构体也保留了抗凋亡特性。survivin及其剪接异构体可能在肿瘤进展中发挥作用，但其具体的作用机制还有待进一步的研究探讨。

　　1.3 survivin的组织表达

　　survivin具有高度的组织表达特异性，在胚胎和发育成熟的胎儿组织中表达，在除胸腺、睾丸、分泌期子宫内膜、胎盘外的分化成熟的正常成人组织中不表达或低表达，而在绝大多数恶性肿瘤组织中则高表达。Tamm等[3]采用NCI抗肿瘤药物筛选程序中的60种人类肿瘤细胞株，结果发现60种肿瘤细胞株均有survivin的表达。

　　survivin在肿瘤细胞中表达存在两种不同的亚细胞定位，即定位于细胞核或(和)细胞浆中，有研究[4]报道，survivin同时在胞浆和胞核表达。也有文献[5]报道，survivin阳性染色主要定位于细胞浆，或者细胞核[6]，这可能与不同的肿瘤组织survivin的转录后修饰不同，定位于细胞有丝分裂的不同时期有关。survivin亚细胞定位的多样性使其具有复杂的生物学功能，有关survivin亚细胞定位与肿瘤预后价值的国内外文献报道存在较大争议。有研究认为survivin胞核染色阳性患者预后差，生存期短，可作为独立的预后评估指标，而胞浆阳性者与预后和肿瘤进程无明显相关[7]。也有学者认为其胞核表达可改善预后，胞核内survivin表达有更长的总生存期和无复发生存期[89]。还有研究[10]认为survivin细胞核表达对预后无影响。而Yip等[11] 则研究发现，胞核中survivin的表达过高或者过低都比表达适中进展差，只有当survivin以最适比例表达时，才会有较好的临床效果。

　　1.4 survivin的生物学功能

　　survivin具有复杂的生物学功能，它在肿瘤的发生发展过程中主要通过抑制细胞凋亡，调节细胞周期发挥作用。

　　细胞凋亡与恶性肿瘤的发生密切相关。研究认为，大多数凋亡信号所诱发的细胞凋亡都是通过效应蛋白酶实现的。细胞凋亡主要有死亡受体途径和线粒体途径。这两种途径的终末效应蛋白酶都是Caspase3和Caspase7。survivin可直接抑制Caspase3和Caspase7的活性，有效阻断细胞凋亡过程，也可以通过与细胞周期调控因子CDK4形成survivinCDK4复合体，使p21从CDK的复合体中释放出来并异位到线粒体而间接抑制Caspase3的活性，从而发挥抑制凋亡的作用[12]。survivin还有可能通过抑制Caspase9活性发挥抗凋亡作用。有研究[13]发现survivin可与辅助性线粒体源性Caspase激活因子SMAC结合，使IAP家族其他成员免受SMAC的抑制，从而抑制Caspase9的活性。survivin还可以通过诱导肿瘤坏死因子受体介导的NFκB的活化抑制细胞凋亡[14]，以及抑制IL3、fas、bax、TNFα、抗肿瘤药物及X线辐射诱导引起的细胞凋亡。

　　研究证实，survivin的表达具有细胞周期依赖性，以严格细胞周期调控方式在有丝分裂过程中表达，参与细胞分裂的调控。Li等[15]用细胞分裂阻断剂将细胞阻断在细胞增殖不同时期，结果发现survivin在G1期几乎不表达，在S期表达增加6倍，在G2/M期表达增加40倍，这是由于survivin基因启动子序列中存在3个细胞周期依赖因子(cell cycle dependent element，CDE)和一个细胞周期同源性区域(cell cycle homology regions，CHR)，CDE和CHR是G1期抑制元件，调节G2/M期基因表达的半衰期，使survivin特异地表达于G2/M期。survivin是G2/M期的调节基因，有丝分裂开始时survivin与纺锤体的微管蛋白特异性结合，共同维持有丝分裂的正常进行，并受微管动力的调节，干扰survivin与微管蛋白的结合可致survivin抗凋亡活性的丧失。survivin的抗凋亡作用还依赖于细胞周期的G2/M的校正点，如果survivin过度表达，则可以克服G2/M校正点，使微管与survivin不能分离，survivin持续抗凋亡，致细胞增殖失控，导致癌变。

