肿瘤相关巨噬细胞与胃癌血管生成及转移关系

作者:蔡方,赵勇,赵文丽

作者单位：广东医学院附属惠州中心人民医院，广东 惠州 561001          【摘要】  　　［目的］ 探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)浸润与胃癌血管生成及转移的关系。［方法］ 采用免疫组织化学法检测51例胃癌组织微血管密度（MVD）、TAMs和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。［结果］ TAMs的表达在高分化癌组织中明显低于中-低分化组（P<0.05）；淋巴结转移组高于无淋巴结转移组（P<0.05）；TAMs与VEGF及MVD均呈正相关（r=0.74，P<0.01；r=0.58，P<0.05）。［结论］ 胃癌组织中TAMs在血管生成及肿瘤转移中可能起重要作用。

   【关键词】  胃肿瘤　血管内皮生长因子　巨噬细胞　微血管密度

　　肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages，TAMs）位于肿瘤间质，研究表明TAMs在肿瘤生长、浸润和转移中起着十分重要的作用[1]。本文检测了胃癌组织中微血管密度（microvessl density，MVD），TAMs和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达，以探讨胃癌组织血管生成与TAMs的关系，及其与胃癌转移的相关性。

    1 材料与方法

    1.1 材 料

    选择2004年6月~2005年8月惠州中心医院外科手术切除的胃癌标本51例，其中男性38例，女性13例，年龄34~87岁（中位年龄59岁）。病理分级：高分化腺癌9例，中分化腺癌8例，低分化腺癌34例；有淋巴结转移者36例，无淋巴结转移者15例；TNM分期：Ⅰ期9例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例，Ⅳ期16例。所有病例术前未经任何针对肿瘤的治疗。

    1.2 方 法

    采用免疫组织化学染色SP法。一抗分别为鼠抗人CD68单克隆抗体（1：100）标记巨噬细胞，兔抗人VEGF多克隆抗体（1：100）标记VEGF，兔抗人CD34多克隆抗体（1：100）标记微血管。所有试剂购于北京中山生物技术有限公司，按照说明书进行操作，用已知CD68阳性淋巴组织切片和VEGF、CD34阳性乳腺癌组织切片作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。

    1.3 结果判定

    CD68、VEGF：以胞膜和胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞。40倍光镜下确定3个着色密集的区域（热点），200倍光镜下分别计数，取其均数[2]。CD34阳性血管为棕黄色，位于肿瘤间质，先于100倍光镜下确定3个血管密集区，然后在200倍光镜下计数血管数，取其平均数作为微血管密度[3]。

    1.4 统计学处理

    数据以x±s表示，SPSS10.0软件上进行数据的方差分析，P<0.05具有统计学意义。

    2 结 果

    2.1 TAMs、VEGF表达及MVD与胃癌临床病理

    特征的关系

    由表1可见，TAMs的表达在高分化癌组织中明显低于中分化组和低分化组（P<0.05）；淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，差异有显著性（P<0.05）；不同分期之间比较差异有显著性（P<0.05）。VEGF在不同分化癌组织中表达无差异（P>0.05）；不同分期之间差异有显著性（P<0.05）；淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，差异有极显著性（P<0.01）。MVD在高分化癌组织中明显低于中-低分化组，差异有显著性（P<0.05）；不同分期之间差异有显著性（P<0.05）；淋巴结转移组MVD高于无淋巴结转移组，差异有极显著性（P<0.01）。

    2.2 TAMs与MVD及VEGF表达的关系

    胃癌组织中TAMs、VEGF及MVD最密集的三个区域（热点区域）平均值，比较其相关性，TAMs与VEGF及MVD均呈正相关（r=0.74，P<0.01；r=0.58，P<0.05）。

    3 讨 论

    实体肿瘤的发生、发展、浸润、转移和复发依赖于血管生成，同时血管生成又为肿瘤细胞提供营养物质运输的通路和扩散途经。肿瘤的血管生成是一个由诸多因子参与的复杂过程，这些因子除由肿瘤细胞本身分泌血管生成因子的调控以外，目前研究表明在多种实体肿瘤中侵入肿瘤组织的巨噬细胞即所谓肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）亦参与其中。

    VEGF为一分子量34~42kDa的糖蛋白，通过作用于血管内皮细胞上的酪氨酸激酶受体刺激血管内皮细胞增殖、促进肿瘤血管生成，进而促进肿瘤的增殖、侵袭及转移[4]。我们的研究结果显示，在有淋巴结转移胃癌组织中VEGF表达及MVD明显高于无转移组；肿瘤分化越差，VEGF的表达越强；VEGF的表达越强，MVD越多，两者呈正相关。这与文献报道一致[5，6]。可以认为VEGF在肿瘤组织中的表达水平与胃癌的恶性度、转移关系密切。

    大部分实体肿瘤被间质所包围，包括间隙的结缔组织、血管、成纤维细胞、巨噬细胞等，巨噬细胞是肿瘤间质细胞中数量最多的一种。肿瘤内TAMs的含量高并不说明肿瘤患者的预后良好，相反，TAMs含量高低与肿瘤转移能力的强弱有关。本研究表明胃癌组织中TAMs的数量与VEGF的表达及MVD有正相关关系，即有较多血管生成的肿瘤内常有较多的巨噬细胞侵入，VEGF明显增高，TAMs是VEGF的主要来源[4，7]。TAMs还与淋巴结转移密切相关，有淋巴结转移的癌肿常有较多的巨噬细胞侵入，并与癌周的血管生成有关。TAMs作为机体免疫反应效应细胞，可分泌多种细胞因子和降解细胞外基质的酶及调节酶，影响肿瘤组织局部的微环境，在肿瘤血管生成和肿瘤转移这个多步骤、十分复杂的过程中起重要作用。TAMs在胃癌转移这个复杂的过程中，可能通过促进肿瘤的血管生成来促进肿瘤的转移。TAMs有望成为胃癌转移从而影响预后的判断指标，同时也可能成为胃癌治疗的新靶点[8]。

【参考文献】  [1] 石小燕, 马丁. 淋巴管生成与肿瘤转移研究进展[J]. 国外医学肿瘤学分册, 2004,31(9):667-670.

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