短暂性脑缺血发作患者血小板活化程度及其临床意义
发表时间：2009-11-26 浏览次数：710次
短暂性脑缺血发作患者血小板活化程度及其临床意义作者：江卫 作者单位：214002无锡市第二人民医院神经内科 【摘要】 目的 探讨短暂性脑缺血发作（TIA）患者血小板活化程度及其临床意义。方法 应用彩色多普勒超声仪检测72例TIA患者颈动脉粥样硬化程度；应用流式细胞仪检测血小板活化因子PAC-1与P-选择素（CD62P）水平，并与正常对照组（30例）进行比较。结果 TIA组PAC-1和CD62P水平显著高于正常对照组（均Ｐ<0.01）；TIA组中，颈动脉粥样硬化程度越高，PAC-1和CD62P水平越高；颈动脉斑块亚组 PAC-1和CD62P水平明显高于颈动脉IMT增厚亚组（均Ｐ<0.05）；不稳定斑块亚组显著高于稳定斑块亚组（均Ｐ<0.01）。结论 TIA患者血小板活化程度明显增高。检测TIA患者血小板活化程度有助于判断颈动脉粥样硬化的程度。 【关键词】 短暂性脑缺血发作 颈动脉粥样硬化 血小板活化 Levels and its clinical significance of activated platelets in patients with transient ischemic attack JIANG Wei, SUN Yang, KONG Yue-nan, et al. Department of Neurology, Wuxi Second People’s Hospital, Wuxi 214002,China Abstract：Objective To investigate the levels and its clinical significance of activated platelets in patients with transient ischemic attack（TIA）. Methods Color Doppler flow imaging was used to measure the degree of carotid atherosclerosis in 72 patients with TIA（TIA group）. Flow cytometry （FCM） was used to measure the levels of PAC-1 and CD62P. They were compared with 30 healthy controls（NC guoup）. Results The levels of PAC-1 and CD62P in TIA group were significantly higher than those in NC group （allP<0.01）. In TIA group,the degree of carotid atherosclerosis was higher, levels of PAC-1 and CD62P were higher. The levels of PAC-1 and CD62P in TIA with carotid plaque subgroup were significantly higher than those in TIA with thickened IMT of carotid subgroup（allP<0.05）. Also, the levels of PAC-1 and CD62P in TIA with unstable carotid plaque subgroup were significantly higher than those in TIA with stable carotid plaque subgroup（allP<0.01）. Conclusions The levels of activated platelets are significantly higher in patients with TIA. Examination of the levels of activated plateletsis can helpful to distinguish the degree of carotid atherosclerosis. Key words：transient ischemic attack； carotid atherosclerosis； activated platelets 颈动脉粥样硬化是导致缺血性脑血管病的重要原因之一，近年研究［1］发现，血小板活化在颈动脉粥样硬化形成中起重要作用。本研究通过对72例短暂性脑缺血发作（TIA）患者颈动脉彩色多普勒超声及血小板活化程度检测，探讨血小板活化程度与颈动脉粥样硬化性TIA的关系。1 对象与方法 1.1 对象 （1）TIA组：2001年3月～2005年5月我院神经内科确诊的TIA患者72例，男44例，女28例；年龄50～70岁，平均62岁；病程2 h～6个月。符合全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准，并经头颅CT/MRI检查以除外脑梗死。