　　2 survivin与鼻咽癌

　　2.1 survivin在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

　　survivin在鼻咽癌组织中存在高表达现象，可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用，检测survivin的表达对鼻咽癌的诊断及预后有一定意义[1617]。何跃平等[18]用RTPCR和Western blot免疫印迹法检测25例鼻咽癌组织及对应的对侧鼻咽部黏膜、10例正常人的鼻咽部黏膜组织中survivin mRNA和蛋白的表达，发现survivin在正常鼻咽部黏膜组织中不表达，在80.0%的鼻咽癌组织和40.0%的对应对侧相对正常鼻咽部黏膜中表达，且在鼻咽癌组织中的表达均较对应的对侧鼻咽部黏膜组织高。研究[1617]发现鼻咽癌组织中存在survivin高表达现象，但在survivin表达强度与患者的年龄、性别、临床分期、颈淋巴结转移、预后、以及鼻咽癌细胞的分化程度有无相关性等问题上尚存有争议，部分研究发现survivin表达强度与鼻咽癌的上述指标无关[6,19]，而部分研究则发现survivin的表达活性与鼻咽癌的分期、颈淋巴结转移、放疗敏感性、5a生存率及复发倾向有密切关系，可作为鼻咽癌的预后指标。Xiang等[20]发现survivin的表达与鼻咽癌远处转移相关，低survivin表达的患者较高表达者有更长的总生存率、无远处转移生存率。另一项研究[11]还发现鼻咽癌中survivin高表达或低表达均预后不佳，只有以适当的比例表达才具有最好的临床效果。

　　2.2 survivin与其他指标在鼻咽癌中的表达

　　肿瘤的发生发展是个多步骤、多阶段的过程，机制非常复杂，涉及到多种癌基因、抑癌基因、凋亡基因和抗凋亡基因等，他们之间相互促进或拮抗，共同促进肿瘤的发生发展。在多种肿瘤中，均同时存在多种基因的表达异常。研究发现，在鼻咽癌中，除survivin表达异常外，同时还存在其他指标的异常。

　　survivin、bcl2和P53蛋白被证实在头颈部肿瘤中存在表达异常。有学者认为survivin的过表达可能与野生型p53的缺失有关[21]。黄东海等[5]检测鼻咽癌组织中survivin、bcl2和P53蛋白的表达情况，除了发现三者在鼻咽癌组织中高表达外还发现三者的表达密切相关，共同促进鼻咽癌的发生发展。Yip等[11]研究发现survivin、bcl2、p53在鼻咽癌中的表达与EB病毒(EpsteinBarr virus, EBV)感染相关，在EBV阳性的鼻咽癌中表达，而在EBV阴性者中相对低表达。

　　肿瘤新生血管形成在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。研究发现，survivin在肿瘤细胞的恶性增殖中发挥作用可能与血管的形成有关，其可能机制是介导VEGF、bFGF及血管生成素1促进血管生成。O'Connor等[22]利用VEGF刺激survivin低表达的静止期血管内皮细胞，结果出现survivin的明显表达，表明VEGF可诱导survivin表达的上调，为新生血管内皮细胞的生存提供条件。Mesri等[23]利用survivin的反义核苷酸抑制血管内皮细胞中survivin的表达后，发现VEGF保护内皮细胞功能降低，说明VEGF抑制凋亡特性主要由内皮细胞中survivin的表达所调控。临床研究发现在乳腺癌、宫颈癌、膀胱癌、食管癌、大肠癌等肿瘤中，survivin与VEGF表达呈明显正相关，两者在肿瘤的发生发展中起着协同作用。李俊等[24]运用RTPCR检测出survivin、VEGF mRNA在鼻咽癌组织中表达并呈正相关性，提示survivin的异常表达可能在鼻咽癌的血管生成中发挥一定的作用。

　　此外，还有研究[2527]发现survivin与环氧合酶2(COX2)、nm23H1、PCNA等在鼻咽癌中的表达存在着相关性。这些研究提示NPC形成和转移的发生是由多基因或多因子协同作用的结果。

