染色法与悬浮法检查滴虫、霉菌及淋菌结果比较
发表时间：2009-06-30 浏览次数：660次
作者：蒋德安，潘忠 作者单位：宁夏吴忠市人民医院，吴忠 751100
【摘要】 为比较染色法与悬浮法对滴虫、霉菌及淋菌阳性检出率，将300例阴道分泌物标本制成涂片，分别用瑞氏和革兰染色找滴虫、霉菌及淋菌，同时观察其他细菌和异常细胞，并与悬浮法相比较。结果，染色法检查滴虫和霉菌的阳性检出率分别是42%和37.9%，明显高于悬浮法查滴虫和霉菌的28.9%和23.8%阳性率（P＜0.05和P＜0.005）。悬浮法检测滴虫和霉菌的的漏诊率是14.4%和16.1% 。染色法阳性检出率高漏诊率低，建议推广使用。
【关键词】 染色法 悬浮法 滴虫 霉菌
近年来，由于性病蔓延，白带涂片检查已成为妇科病人的常规检查项目，使用染色法建立室内质量控制，提高检出阳性率，很有必要。目前我区部分县级医院和乡镇医院还在使用悬浮法检查阴道分泌物标本，漏诊率高［1］。我科对300例阴道分泌物标本进行快速瑞氏和革兰染色检查，认为方法简单，阳性率高，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本院2006年6月至2007年6月收治妇科住院和门诊病人300例，年龄18～60岁，平均26岁。
1.2 试剂和仪器 快速瑞氏染色液，革兰染色液，pH6.4～6.8磷酸盐缓冲液（均由四川迈克科技公司提供），镜检使用日本生产OLYMPUS光学显微镜。
1.3 方法
将标本在玻片上轻轻向一个方向滚动，且勿来回摩擦，制成2cm×4cm的涂片［2］。火焰固定后用蜡笔一分为二，一半用瑞氏染色，一半用革兰染色，待干燥后低倍镜观察瑞氏染片，见梨形，圆形，椭圆形或不规则形，胞浆均匀淡蓝色，核小椭圆紫色者为滴虫，必要时在高倍镜下仔细观察。在革兰染色片中，用油镜查淋菌、霉菌，并观察其他的细菌及线索细胞和清洁度［3］。每份标本同时进行悬浮法检查滴虫和霉菌。两种检测方法的阳性捡出率见表1。1.4统计学方法 实验数据均用％表示，资料比较用χ2检验。
2 结果
2.1 300份标本两种方法检查结果 （表1、表2）表1 染色法与悬浮法滴虫、霉菌检出率比较（略）表2 悬浮法查滴虫、霉菌漏诊率（略）
染色法对滴虫和霉菌的检出率均高于悬浮法（P＜0.01 或0.05）。
清洁度Ⅰ～Ⅱ度65例未找见病原体，Ⅲ～Ⅳ度235例，其中淋菌阳性18例，均见于清洁度Ⅵ度标本，占7.6%；染色法阳性而悬浮法阴性滴虫37例，霉菌37例，悬浮法阳性而染色法阴性滴虫3例（染色法复查结果2阴1阳），霉菌2例（染色法复查2例均阳性），2例查见可疑癌细胞，建议到上级医院做病理切片确诊为宫颈腺癌。
2.2 40份染色片染色法复查结果，阴性标本15份全部符合，25份阳性标本，初检报告滴虫、霉菌各漏诊1例，漏检率均为4%，10份淋菌标本经复检报告全部符合。
3 讨论
滴虫、霉菌及细菌性阴道子宫炎是妇科常见病、多发病，临床表现无明显区别，为提高阴道涂片滴虫、霉菌和淋菌的捡出率，有必要建立快速、简便和捡出率高的检测方法。本文结果显示染色法检测滴虫、霉菌的阳性检出率比悬浮法高。
国内某些医院实验室使用荧光染色及培养法检测滴虫、霉菌，用PCR检测淋病［4］，检出阳性率高，但这些方法所使用的仪器、试剂昂贵，实验条件要求高，操作繁琐，时间长，限制了这些方法的推广使用。有些实验室仍以革兰染色查淋菌，悬浮法查滴虫、霉菌，但悬浮法检查时由于受标本采集部位不当、病原菌数量少，标本取出时间过久或涂量少、不规范，冬春季节温度低，工作人员镜下检查不耐心又无质控监督等人为因素的影响而致滴虫、霉菌漏诊率较高。
本文结果说明，使用快速瑞氏染色查滴虫、霉菌，革兰染色查淋菌有如下优点：一张涂片多项目检查，成本低，易推广普及；冬春季节查滴虫时不受保温措施限制;涂片送到实验室即可染色镜检，随到随查方便病人；标本经火焰固定染色后，病原体基本无活，降低了感染机会，保护了操作者;瑞氏染色同时还观察有无恶性细胞，发现恶性细胞提示患者早诊断早治疗；革兰染色可查吸附有小杜菌的上皮细胞（clue细胞）即诊断为细菌性阴道炎，并判断阴道清洁度;染色片可短期存放，以便复查，并能考核实验室工作人员和建立室内质控，较悬浮法相比大大提高阳性检出率和准确性，值得基层医院推广使用。
【参考文献】 ［1］邓光贵.用吖啶橙染色法快速检查阴道分泌物涂片［J］.中华医学检验杂志,1992,15(4):225.
［2］韩景银，魏丽华，王玉英.直接涂片法查淋球菌技术的实验室控制［J］.现代检验医学杂志，2002，17（1）：63.
［3］叶应妩.全国临床检验操作规程［M］. 第3版.南京:东南大学出版社, 2006:324.
［4］罗明.PCR检测法与革兰氏染色镜检法同时检测慢性淋病结果的比较［J］.现代诊断与治疗，2004,15(5):287.
