氟比洛芬酯对大鼠急性痛的超前镇痛效果

卢国林, 林财珠, 林献忠    福建医科大学附属第一医院麻醉科,福州 350005

 【摘要】  目的 观察氟比洛芬酯预处理对大鼠急性痛抗伤害效应,探讨氟比洛芬酯超前镇痛效应。 方法 大鼠按Brennan法制成切口疼痛模型,分为氟比洛芬酯组(P组)、对照组(C组),P组于造模前15 min经尾静脉给药,C组于造模后即刻经尾静脉给药。2组分别再分为4组(各8只):即生理盐水组、氟比洛芬酯1,3,9 mg/kg组;分别于术后2,24,48 h进行累积疼痛评分和热板实验,观察注药后反应。 结果 在动物模型建立前或后给药,氟比洛芬酯均能产生量效相关的抗伤害效应,ED50分别为3.85,4.20 mg/kg;95%的置信区间为(3.42,4.28)与(3.96,4.44)。P组3,9 mg/kg的抗伤害效应评分及热痛阈在建立模型后2,24,48 h时低于C组(P<0.05)。 结论 氟比洛芬酯能产生量效相关抗伤害效应,具有超前镇痛作用。

【关键词】  氟比洛芬酯; 超前镇痛; 急性痛

　　The Preemptive Analgesic Effect of Flurbiprofen Axetil on Acute Pain in Rats

　　LU Guolin, LIN Caizhu, LIN Xianzhong

　　Department of Anesthesiology, The Affiliated First Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350005, China

    ABSTRACT:  Objective  To observe the preemptive analgesic effect of pretreatment of flurbiprofen axetil on incisional pain in rats.  Methods  Animal model was made according to the Brennan method.  Experimental rats were randomly divided into two main groups: P and C, each containing four subgroups, which were saline, flurbiprofen axetil 1, 3, 9 mg/kg, respectively.  Group P received saline or flurbiprofen axetil before incision and Group C 15 minutes after incision through tail vein.  Calculative pain scorce test and hot plate test were performed at 2, 24 and 48 h.  Results  For both group P and C, flurbiprofen axetil(1, 3, 9 mg/kg) produced significant dose-dependent antinociception.  The value of ED50was 3.85 and 4.20 mg/kg respectively.  Confident intervals were (3.42, 4.28) mg/kg and (3.96, 4.44) mg/kg, respectively.  Antinociception score and plantar withdrawl latency of group P were less than group C at 2, 24 and 48 h(P<0.05).  Conclusion  The administration of flurbiprofen axetilthrough tail vein can produce dose-dependent antinociception.  Flurbiprofen axetil has showed preemptive analgesic effect.

    KEY WORDS:  flurbiprofen axetil; preemptive analgesia; acute pain

    近年来,对超前镇痛的研究和临床应用正方兴未艾［1-2］。氟比洛芬酯是一种以脂微球为载体可供注射的非甾体类抗炎药物(NSAID),因其具有靶向性和减少了NSAID不良反应而备受临床青睐。笔者通过观察氟比洛芬酯预处理对急性痛大鼠累积疼痛评分和热痛阈值变化来评价其抗伤害效应,探讨氟比洛芬酯超前镇痛的可能性及有效性,旨在为临床应用氟比洛芬酯超前镇痛提供实验依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  模型制备与分组

　　1.1.1  模型制备

　　64只雄性(200~250 g)SD大鼠［上海斯莱克动物有限责任公司,动物合格证号为SCSK(沪)2003-0003］,1.4%安氟醚麻醉后,按Brennan法［3］从足底近端0.5 cm处向趾部作长约1 cm切口,切开皮肤后挑起足底肌肉并纵向切割,保持肌肉起止点及附着点完整无损。切口按压止血,5-0丝线缝合皮肤,即制成切口疼痛模型。

      1.1.2  分组

　　实验分为氟比洛芬酯组(P组)和对照组(C组)。P组于造模前15 min经尾静脉给药;C组于造模后即刻给药。2组各分为4组(n=8):生理盐水组(P0,C0),氟比洛芬酯1 mg/kg组(P1,C1）、3 mg/kg组(P3,C3)、9 mg/kg组(P9,C9)。

　　1.2  行为学测验

　　1.2.1  累积疼痛评分法(calculative pain score,CPS)  　　大鼠清醒后,将其放入自制30 cm×30 cm×30 cm的玻璃箱中,箱中置一与地面成45 °的镜子,观察大鼠双侧后爪着地与负重情况。采用累积疼痛评分法评定疼痛程度［3］,每隔5 min观察大鼠最常采取的姿势1 min,共观察1 h。分别于术后2,24,48 h进行累积疼痛评分,各时间点分值计为0~24分。

　　1.2.2  热板实验

　　大号不锈钢杯置于(55±0.5)℃超级恒温浴槽(HSS-1B数字式,成都仪器厂)内,大鼠放入杯中,从右后肢接触到出现踮脚、回缩、舔足、挣扎任一动作的时间计为后肢回缩时间(paw withdrawal latency,PWL)(秒表计时),作为后肢痛阈指标。测量3遍,每次时间<40 s,间隔10 min,取其平均值。每只大鼠在用药前1天测定热痛阈潜伏期作为基础热痛阈值,分别于术后2,24,48 h进行,测定热痛阈变化。

