中国人群载脂蛋白B基因XbaI多态性与脑梗死关系的Meta分析

中国人群载脂蛋白B基因XbaI多态性与脑梗死关系的Meta分析作者：张硕，郭阳，马燕    作者单位：110004沈阳，中国医科大学第二临床学院（张硕，马燕）；中国医科大学附属盛京医院神经内科（郭阳）    【摘要】  目的 对中国人载脂蛋白B基因XbaI酶切位点限制性片段长度多态性与脑梗死关系进行Meta分析。方法 通过文献检索收集相关病例对照研究,对纳入文献进行异质性检验及合并分析。结果 纳入11篇文献合并统计,总体效应检验未发现统计学上的差异(Z=1.72，P=0.08) ；分组分析发现北方人群XbaI多态性位点在X-X+/X+X+基因型水平与脑梗死发病有统计学意义（OR=2.66，95%CI：1.67～4.24）；南方人群在此基因型水平无统计学差异（OR=1.26，95%CI：0.90～1.77）。结论 Meta分析提示载脂蛋白B基因XbaI多态性位点可能增加中国北方人群脑梗死风险,对南方人群的影响尚不确定。    【关键词】  载脂蛋白B;脑梗死;多态性;Meta分析    Metaanalysis on relationship between ApoB gene XbaI polymorphism and cerebral infarction in Chinese population  ZHANG Shuo, GUO Yang, MA Yan. the Second Clinical College ,China Medical University, Shenyang 110004, China    Abstract：Objective  The relationship between XbaI polymorphism of ApoB gene and cerebral infarction(CI) among Chinese population was assessed by Metaanalysis.Methods  All related casecontrol studies were collected from all publications, the relevant studies were identified after eliminating those poorqualified studies. Metaanalysis was conducted for investigating heterogeneity among individual studies, and summarizing the effects across studies. Results  The combined data statistics revealed the frequencies of the X-X+/X+X+ genotypes showed no statistically difference (Z=1.72，P=0.08).Through the subgroup analysis, it was obviously increase the risk of CI in Chinese northern population（OR=2.66,95%CI：1.67～4.24）,but no statistically difference in Chinese southern population（OR=1.26,95%CI：0.90～1.77）.Conclusions   ApoB gene XbaI polymorphism may be significantly associated with susceptibility of CI in Chinese northern population, but not a definite risk for Chinese southern population.    Key words：ApoB; cerebral infarction; polymorphism; Metaanalysis    载脂蛋白(Apo)B是极低密度脂蛋白（VLDL）、中间密度脂蛋白（IDL）和低密度脂蛋白（LDL）的结构蛋白，是介导LDL与相应清除受体结合必不可少的配体。关于ApoB基因XbaI酶切位点多态性与脑梗死发病风险及脂类代谢异常关系的报道较多，但研究结论存在一定的差异。本研究对目前有关中国人群ApoB基因XbaI酶切位点多态性与脑梗死关系的文献进行荟萃分析，以期得到较为客观的脑梗死与XbaI基因多态性的病因学证据。1  资料与方法    1.1  文献检索策略  外文检索Medline数据库，Cocharane图书馆和Embase数据库，主要检索词为：“ApoB”、“apolipoprotein B”、“cerebral infarction”和“genetic polymorphism”；中文联合检索中国生物医学文献数据库和中国学术期刊全文数据库，主要检索词为：脑梗死、缺血性脑卒中、载脂蛋白B、ApoB、基因多态性；检索年限1996年1月～2006年12月，无语种限制，研究对象为中国人。同时采用手工检索及文献追溯的方法以确保查全，所查文献包括期刊、会议文章汇编及研究生论文。    1.2  资料的提取与分析  由2位评价者按照上述检索策略分别收集文献并共同提取纳入。    