马齿苋乙酸乙酯提取物对小鼠镇痛、免疫功能和急性脑缺血作用的研究
发表时间：2014-04-08 浏览次数：962次
马齿苋(Portulaca oleracea L.)为马齿苋科马齿苋属植物，又名马齿草、五行草、长命菜、九头狮子草、酸味菜、蚂蚁菜等，我国南北各地均产，广布全世界温带和热带地区，为药食两用植物[1]。《中华人民共和国药典》收载了马齿苋的干燥地上部分作为药用，具有清热解毒、凉血止血的功能，用于热毒血痢、痈肿疔疮、湿疹、丹毒、蛇虫叮咬、便血、痔血和崩漏下血。现代药理研究表明，马齿苋具有抗菌、降血脂、抗衰老、松弛肌肉、抗炎及促进伤口愈合等作用[2];马齿苋性寒，味酸，有清热解毒、凉血之功效，用于热毒疮疡，用鲜品加芒硝适量捣碎外敷，用于外伤后局部红、肿、热、痛，疗效甚佳[3]。近年来，对马齿苋各种药理作用研究比较广泛，但是未有针对其乙酸乙酯提取物镇痛方面的研究。本实验研究是通过给予小白鼠不同剂量的马齿苋提取物马齿苋乙酸乙酯来验证其镇痛作用，为深入开发马齿苋的药理价值提供有效的理论依据。
1 资料与方法
1.1实验药品与器材
1.1.1药品与试剂：马齿苋乙酸乙酯提取物，冰醋酸(0.6%)。
1.1.2仪器：鼠笼，注射器，自制铁槽，计时器，恒温浴箱。
1.1.3动物：昆明种小白鼠。
1.2统计学处理：实验数据采用t检验进行处理。
2结果
2.1马齿苋乙酸乙酯提取物的制备：称取马齿苋干草1 300 g粉碎，用75%乙醇在水浴中回流提取2次，各用10倍量与8倍量乙醇提取2 h，1 h，过滤，合并滤液，回收乙醇，浓缩呈浸膏，水悬浮以乙酸乙酯萃取，干燥备用。
2.2马齿苋乙酸乙酯提取物对小鼠镇痛作用的研究
2.2.1扭体法：取48只小白鼠，随机分成四组：对照组，药物大剂量组(600 mg/kg)，药物中剂量组(300 mg/kg)，药物小剂量组(150 mg/kg)。连续给予小白鼠灌胃6 d，于末次给药1h后腹腔注射0.6%冰醋酸(0.1 ml/10 g)，观察扭体的潜伏期及15 min内的扭体次数，计算抑痛率[4]。计算公式为：抑痛率(%)=(空白组扭体次数-药物组扭体次数)/空白组扭体次数×100%。见表1。由表1可见，与空白组比较，马齿苋大、中、小剂量组扭体的次数差异有统计学意义(P<0.01)，抑痛率分别为44.4%、34.9%、31.2%。
2.2.2热板法：将自制铁槽放入恒温浴箱中，待水浴箱内温度稳定在55℃时，将小白鼠放入铁槽内，筛选出第1次舔后足时间在5～30 s的48只小白鼠，随机分成四组：对照组，药物大剂量组(600 mg/kg)，药物中剂量组(300 mg/kg)，药物小剂量组(150 mg/kg)。连续灌胃6 d，于末次给药1 h后将小白鼠放入铁槽内(温度同上)，观察小白鼠舔后足的潜伏期及1 min内舔后足的次数，间隔5 min后再测量1次，两次结果取平均值，计算抑痛率。计算公式为：抑痛率(%)=(空白组舔足次数-药物组舔足次数)/药物组舔足次数×100%。见表2。由表2可见，与空白组比较，马齿苋大、中、小剂量组添足的潜伏期和次数差异有统计学意义(P<0.01)，抑痛率分别为40.4%、41.8%、50.2%。
2.3马齿苋乙酸乙酯提取物对小白鼠免疫作用的研究：称重法：取48只小白鼠，随机分成四组：对照组，药物大剂量组(600 mg/kg)，药物中剂量组(300 mg/kg)，药物小剂量组(150 mg/kg)。连续灌胃6 d，于末次给药1 h后断头处死，立即取出，称量脾脏、胸腺湿重，计算其指数。计算公式为：脾(胸腺)指数=脾(胸腺)重量(g)/体重(g)。见表3。由表3可见，与空白组比较，马齿苋大、中、小剂量组脾脏指数和胸腺指数差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4急性缺血缺氧实验马齿苋乙酸乙酯提取物对小白鼠急性缺血缺氧作用的研究：断头法：取48只小白鼠，随机分成四组：对照组，药物大剂量组(600 mg/kg)，药物中剂量组(300mg/kg)，药物小剂量组(150 mg/kg)。连续灌胃6 d，于末次给药1 h后用剪刀在小白鼠双耳连线处快速果断的断头，记录小白鼠断头开始到喘气终止时间内的喘气次数，作为诊断血流后脑组织的耐缺氧程度。见表4。由表4可见，与空白组比较，马齿苋大、中、小剂量组喘气次数差异无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论
本实验采用扭体法、热板法研究了马齿苋乙酸乙酯提取物的镇痛效果。将0.6%醋酸直接腹腔注射，刺激腹膜引起持久的疼痛反应，致使小白鼠出现“扭体反应”。镇痛药物可以抑制动物的“扭体反应”。物理法，即将某些物理刺激，如热、电、机械等，动物表现出舔足蹦跳等反应[5]。本实验将小白鼠置于55℃恒温热板上，使小白鼠出现舔足反应，镇痛药物可抑制动物的舔足反应。上述实验表明，马齿苋乙酸乙酯提取物能延长腹腔注射冰醋酸和热板所致疼痛而产生扭体和添足的次数，可见，马齿苋乙酸乙酯提取物有一定的镇痛效果。免疫实验采用称重法测量免疫脏器系数来观察免疫效果，上述实验表明，马齿苋乙酸乙酯提取物没有明显免疫功能作用，急性脑缺血实验采用断头法观察小白鼠断头开始到喘气终止时间内的喘气次数，上述实验表明，马齿苋乙酸乙酯提取物没有明显的急性缺血缺氧保护作用，这些结果可能和灌胃天数太少有关，并不能完全说明它没有免疫功能和急性脑缺血的保护作用。
4 参考文献
[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会.《中华本草》[M].上海：上海科学技术出版社，1999：392.
[2]向兰，邢东明，王伟，等.马齿苋的化学成分研究进展[J].亚太传统医药，2006，7：64.
[3]孙春红，玉焕真.芒硝加马齿苋外敷治疗局部红肿热痛[J].中国民间疗法，2005，10(13)：25.
[4]李迎军，朴惠顺.小叶锦鸡儿醋酸乙酯提取物的镇痛作用研究[J].时珍国医国药，2006，11(17)，2008.
[5]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，2006：352.