　　3 以survivin为靶点的抗肿瘤治疗

　　鉴于survivin在肿瘤组织中高选择表达及其强大的抗凋亡活性，因而它有可能成为抗肿瘤治疗的有效靶点。以survivin为靶点的肿瘤治疗主要有药物治疗、基因治疗和免疫治疗3种途径。药物治疗途径主要有2种方式：一是抑制survivin的磷酸化，二是阻止有丝分裂微管的装配。基因治疗途径主要有survivin反义寡核苷酸技术、核酶技术、显负性突变、细胞周期依赖性激酶抑制剂以及最近两年兴起的RNA干扰技术。目前，这些技术已广泛应用于多种肿瘤的研究中并取得了令人满意的结果。2006年，Shi等[28]用RNA干扰技术证实了鼻咽癌中survivin的抗凋亡作用，提示survivin可作为鼻咽癌的治疗靶点。

　　以survivin为靶点的抗肿瘤治疗不仅可以通过增加自发性凋亡而抑制肿瘤增殖，还可联合肿瘤放化疗，提高放疗和化疗的疗效。Asanuma等[29] 利用转基因技术将survivin基因转染到放射线敏感的胰腺癌细胞株MIAPaCa中，观察到细胞放射敏感性降低，并伴有Caspase3的受抑;而把显性阴性突变的survivin基因转染入放射抗拒细胞PANC1中后，Caspase3活性提高，放射敏感性增强。因此，阻断肿瘤细胞中survivin的功能或者抑制其表达能诱导细胞凋亡增加，抑制肿瘤细胞增殖及增强其对放疗的敏感性。放射治疗是鼻咽癌的主要治疗方法，但仍存在部分放射抗拒现象，探讨以survivin为靶点的放射增敏作用可能突破鼻咽癌放射抗拒的瓶颈，使临床鼻咽癌治疗取得更好的治疗效果。有研究[30] 显示survivin高表达与鼻咽癌放疗敏感性密切相关，对预测放疗敏感性有重要参考价值。

　　4 结语

　　survivin是一种具有广阔发展前景的抗肿瘤新靶点。目前，有关其研究已经取得很大进展，但大部分停留在基础研究阶段，仍有很多问题尚未阐明，如survivin及其异构体的亚细胞定位及功能，它与有关癌基因、抑癌基因和其他凋亡相关基因的关系等，这些问题均需日后研究和深探。

　　【参考文献】

　　[1] Ambrosini G，Adida C，Altieri D C.A novel antiapoptosis gene，survivin，expressed in cancer and lymphoma[J].Nat Med，1997，3(8)：917921.

　　[2]Mahotka C，Wenzel M，Springer E，et al.Survivindelta Ex3 and survivin2B：two novel splice variants the apoptosis inhibitior survivin with different antiapoptotic properties[J]. Cancer Res，1999，59(24)：60976102.

　　[3] Tamm I，Wang Y，Sausville E，et al.IAPfamily protein survivin inhibits caspase activity and apoptosis induced by fas，bax，caspase，and anticancer drugs[J]. Cancer Res，1998，58(23)：53155320.

　　[4] Angell H.A study into the potential role of Survivin localization in resistance to druginduced apoptosis[J]. Bioscience Horizons，2008，1(2)：8591.

　　[5] 黄东海，范松青，田勇泉，等. 鼻咽癌组织中survivin、bcl2和p53蛋白的表达及其相关性[J]. 实用癌症杂志，2004，19(6)：585587.

　　[6] 张帅，肖健云，田勇泉，等. 凋亡抑制基因Survivin与鼻咽癌预后关系的研究[J].中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2004，10(4)：196199.

　　[7] Martinez A，Bellosillo B，Bosch F，et al. Nuclear survivin expression in mantle cell lymphoma is associated with cell proliferation and survival[J].Am J Pathol，2004，164(2)：501510.

　　[8] Kennedy S M，O'Driscoll L，Purcell R，et al. Prognostic importance of survivin in breast cancer[J]. Br J Cancer，2003，88(7)：10771083.

　　[9] Kleinberg L，Florenes V A，Silins I，et al.Nuclear expression of survivin is associated with improved survival in metastatic ovarian carcinoma[J].Cancer，2007，109(2)：228238.

