乳腺癌组织中C

　　作者：封敏， 黄艳春， 赵锋　(新疆医科大学附属肿瘤医院检验科, 病理科, 新疆乌鲁木齐830011)

　　摘要: 目的：探讨癌基因蛋白CerbB2与乳腺癌组织学分型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的关系。方法：对179例乳腺癌患者采用免疫组化法检测CerbB2蛋白在乳腺癌组织中的表达。结果：179例乳腺癌组织中CerbB2表达的阳性率为29.6%, 在导管原位癌中CerbB2表达率为52.9%,其它病理类型中CerbB2表达均较低(<45%),导管原位癌CerbB2蛋白表达率与浸润性导管癌、浸润性小叶癌比较差异有统计学意义，CerbB2蛋白阳性表达组患者的淋巴结转移率明显高于阴性组(P<0.05), 并与雌、孕激素受体呈负相关关系。结论： CerbB2表达与乳腺癌组织学分型、淋巴结转移有关，可作为乳腺癌预后判断的指标之一。

　　关键词 乳腺癌; CerbB2; ER; PR ;淋巴结转移

　　Study of CerbB2 gene expression in breast cancer tissue

　　FENG Min, HUANG Yanchun, ZHAO Feng

　　(Department of Clinical Laboratory, Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)

　　Abstract: Objective: To investigate the expression and the signification of CerbB2 gene in breast cancer and its relationship with histological type, lymph node metastasis, ER and PR. Methods: The expression of CerbB2 in 179 breast cancer was studied with immunohistochemical method. Results: The positive rate of CerbB2 was 29.6% in 179 breast cancer, the positive rates of CerbB2 in ductal carcinoma in situ were 52.9%, it was low in others histological type (<45%). There was significant difference between them. Significant relationship was also found between positive expression of CerbB2gene and lymph node metastasis (P<0.05), and it was in negative correlation with ER and PR. Conclusion: CerbB2 maybe an important role in the process of carcinogenesis in the breast, and be used as a useful marker for the early diagnosis and distant metastasis in breast cancer.

　　Key words: breast cancer; CerbB2; ER; PR; lymph node metastasis

　　乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，有关乳腺癌的生物学特性至今仍未完全清楚,其组织学类型、分级、受体状况等并不能完全评价乳腺癌的预后及指导治疗。随着分子生物学的发展，人们发现CerbB2蛋白的表达在乳腺癌预后中有重要意义[1]。为了解CerbB2蛋白表达在乳腺癌发病及生物学行为方面的作用，本实验采用免疫组化SP法对179例乳腺癌组织进行CerbB2癌基因蛋白的检测，并结合组织学分型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)状况，旨在探讨CerbB2癌基因蛋白与乳腺癌的关系，为研究乳腺癌的发生机理提供理论依据。

　　1材料与方法

　　1.1材料与试剂选取2005年4~10月间在本院行乳腺癌手术切除179例标本，术前未经化疗、放疗，均有完整原癌病灶、淋巴结、癌旁组织及ER、PR检测结果。患者均为女性，年龄 29 ~68岁，平均48.75岁。其中浸润性导管癌 133 例，浸润性小叶癌 16例，导管原位癌17例，其他13例(髓样癌 6例、黏液癌2例、大汗腺癌5例)。试剂 ： CerbB2免疫组化染色试剂盒由北京中杉生物技术有限公司提供。

　　1.2方法组织均用10%甲醛固定,石蜡包埋,4 μm连续切片。CerbB2的测定采用SP免疫组织化学法,操作步骤按试剂盒说明进行。其中用0.01%PBS代替一抗作为阴性对照,已知阳性表达的乳腺癌组织切片做阳性对照。

　　1.3CerbB2的结果判定CerbB2定位于肿瘤细胞膜,细胞膜呈透明或无色者为阴性细胞。癌细胞膜呈棕黄色为阳性细胞。细胞无阳性反映者为阴性(-),≤10%的细胞阳性为(+),11%~50%的细胞阳性为(++),51%~75%阳性细胞为(+++),>75%为(++++)。染色强度：无色为阴性(-),淡黄色为(+),棕黄色为(++),棕褐色为(+++),染色强度×阳性细胞数>3为真阳性。