1.2.1  文献的纳入标准  原始文献为有关中国人群ApoB基因XbaI酶切位点限制性片段长度多态性与脑梗死关系的病例对照研究；试验设计严谨，检测方法可靠，数据表达明确；涉及XbaI基因型频率和（或）等位基因频率的研究，其中病例组为脑梗死患者，对照组为当地同年龄段健康人群；脑梗死诊断标准采用WHO公认标准；对照组基因型分布符合HardyWeinberg遗传规律。    1.2.2  文献的剔除标准  非病例对照研究；统计方法不恰当；原始资料交待不清，与作者进一步联系未得到补充数据；对于同一研究结果以不同形式重复发表，取最新最完整的文献为研究对象。    1.2.3  真实性评价标准  参照Cochrane协作网系统评价工作手册［1］标准：（1）研究对象的纳入标准及基本构成特征明确;（2）病例组和对照组重要混杂因素可比; （3） 设计和分析过程的混杂因素已充分调整;（4）组间暴露因素的测量方式相同; （5）暴露因素的测量采用盲法;（6）分析时纳入所有对象。    1.3  统计学方法  使用Cochrane协作网提供的Rev Man 4.3进行统计分析，采用χ2检验对各试验结果进行异质性检验，无异质性存在者（P>0.05）采用固定效应模型进行分析;存在异质性者（P＜0.05）采用随机效应模型，并尽可能找出异质性的来源。以X-X+/X+X+基因型与X+基因频率为危险因素,采用比值比（OR)及其95%可信区间（95%CI）作为效应量；I2用于衡量研究组间的差异；用漏斗图与失安全系数( Nfs)评估有无发表偏倚及其程度；利用敏感性分析总体效应估计值是否可靠。2  结  果    2.1  检索结果  共检出相关文献34篇，其中包括2篇研究生论文，研究对象涉及全国十余个省市。其中重复文献8篇、非中国人ApoB基因XbaI多态性文献15篇予以剔除。剩余11篇符合HardyWeinberg遗传平衡检验（10篇P>0.05,1篇P>0.01）纳入分析。病例组781例，正常对照组1076人(表1)。    2.2  真实性评价结果  纳入的11个病例对照研究中,大部分对病例对照进行了充分定义，除文献［10］强调说明纳入人群含有当地壮族，其余文献均注明纳入对象为当地汉族或未加说明；组间暴露因素测量方式不够充分；大多数研究报道了组间人群性别、年龄、种族重要混杂因素的可比性,但未说明是否调整了这些因素;全部研究均未报道暴露因素的测量是否采用盲法；分析过程中均纳入所有对象(表2)。表1  中国人群脑梗死与X-X-/Ｘ-X+基因型分布关联研究基本特征表2  研究文献的真实性评价文献病例及对照的标准入所有对象郭阳 1996［2］明确部分可比未提及相同未提及是柴耀辉 1996［3］明确部分可比未提及相同未提及是张镛 1998［4］明确部分可比未提及相同未提及是赵若智 1997［5］明确可比未提及相同未提及是高瞻2001［7］明确部分可比部分提及相同未提及是姚娟 1999［6］明确部分可比未提及相同未提及是Wang L 1999［8］明确可比未提及相同未提及是郭阳 2002［9］明确部分可比未提及相同未提及是苏上贵 2003［10］部分明确部分可比未提及相同未提及是张乐 2005［11］明确部分可比部分提及相同未提及是王景华 2005［12］部分明确不可比未提及相同未提及是    2.3  资料分析  由于各文献人群罕有X+X+基因型个体存在，仅张乐［11］报道对照组存在1例，其余纳入分析人群均为Ｘ-Ｘ-基因型或Ｘ-X+基因型个体，X+X+和Ｘ-X+基因型与X+基因频率对脑梗死发病风险效应量基本相同，故本研究仅对Ｘ-X+基因型与脑梗死发病风险关系进行分析。对各独立研究进行同质性分析，结果χ2=31.45,P=0.0005,df=10；提示各研究存在异质性。采用随机效应模型进行合并统计分析，结果总体效应OR=1.60,95%CI：0.94～2.72；总体效应检验Z=1.72，P=0.08；表明合并结果没有统计学差异。考虑中国人群分布范围较广，可能存在遗传异质性，故以黄河为界，将纳入文献按地区分为北方与南方分亚组进行分析。    涉及北方人群的文献5篇［2,5,8,9,12］，同质性分析：χ2=0.94,P=0.92,提示各研究存在高度同质性；固定效应模型统计分析，总体效应OR=2.66,95%CI：1.67～4.24；总体效应检验Z=4.12，P＜0.0001；表明合并结果差异具有统计学意义。且I2=0%，提示基本不存在研究组间的差异。涉及南方人群的文献6篇［3,4,6,7，10,11］，同质性分析：χ2=23.98,P=0.0002；提示各研究存在异质性。随机效应模型统计分析，总体效应OR=1.26,95%CI：0.90～1.77；总体效应检验Z=1.33，P=0.18,差异无统计学意义。    2.4  发表性偏倚评价  对中国总体人群、北方人群及南方人群做漏斗图分析,目测基本对称,因纳入研究数目较少,图形不呈倒漏斗分布。用Nfs评估发表偏倚，分别计算P=0.05和P=0.01时三者失安全数，分别为总体人群Nfs 0.05=145.99,Nfs 0.01=66.77;北方人群Nfs 0.05=31.02,Nfs 0.01=12.84;南方人群Nfs 0.05=36.61，Nfs 0.01=15.11,均提示发表偏倚较小。    2.5  敏感性分析  在总体人群研究组中，11篇文献OR值0.30～6.43,剔出1篇95%CI（0.30～137.85）较大的文献［12］，重现合并分析，得到χ2=30.67,P=0.0003,提示各文献仍有异质性，使用随机效应模型得OR=1.54, 95%CI：0.90～2.65,与未剔除时结果相似。