　　[10] Cohen C，Lohmann C M，Cotsonis G，et al. Survivin expression in ovarian carcinoma：correlation with apoptotic markers and prognosis[J]. Mod Pathol，2003，16(6)：574583.

　　[11] Yip K W，Shi W，Pintille M，et al. Prognostic significance of the EpsteinBarr Virus，p53，Bcl2，and Survivin in Nasopharyngeal Cancer[J].Clin Cancer Res，2006，12(19)：5726 5732.

　　[12] Uren A G，Wong L，Pakusch M，et al.Survivin and the inner centromere protein INCENP show similar cellcycle localization and gene knockout phenotype[J].Curr Biol，2000，10(21)：13191328.

　　[13] Verhagen A M，Ekert P G，Pakusch M. Identification of DLABLO，a mammalian protein that promotes apoptosis by blinding to and antagonizing IAP proteins[J]. Cell，2000，102(1)：4345.

　　[14] Deveraux Q L，Reed J C. IAP family proteinssupressors of apoptosis[J].Genes， 1999，13(3)：239252.

　　[15] Li F，Ambrosini G，Chu E Y，et al. Control of apoptosis and mitotic spindle chechpoint by survivin[J]. Nature，1998，396(6711)：580584.

　　[16] Fu S M，Wang Y T，Tu Z H. Study on the expression of survivin mRNA and protein in nasopharyngeal carcinoma[J].Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi，2008，25(2)：179182.

　　[17] Chua H H，Yeh T H，Wang Y P，et al. Regulation of IAPs gene family by interleukin1 alpha and EpsteinBarr virus in nasopharyngeal carcinoma[J]. Head Neck，2008，30(12)：15751585.

　　[18] 何跃平，郑家法，申海荣，等. Survivin在鼻咽癌中的表达及意义[J].南华大学学报(医学版)，2005，33(3)：357360.

　　[19] 闵玲，周克元，张月飞，等.鼻咽癌细胞中Survivin基因的转录和表达[J].肿瘤防治杂志，2003，10(7)：691693.

　　[20] Xiang Y，Yao H，Wang S，et al. Prognostic value of Survivin and Livin in nasopharyngeal carcinoma[J]. Laryngoscope，2006，116(1)：126130.

　　[21] Mirza A，Mcguirk M，Hockenberry T N，et al. Human survivin is negatively regulated by wildtype p53 and participates in p53dependent apoptotic pathway[J].Oncogene，2002，21(17)：26132622.

　　[22] O'Connor D S，Schechner J S，Adida C，et al. Control of apoptosis during angiogenesis by survivin expression in endothelial cells[J]. Am J Pathol，2000，156(2)：393398.

　　[23] Mesri M，MoralesRuiz M，Ackermann E J，et al.Suppression of vascular endothelial growth factor mediat endothelial cell protection by survivin targeting[J].Am J Pathol，2001，158(5)：17571765.

　　[24] 李俊，周绪红，彭涛，等.鼻咽癌survivin和血管内皮生长因子表达的临床意义[J].实用癌症杂志，2005，20(3)：263266.

　　[25] 朱洪源，程瑶琴，李小燕，等.鼻咽癌中环氧化酶2的表达及其与Survivin和Caspase3的相关性研究[J] .中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2007，13(5)：328331.

　　[26] 赵于天，周乐源，贺蓓娃，等. Survivin和PCNA蛋白在鼻咽癌组织中的表达及与预后的关系[J]. 中国现代医药杂志，2008，10(9)：1820.

　　[27] 谷化平.Survivin和PTEN在鼻咽癌组织表达及其临床意义[J].青岛大学医学院学报，2008，44(4)：331334.

　　[28] Shi W，Bastianutto C，Li A，et al. Multiple dysregulated in nasopharyngeal carcinoma revealed by gene expression profiling[J].Int J Cancer，2006，119(10)：24672475.

　　[29] Asanuma K，Kobayashi D，Furuya D，et al.A role for survivin in radioresistance of pancreatic cancer cells[J].Jpn J Cancer Res，2002，93(9)：10571062.

　　[30] 黄东海，田勇泉，邱元正，等. 应用PCNA和survivin预测鼻咽癌放疗敏感性的研究[J]. 同济大学学报(医学版)，2006，27(5)：3942.