　　1.4统计学处理采用 SPSS13.0 统计软件包进行统计学分析,采用χ2检验及相关性分析，检验水准α=0.05。

　　2结果

　　2.1CerbB2表达与乳腺癌组织学分型的关系179例乳腺癌组织中CerbB2阳性53例，阳性表达率29.6%(53/179)。CerbB2表达导管原位癌与浸润性导管癌比较差异有统计学意义(χ2=4.2，P<0.05 );导管原位癌与浸润性小叶癌比较有统计学意义 (χ2=4.2，P<0.05 );浸润性导管癌与浸润性小叶癌比较无统计学意义(P>0.05 );在导管原位癌中CerbB2表达率为52.9%,其它病理类型中CerbB2表达均较低(<45%)，见表1。

　　表1CerbB2表达与乳腺癌组织学分型的关系(略)

　　2.2CerbB2表达与淋巴结转移的关系179例乳腺癌中有淋巴结转移77例,其中30例CerbB2阳性,占38.96%(30/77),而无淋巴结转移的102例中有23例阳性, 占22.55%(23/102),差异有统计学意义(χ2=5.67，P<0.05)，见表2。

　　表2cerbB2表达与淋巴结转移的关系

　　2.3CerbB2表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR )的关系97例ER受体阳性患者中18例CerbB2表达阳性，阳性表达率为18.56%;82例ER受体阴性患者中35例CerbB2表达阳性，阳性表达率为42.68%,差异有统计学意义(χ2=12.4, P<0.05)。经相关性分析ER受体与CerbB2表达呈负相关(r=-0.18)。79例PR受体阳性患者中12例CerbB2表达阳性，阳性表达率为15.19%,100例PR受体阴性患者中41例CerbB2表达阳性, 阳性表达率为41.0%,差异有统计学意义(χ2=14.1, P<0.05)。经相关性分析PR受体与CerbB2表达呈负相关(r=-0.28)，见表3 。

　　表3CerbB2表达与ER、PR的关系

　　3讨论

　　癌基因CerbB2称为人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2),又称HER2或neu，位于17号染色体q21区带上，与表皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor，EGFR)基因具有同源性，编码具有酪氨酸活性的细胞膜糖蛋白(分子量185 000)被称为CerbB2蛋白或P185蛋白[2]，是HER家族的第二个成员。CerbB2原癌基因的表达产物参与了正常乳腺组织生长与发育的调节，但在病理状态下, CerbB2受体表达增多，细胞内酪氨酸激酶的蛋白活化增强，酪氨酸激酶自身磷酸化,信息通道活性提高，信息经细胞膜和细胞间质传至细胞核，激活基因。同时，CerbB2的异二聚体大大减少了细胞内吞过程中的降解，促进CerbB2循环回到细胞膜，在细胞膜过度表达，加速了细胞的增殖，细胞过度增殖导致肿瘤形成和增长加快[3]。

　　目前认为CerbB2基因是一种与乳腺癌发生发展密切相关的原癌基因，参与肿瘤细胞的生长调控、增殖与分化，其产物过度表达常提示恶性程度高，临床预后差[4]。但由于研究方法的不同和阳性判定标准的不一,使乳腺癌组织中CerbB2扩增及过度表达的发生率有很大差别。本组179例乳腺癌组织中CerbB2表达的阳性率为29.6%,与国外报道的15%～30%一致,略低于国内报道的33.3%～61.9%[5]。其原因除与病例选择、抗体选择、结果判断标准和组织处理有关外，是否与民族和地理环境有关，有待于进一步研究。

　　CerbB2基因的过度表达是否与乳腺癌的组织学类型及恶性生物学行为有关，文献报道尚不完全一致，陆肖玮等[6]研究认为CerbB2的过度表达可能是乳腺癌发生的晚期事件，而罗玉莲[7]等的研究认为CerbB2基因在早期阶段的乳腺癌中阳性率偏高，吴强等[8] 的研究结果显示正常上皮不表达CerbB2，增生上皮的CerbB2表达率为15%，导管原位癌的表达率上升为70%，而浸润性导管癌表达率仅为43%，其中有淋巴结转移者阳性率64%，认为CerbB2过表达是乳腺癌发生过程中的早期事件，同时对乳腺癌的转移也起一定作用。本研究结果显示CerbB2在导管原位癌的表达与浸润性导管癌、浸润性小叶癌比较差异有统计学意义, 浸润性导管癌与浸润性小叶癌比较差异无统计学意义，在导管原位癌CerbB2表达率为52.9%，其它病理类型中CerbB2表达均较低(<45%)。提示CerbB2蛋白可能对乳腺癌的早期诊断具有临床意义，但是否由于样本中导管原位癌病理类型数偏少对实验数据的影响,也有待扩大样本含量进一步研究。