　　1.3  统计学处理

　　数据以x±s表示,采用SPSS 13.0统计软件包进行统计学处理,采用重复测量的方差分析,两组比较采用SNK-q检验,采用最小二乘线性回归方法计算ED50和95%的置信区间。P<0.05为差别有统计学意义。

　　2  结  果

　　2.1  尾静脉注射氟比洛芬酯后各组大鼠均无死亡、过敏、镇静等表现。

　　2.2  在模型建立前后经尾静脉注射氟比洛芬酯3,9 mg/kg均产生显著的剂量依赖性镇痛效应(图1)。取每只大鼠产生最强抗伤害效应相对应时间点的剂量与热痛阈值作回归方程,可求出在疼痛模型建立前、后尾静脉注射氟比洛芬酯的抗伤害作用,ED50分别为3.85,4.20 mg/kg;95%置信区间为（3.42,4.28）与（3.96,4.44）。 

　　2.3  在建立模型前、后经尾静脉注射氟比洛芬酯3及9 mg/kg的抗伤害效应评分及热痛阈在建立模型后2,24和48 h时差异显著(P<0.05,图2),表明该剂量的氟比洛芬酯具有明显的超前镇痛效应。

　　3  讨  论

　　3.1  术后疼痛与中枢敏化

　　本实验使用由Brennan等于1996年创立的大鼠切口致痛模型。该动物模型特点:对正常的无害性刺激反应增强(异常性疼痛),对热和机械刺激产生痛觉过敏、包括原发性痛觉过敏和继发性痛觉过敏),在24~48 h达峰,7 d后消退［3］。这些特点与临床术后疼痛极为相似。

    当组织损伤和炎症时,炎症细胞和神经末梢释放一系列的炎症介质［包括PGE2,组胺,5-羟色胺,缓激肽,ATP,H+,神经生长因子(NGF),脂质］形成“炎症汤(inflammatory soup)”,引起伤害性感受器兴奋和超敏感化,将伤害性信号传递到中枢,介导中枢敏化的产生,表现为痛觉过敏和异常性疼痛［5］。中枢敏化一旦发生,治疗困难,而防止中枢敏化的发生比发生后治疗更容易成功［4］。基于这一认识,一种术后疼痛治疗新策略——超前镇痛应运而生。超前镇痛是指为防止或减轻术后疼痛而进行的预先干预如静脉给予镇痛药、椎管内麻醉、局部神经阻滞等,其依据是阻止中枢敏化的形成。

    临床上通常采用视觉模拟评分(VAS)来评价疼痛,这存在患者选择性偏倚。本实验综合应用累积疼痛评分法和热板试验测量痛阈法,评价在建模前、后经尾静脉注射氟比洛芬酯1,3,及9 mg/kg抗伤害效应,,故该模型符合超前镇痛实验设计,且结果较客观、可靠。

　　3.2  氟比洛芬酯超前镇痛效应及其可能的抗伤害机制

　　关于NSAID抗伤害效应具体的作用机制仍未明确,但有研究表明环氧化物酶（COX）在疼痛敏化中扮演重要角色［6］。氟比洛芬酯是一种非选择性COX抑制剂,通过外周和中枢抑制COX,减少前列腺素（PG）的产生,从而达到镇痛的目的,这可能是其主要抗伤害机制［7］。氟比洛芬酯具有以下优点:靶向性,使包裹药物在炎症部位聚集,从而增强药效;控制包裹药物的释放,使药效持续时间更长;易于跨越细胞膜,从而促进包裹药物的吸收,进一步缩短起效时间。本实验研究结果显示,疼痛模型建立前氟比洛芬酯抗伤害作用的ED50(3.85 mg/kg)小于疼痛模型建立后的ED50(4.20 mg/kg),表明要达到相同的镇痛效能,在伤害性刺激前经尾静脉注射氟比洛芬酯的剂量低于在伤害性刺激后的剂量,提示氟比洛芬酯具有超前镇痛效应。

【参考文献】  　［1］Kim H Y,Yoon H S.The effects of ketamine pre-emptive analgesia on postoperative pain in patients undergoing a hysterectomy［J］. Taehan Kanho Hakhoe Chi, 2006,36(1):114-126.

　　［2］Karaman S,Gunusen I,Uyar M,et al. The effect of pre-emptive Lornoxiam and ketoprofen application on the morphine consumption of post-opertive patient-controlled analgesia［J］. J Int Med Res, 2006,34(2):168-175.

　　［3］Brennan T J,Vandermeulen E P,Gebhart G F. Characterization of a rat model of incisional pain［J］. Pain, 1996,64(3):493-501.

　　［4］庄心良,曾因明,陈伯銮. 现代麻醉学［M］. 北京:人民卫生出版社, 2003:2564.

　　［5］Julius D,Basbaum A I. Molecular mechanisms of nociception［J］. Nature, 2001,413(6852):203-210.

　　［6］Ghilardi J R,Svensson C I,Rogers S D,et al. Constitutive spinal cyclooxygenase-2 participates in the initiation of tissue injury-induced hyperalgesia［J］. J Neurosci, 2004,24(11):2727-2732.

　　［7］Ochroch E A,Mardini I A,Gottschalk A. What is the role of NSAID in pre-emptive analgesia［J］. Drugs, 2003,63(24):2709-2723.