（2）正常对照组：系本院同期健康体检者30人，男16人，女14人；年龄49～69岁，平均60岁。入组者均无感染、组织损伤，无心、肺、肝、肾、血液等重要系统疾病，2周内均未用过影响血小板的药物。 1.2 方法 1.2.1 颈动脉彩色多普勒超声检测 采用HDI-5000彩色多普勒超声仪对TIA组患者进行颈动脉内-中膜厚度（IMT）、颈动脉斑块及性质的检测。线阵实时成像探头，频率为5～12 MHz，测定部位在颈动脉球部近端1 cm总动脉段处，颈动脉分叉部以及球部远端1 cm颈内动脉后壁处，左右各3点，各测3次，取平均值。局部IMT＞1.2 mm或血管腔血流缺损面积≥10 mm2定义为颈动脉粥样斑块；强回声为硬斑，低回声为软斑。内膜粗糙及厚度在1.0～1.2 mm之间定义为IMT增厚。据此，将TIA组分为正常亚组、IMT增厚亚组、硬斑（稳定斑块）亚组及软斑（不稳定斑块）亚组。 1.2.2 血小板活化程度测定 采用流式细胞术检测血小板活化因子PAC-1与P-选择素（CD62P）水平，抽取入组者静脉血5 ml，取中间段1 ml与抗凝剂（9∶1）轻混，立即用荧光素标记的抗血小板单克隆免疫荧光染色：在阴性对照管中加Mouse IgM-FITC，Mouse IgG1-PE，CD61-Percp各20 μl；再分别加入5 μl全血。置室温避光反应15 min，立即加入1.0 ml 1％多聚甲醛（2～6℃）混匀，4℃冰箱保存，12 h内在流式细胞仪上，以CD61-Percp和测散射光散点图设血小板门，同型对照设定阴性群体，测定血小板膜PAC-1、CD62P表达阳性百分率。 1.2.3 统计学方法 采用SPSS 10.0软件进行统计学处理，数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验。2 结 果 2.1 各组彩色多普勒超声检测结果的比较 TIA组患者中，颈动脉正常30例，内膜增厚15例，检出软斑11例，硬斑16例。 2.2 各组血小板活化程度的比较 见表1。TIA组PAC-1和CD62P显著高于正常对照组（均Ｐ<0.01）。TIA组中，PAC-1和CD62P水平由高到低依次为软斑亚组、硬斑亚组、IMT增厚亚组、颈动脉正常亚组，各组间差异具有统计学意义（均Ｐ<0.05）。表1 各组血小板活化程度的比较（略）注：与正常对照组比较*Ｐ<0.01；与颈动脉正常亚组比较△Ｐ<0.05；与IMT增厚亚组比较▲Ｐ<0.05；与硬斑亚组比较☆Ｐ<0.053 讨 论 研究［2, 3］表明TIA患者存在血小板活化异常。血小板膜糖蛋白Ⅱb-Ⅲa（GPⅡb-Ⅲa）是血小板含量最多的膜蛋白，PAC-1是GPⅡb-Ⅲa活化后暴露的纤维蛋白原结合位点单抗，即活化的GPⅡb-Ⅲa抗体，为血小板活化的早期标志物。研究［4, 5］证明CD62P是血小板颗粒中的一种重要膜糖蛋白，血小板活化时，其颗粒膜迅速与质膜融合而在血小板表面表达CD62P，并持续至少1 h，因此，CD62P可作为血小板活化的后期标志物。 本研究选择PAC-1和CD62P作为检测血小板活化程度的标志物，结果显示TIA组PAC-1与CD62P水平较正常对照组明显升高；在TIA组中，随颈动脉内膜病变程度加重，PAC-1和CD62P水平也依次升高。表明TIA患者存在血小板活化，而且随颈动脉损害程度的加重而增高。可能原因是颈动脉粥样硬化后血管内皮损伤，暴露出胶原、凝血酶等物质，促使血小板形态变化，伪足形成，Ca2+流动和细胞内磷酸化反应；另一方面，粥样斑块又可造成局部血管狭窄，血液流速流态发生变化，此时血流受到的剪切力要远高于生理水平，高剪切力作用又使血小板膜表面PAC21、CD62P表达显著增加。本研究还发现，血小板活化程度还与粥样斑块性质有关，TIA不稳定斑块组与稳定斑块组相比，PAC-1 和CD62P表达明显升高，原因可能是由于不稳定斑块易脱落、出血，血小板易黏附于不稳定斑块表面，进一步促进血小板的活化与PAC-1和CD62P的释放。 总之，TIA患者血小板活化程度明显提高，并随着患者颈动脉粥样硬化程度加重而增加。测定TIA 患者血小板活化程度有助于对颈动脉粥样硬化程度的判断，为给予早期干预、减少TIA 反复发作、预防脑梗死有重要意义。【参考文献】 ［1］Sachais RS. Platelet-endothelial interactions in atherosclerosis［J］. Curr Atheroscler Rep, 2001, 3: 412. ［2］张青山, 龙建军, 蔚志刚. 短暂性脑缺血发作患者血栓前状态的观察［J］.临床神经病学杂志, 2002, 15:272. ［3］陈葆国, 陈秋月, 孟哲峰，等. 颈动脉粥样硬化性脑梗死引起血小板活化的机制［J］.中华老年医学杂志, 2005, 24:448. ［4］贾伟, 陈光辉. 颈动脉粥样硬化易损性斑块的检测方法［J］.国际脑血管病杂志, 2006, 14:132. ［5］马莉, 汪中强, 吴蔚. 流式细胞术检测脑梗死患者的血小板活化［J］.血栓与止血学, 2005,11:211. ［6］陈秋月, 丁美萍. 脑梗死患者血小板活化程度与颈动脉粥样硬化的关系［J］.中国老年医学杂志, 2004, 24:27.