　　多数作者认为，CerbB2基因阳性表达者复发率、转移率高，无瘤生存期及总生存期短，CerbB2过表达在乳腺癌淋巴结转移中起到一定作用，提示CerbB2基因可作为判断乳腺癌预后的一个重要指标 [9]。本研究中CerbB2阳性表达患者的淋巴结转移率明显高于阴性表达者(P<0.05), 乳腺癌组织中CerbB2的阳性表达与淋巴结转移有高度相关性,与吴强等[8]的报道一致。结果表明CerbB2的表达与淋巴结的转移状况密切相关, 对判断是否有淋巴结的转移有参考价值，CerbB2在乳腺癌的发生、发展过程中起一定的作用,为判断乳腺癌侵袭力的指标之一。

　　CerbB2的表达与雌、孕激素受体之间的关系目前也存在争议，郭洪斌等[10]报道CerbB2蛋白过表达与ER无关。而本研究结果显示CerbB2的表达与雌、孕激素受体之间存在负相关性，这与高锐等[11]的报道结果一致。表明CerbB2表达与ER、PR表达之间可能有某种影响，从而影响乳腺癌的生物学行为，并且提示对CerbB2阳性伴有ER、PR阴性的患者，不仅要加强综合治疗力度，还要注意复发转移的监测。

　　现代观点认为癌变过程的多阶段中涉及多种基因的协同作用，乳腺癌中除CerbB2外尚有其它癌基因的激活和抗癌基因的失活。综合分析这些基因的作用及相互影响，对阐明癌变机理，进而在分子遗传水平进行预防，无疑将有着重大意义。

　　参考文献:

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　　[2]陈天星,李琳,陈建伟. 原发性乳腺癌中CerbB2、nm23的表达与淋巴结转移相关性研究[J].国外医学临床生物化学与检验学分册,2004,25(5):399403.

　　[3]Arteaga CI, Moulder SL, Yakes FM. HER2(cerbB2) tyrosine kinase inhibitors in the treatment of breast cancer[J]. Semin Oncol,2002,29(11):4.

　　[4]Aziz SA, Pervez S, Khan S, et al. Significance of immunohistochemical cerbB2 productlo calisation pattern for prognosis in human breast cancer[J]. Pathol Oncol Res,2001,7(3):190196.

　　[5]叶锋,黄冰,黄书信,等.乳腺肿瘤中CerbB2癌基因产物的表达及意义[J].中华病理学杂志,1993,22(2):104.

　　[6]陆肖玮,马荣庚,朱云龙,等.癌基因CerbB2、抗癌基因P53在乳腺癌中的表达及其意义[J]. 江苏临床医学杂志,2000，4(1):8485.

　　[7]罗玉莲,吴强.P185 和P16在乳腺癌中的表达及其意义[J]. 安徽医科大学学报,2001,36(1):2425.

　　[8]吴强，张瑰红，杨枫.乳腺癌及良性乳腺组织P185和P16蛋白表达的免疫组织化学研究[J].生物学杂志，2002，18(2)：1820.

　　[9]刘祖宏,谢丽霞,许文兵. 乳腺癌中CerbB2蛋白的表达与淋巴结转移的关系[J]. 实用诊断与治疗杂志, 2004，18(3):215216.

　　[10]郭洪斌，张培，王斌,等. P16蛋白、CerbB2在乳腺癌中表达的意义[J]. 中国老年学杂志, 2005，6(25):718719.

　　[11]高锐,杨德君,任宪卫,等. 乳腺癌雌孕激素受体和CerbB2癌基因表达的临床意义[J]. 中国实验诊断学, 2004,8(6):618619.