在北方人群亚组分析中，剔除2篇研究人群是中青年的文献［9,12］后合并分析，得χ2=0.94,P=0.78,提示各文献同质性好，OR=2.50, 95%CI：1.50～4.18,与未剔除时结果基本相同。以上分析提示研究稳定性好，结果可靠。3  讨  论    XbaI酶切位点多态性,是由于ApoB基因cDNA第7673位核苷酸C→T突变（7673 C→T）,使第2488位密码子序列改变(ACC→ACT),从而产生一个XbaI内切酶识别位点,即X+等位基因,但由于ACC和ACT均编码苏氨酸,所以这个点突变属中性突变,无酶切位点的称Ｘ-等位基因。正常人群以Ｘ-等位基因为主。X+等位基因可能通过使LDL与受体的结合力及受体介导的LDL降解率降低有关［13］。有研究［14］表明XbaI酶切位点多态性是一个遗传标志，与附近基因或其他影响胆固醇水平的DNA功能区域发生连锁失衡。一项来自丹麦（包括一项历时22年队列研究与两项病例对照研究，纳入健康人群9185人，缺血性心脏病2157例，缺血性脑血管病378例）的综合研究［13］表明：人群中ApoB基因XbaI酶切位点多态性与总胆固醇，LDL和ApoB水平中度增加有关，但不增加缺血性脑血管病与缺血性心脏病发病率。    本研究发现,中国不同地区人群XbaI酶切位点多态性与脑梗死发病风险存在较大差异，所纳入11篇文献有较大异质性（P=0.0005），可能与地区人群构成有一定的关系，各地报道正常人群X+基因频率有一定的差异，合并分析没有发现统计学意义（OR=1.60,95%CI:0.94～2.72），无明显临床意义，进行敏感性分析后也未得出不同结论。在对北方人群亚组的分析发现，各文献同质性较好（P=0.94）。Ｘ-X+基因型（北方人群组无X+X+基因型）与脑梗死风险呈正相关，北方人群Ｘ-X+基因型个体发生脑梗死危险性是Ｘ-Ｘ-基因型个体的2.66倍（OR=2.66,95%CI：1.67～4.24），具有统计学意义。利用敏感性分析剔除2篇以中青年为主要研究对象的文献，结果未发现差异（OR=2.50, 95%CI：1.50～4.18）；提示该结论适用所有年龄段研究人群。合并统计南方人群组未发现统计学意义，Ｘ-X+/X+X+基因型是否增加南方人群脑梗死发病风险尚不确定。    中国脑血管疾病的地理分布表明，除西藏自治区外，呈现北高南低、东高西低的发病趋势，人群基因的多态性可能是其原因之一。Meta分析是一种观察性研究,因此质控标准不可能完全统一,本研究所做的敏感性分析与Nfs计算就是发现并尽量避免研究过程中的偏倚。更具有重要的意义的是在进一步扩大样本量的高质量队列和病例对照研究的基础上进行累积Meta分析及对ApoB基因多位点的联合研究。【参考文献】  ［1］Higgins JPT, Green S, ed.Cochrane Reviewerss Handbook 4.2.6［M］.Chichester, UK: John Wiley & Sons Ltd,2006.  ［2］郭阳，郭津津，王富伟，等.缺血性脑血管病患者载脂蛋白B基因多态性与血脂关系探讨［J］.中风与神经疾病杂志，1996，13：339.  ［3］柴耀辉，秦震，秦芝九，等.载脂蛋白B基因XbaI多态性与动脉粥样硬化性脑梗塞的关系［J］.临床神经病学杂志，1996，9：70.  ［4］张镛,秦震.动脉硬化性血栓性脑梗塞与载脂蛋白B基因XbaI、EcoRI多态的相关性研究［J］.临床神经病学杂志,1998,11：3.  ［5］赵若智，刘春杰，沈斌章.动脉粥样硬化性脑梗死患者载脂蛋白B基因Xba I酶切多态性的研究［J］.北京医科大学学报，1997，29：522.  ［6］姚娟，王颖，王震震,等.动脉粥样硬化性脑梗死患者载脂蛋白B基因多态性与血脂水平分析［J］.中国神经免疫学与神经病学杂志，1999，6：20.  ［7］高瞻，沈靖，谈永飞，等.ApoB基因XbaI多态性与脑梗塞关系的病例对照研究［J］.江苏卫生保健，2001，3：8.  ［8］Wang L, Gu Y, Wu G.The relation between polymorphisms of apolipoprotein B gene and atherosclerotic cerebral infarction［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi，1999，79:603.  ［9］郭阳,韩顺昌,郭津津,等.载脂蛋白B基因多态性与中青年人动脉粥样硬化性脑梗死关系的研究［J］.中风与神经疾病杂志，2002，9：107.  ［10］苏上贵.广西地区壮、汉两族人群载脂蛋白B基因多态性研究［D］.广西医科大学硕士研究生论文，2002.  ［11］张乐,杨期东,曾艺,等.载脂蛋白基因C7673T突变与有家族聚集现象脑梗死的关系［J］.中华神经科杂志，2005，38：784.  ［12］王景华,宁宪嘉,涂军.中青年脑梗死患者载脂蛋白B基因多态性研究［J］.中国煤炭工业医学杂志,2005,8：938.  ［13］Benn M, Nordestgaard BG, Jensen JS,et al. 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