血管内皮素-1和血管内皮细胞生长因子在胃肠道间质瘤中的表达及相关性研究
发表时间：2014-09-15 浏览次数：745次
内皮素一1(endothelin-1,ET-1)可通过多重途径刺激诱导血管生成，在肿瘤的生长和分化中起着重要作用。血管内皮细胞生长因子(VEGF)是体内一种非常重要的促血管生成因子，与肿瘤新生血管的形成和血道转移的关系已得到广泛证实。为探讨两者在胃肠间质瘤(GISTs)中的表达及其与预后的关系，笔者采用免疫组化方法对86例胃肠道间质瘤(GISTs)标本进行研究。1资料与方法1.1一般资料收集中南大学湘雅医院、湖南省邵阳市中医医院2003年1月至2006年12月行手术治疗并经病理组织学及免疫组化确诊86例胃肠道间质瘤组织标本，男43例，女43例，年龄18一77(52.513.2)岁，所有患者术前均未接受化疗、放疗、免疫治疗及其它针对肿瘤的治疗。按2001年美国国立卫生研究院(NationalInstituteofHealth,NIH)诊断标准，根据肿瘤大小、每50高倍镜视野下核分裂计数将86例确诊病例分为极低危3例、低危12例、中危46例和高危25例。1.2材料和试剂鼠抗人ET-1单克隆抗体(BM1540)、兔抗人VEGF单克隆抗体(BA0407)、即用型SABC免疫组化染色试剂盒SA1020一小鼠/兔IgG,DAB显色剂AR1022均购自武汉博士德生物工程有限公司。1.3实验方法所有标本均用10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，4},m连续切片4张。2张分别用于ET-1,VEGF免疫组织化学检测,1张作HE染色，1张用PBS代替一抗作阴性对照。采用微波修复S-P染色技术，测定ET-1,VEGF在GISTs三种类型中的表达情况，免疫组织化学染色按试剂盒提供的方法进行操作(一抗稀释度:两者均为抗体1:150)。取含有上述抗原的结肠癌组织切片作为阳性对照。1.4结果判定ET-1,VEGF的阳性表达均位于细胞浆内，以胞浆显示棕黄色一棕褐色颗粒为阳性表现。每张切片观测5个高倍(x100)视野内无阳性细胞为阴性(一)，阳性细胞毛50%者为阳性(十)，阳性细胞>50%为强阳性(2+)。见图1一201.5统计学处理实验结果数据采用SPSS16.0统计软件分析，计数资料采用zX检验，应用Spearman等级相关分析处理ET-1和VEGF之间的相关性。Kaplan-Meier法计算患者生存率，生存分析比较采用Log-rank检验。2结果2.1ET-1,VEGF的表达情况ET-1强阳性29例，阳性28例，阴性29例;VEGF强阳性36例，阳性26例，阴性24例，ET-1,VEGF的阳性表达率分别为66.28%}s7186),72.09%(62186)，两者的表达呈正相关(r,=0.347,P<0.O1)。见表to2.2ET-1,VEGF的表达与GISTs临床病理特征的关系GISTs中ET-1,VEGF的表达与患者性别、年龄和原发部位均无明显相关性(P>O.OS};ET-1,VEGF的阳性表达率均随恶性程度增加而升高，极低和低危险组、中度危险组和高危险组间比较差异具有统计学意义(厂=8.171,14.710,P<o.os>;有浸润转移组与无浸润转移组ET-1,VEGF阳性表达率差异有统计学意义(16.230,P<0.05);肿瘤直径分为<2cm,2一5cm和>5cm三组，ET-1,VEGF阳性表达率均随直径增大依次升高。直径<2cm和>5cm组间比较(才=10.354,11.116,P<0.05)，差异均有统计学意义;细胞核分裂数分为<5/50HP和)5/50HP两组，ET-1,VEGF阳性表达率后者均明显高于前者(X二17.317，18.886，P<0.05)见表2。2.3生存分析79例患者获得随访资料，随访率为91.86%，中位随访时间为40.2个月((2一66个月)。应用Kahlan-Nleie:法计算3,5年生存率分别为82.30%和68.56%。ET-1和VEGF阳J比组GISTs患者的5年生存率分别为45.24%和42.47%，阴性组,、患者的5年生存率分别为65.11%和63.38%,ET-1和}}EGF阳性组5年生存率均低于相应阴性组(6.124,6.287,P<0.OS)。3讨论深人研究恶性肿瘤细胞生长、浸润转移的分子机制，是目前的热点研究之一。与恶性肿瘤的生长、浸润和转移密切相关，尤其与血管生成关系密切的ET-1,VEGF在GIST、中的研究具有重要意义。本研究结果显示:ET-1和VEGE在GISTs中的阳性表达率分别为66.280l0(57/86)和72.09%(62/86)，两者的表达呈正相关性(/二0.347,P<0.01),其与胃肠道间质瘤的组织学分级、肿瘤直径、浸润转移私}核分裂数有关(P<0.05),两者的高表达可能促进肿瘤生长、细胞分裂。ET-I的表达和VEGE的表达有联合倾向，低氧条件下，ET-1可增强VEGF的产量，该机制促进肿瘤的血管发生〔)ET-I,VEt}Iv一方面促进GIST、细胞的生长、分化，恶性程度增加，另一方面，促进了新生血管的形成，为肿瘤的生长浸润提供了足够的养分.同时增加血管的通透性，进而促进了(C1I}T、的血道转移。1jT-和Y}}7F阳性组5年生存率均低于相应阴性组二因此，笔者认为:检测GIST、中ET-1,VEGF的水平有利于评价病情，指导治疗及评估预后;两者可能作为GIST、的肿瘤标志物应用目前手术切除是治疗(GISTs的主要手段，靶向治疗药物格列卫虽然有一定效果，但其价格较贵2GIS'"I'、肿瘤组织血运丰富，又以血_行转移为主，目近来有研究发现(GIS'h*中存在血管生成拟态y11-I3‘，在GIST。组织中VEGF有高水平表达，并与组织中微血‘管密度(l}'IV'D)及新生血管的数量密切书}关J以FT-I和VFGF为靶点，抑制其表达，从而抑制肿瘤血管形成，阻断肿瘤的营养来源和转移通道，达到治疗肿瘤的目的，可成为GIST治疗的新策略5近来已经成功建立(:-lut转基因动物模型协，抗血管生成在GIST、肿瘤细胞的动物种植肿瘤模型中的研究值得进一步探讨。参考文献 Fletcher CD,Berman JJ,Corless C. Diagnosis of gastrointestinal stromal tumors:A consensus approach[J].Human Pathology,2002,(05):459-465.陆昌友,黄君,但小红. 胃肠道间质瘤24例临床分析[J].中国医师杂志,2006,(12):1638-1639.doi:10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2006.12.021.郄硕,张诗武,张丹芳. 胃肠道间质瘤中血管生成拟态初步研究[J].中国肿瘤临床,2007,(02):68-71.doi:10.3969/j.issn.1000-8179.2007.02.003.纪长伟,邹继华. Ki-67、VEGF在胃肠间质瘤中表达及与MVD的相关性[J].现代肿瘤医学,2007,(12):1803-1805.doi:10.3969/j.issn.1672-4992.2007.12.038.艾晓辉,廖国庆,刘合利. 缺氧诱导因子-1α和内皮素-1在胃肠道间质瘤中的表达及意义[J].中华实验外科杂志,2009,(07):890-891.doi:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2009.07.026.于红宾. 胃肠道间质瘤预后因素的临床病理研究[D].太原:山西医科大学,2006.
