胸苷激酶1检测对乳腺癌辅助诊断及化疗效果评估的意义

　　作者：关弘　　作者单位：深圳大学第一附属医院病理科，广东 深圳

　　【摘要】目的：探讨血清及细胞质中胸苷激酶1检测对乳腺癌辅助诊断及术后化疗效果评估的意义。方法：2010年1月～2010年12月收治的乳腺癌住院患者共72例，作为实验组，选取42例良性病变患者为对照组。两组同时进行组织TK1(免疫组织化学方法)和血清S-TK1(化学发光法)检测分析。结果：与对照组相比，实验组血清中TK1水平明显升高(P<0.05)。与对照组相比，实验组细胞质中TK1阳性率明显升高(P<0.05)。结论：连续跟踪血清及细胞质中TKI水平变化有利于对乳腺癌治疗效果的辅助诊断，其反映细胞增殖情况并与病灶大小有一定相关性，对监视乳腺癌疗效具有临床意义。

　　【关键词】 血清胸苷激酶 1;乳腺癌;化疗;预后

　　[ABSTRACT] Objective： To explore the predictive value of serum/cytoplasmic thymidine kinase 1 (TK1) level in the diagnosis and prognosis of breast cancer. Methods： Seventy-two patients with breast cancer that were admitted to our hospital during September 2010～March 2011 were enrolled into the experiment group， and 42 patients with benign diseases as the control group. Serum/cytoplasmic thymidine kinase 1 levels were detected with TK1 (immunohistochemistry) and serum S-TK1 (chemiluminescence immunoassay， CIA) methods. Results： Both serum and cytoplasmic TK1 levels were significantly elevated comparing with the control group (P<0.05). Conclusions： Serum/cytosolic TKI levels is related to the cellular proliferation status and the size of tumor in patients with breast cancer indicating consecutive detection of TKI levels can help to evaluate the therapeutic effects of anticancer therapy in breast cancer patients.

　　[KEY WORDS] Serum thymidine kinase 1; Breast cancer; Chemotherapy; Prognosis

　　乳腺癌的发病率在我国女性恶性肿瘤中位居第2位且呈逐年上升趋势，而乳腺癌患者的预后与许多因素尤其是细胞增殖指数有关[1-3]。胸苷激酶是(thymidine kinase， TK)参与DNA 前体物质合成的关键酶之一，是一种在细胞质中表达并与细胞增殖密切相关的激酶。其分为2种：细胞质胸苷激酶(TK1)与细胞的生长、分裂密切相关，线粒体胸苷激酶(TK2)与细胞分裂周期无关。由于TK1与细胞周期调控密切相关，其已被公认为是一种反映细胞增殖的标志物[2]。为此，回顾性分析深圳大学第一附属医院病理科2010年1月～2010年12月收治的72例乳腺癌患者的临床资料、血清及细胞质中TK1水平检测结果及部分患者化疗后效果，并与42例良性病变者对比，现报道如下。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料

　　选取2010年9月～2011年3月收治的乳腺癌住院患者共72例作为实验组(患者均符合《乳腺癌诊断及疗效标准》)[3]，年龄30～75岁，平均48岁。健康对照组(本人及家庭人员均无任何传染性疾病、炎症疾病、肿瘤疾病和其他疾病征兆)42例，年龄29～77 岁，平均年龄50岁。对照组与实验组的一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。按肿瘤大小分期，侵及胸壁或皮肤不计肿瘤大小为 T4期， ≥5 cm为T3期，2～5 cm为T2期，≤2 cm为T1期，将实验组分为2组，分别为T1期40例，T2～T4期32例。

　　1.2　方法

　　血清S-TK1均采用ECL印迹免疫—增强发光法检测[4]， TK1检测灵敏度为0.2 pmol/L 。血清TKI>2 pmol/L，风险值为2 pmol/L的检测者评估为细胞增殖风险人群[5]。细胞质TK1采用免疫组化(SP组织化学染色法)：由华瑞同康生物技术有限公司提供TK1(SKM 01,1∶800)抗体。常规细胞染色计数方法：计数 100个细胞计算阳性染色百分率，1表示有 0%～5%细胞染色，2表示有6%～25% 细胞染色，3表示有 26%～50%细胞染色，4表示有超过50%细胞染色[6]。

　　1.3　统计学处理

　　所有数据均采用SPSS13.0统计软件包进行处理，P<0.05为差异有统计学意义。对计量资料以均数加减标准差(x-±s)表示，计数资料以率或比表示，比较均采用χ2检验。

　　2　结果

　　关弘.胸苷激酶1检测对乳腺癌辅助诊断及化疗效果评估的意义　与对照组相比，实验组血清中TK1水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。细胞质中TK1阳性率实验组为1期24例，2期37例，3期7例，4期4例，阳性率为66.70%;对照组为1期34倒，2期8例，阳性率为19.05%，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。血清S-TK1(化学发光法)检测两组TK1水平比较

　　3　讨论

　　乳腺癌是危害人类健康的恶性肿瘤之一，近年来我国女性乳腺癌的发病率达到10%～15%，并且有逐年升高的趋势，其已成为导致女性死亡继宫颈癌之后的第二大恶性肿瘤[7]。乳腺癌的发生经历了从正常组织逐步到原位癌再发展为浸润性癌的过程，上皮细胞的增殖活性逐步升高。T K检测适用于临床肿瘤的治疗效果监视和预后评估以及对健康人群早期发生恶性肿瘤风险的预测和筛查。目前较常用的检测细胞增殖指数指标还有反映细胞增殖的细胞周期相关蛋白质如PCNA和Ki 67。Ki 67 在增殖细胞的G0期不表达而在G1、 S、G2、M 期表达，细胞有丝分裂后该蛋白含量迅速减少，但经本组统计发现，其仅在肿瘤病理分级 G3及肿瘤临床分期3 期时有统计学意义， 因此，TK1显示出比 Ki 67 更好的灵敏度。PCNA在恶性组织中的阳性表达率要低于TK1， PCNA的阳性表达率与乳腺癌的分级分期都无显著相关性，而TK1则有此相关性。

　　此外，本研究建议按照以下标准对临床疗效结果进行评估：(1)长期(手术围产期2～5个月)维持在低水平( 0.5 pmol/L );(2)术后3～6个月，血清及细胞质中TK1水平接近健康人平均水平(0.5 pmol/L) ;(3)术后1个月血清及细胞质中TK1水平下降为术前水平的50%;符合以上 3个标准，则可认为治疗有效[8]。TK1表达能检测肿瘤细胞增殖速度，是评估肿瘤生长恶性程度的重要参数，本研究发现，评估时应注意以下两点：(1)评估治疗效果需要看每个患者治疗前和治疗后( 一般是治疗后至少1～3个月) 血清及细胞质中TK1的动态变化，并与健康正常人的血清及细胞质中TK1水平进行比较。本组研究中，实验组与对照组相比，血清中TK1水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比，细胞质中TK1阳性率明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。据相关文献报道[9]：

　　TK活性与肿瘤大小、病理分级相关;高TK1活性者无病生存时间、局部复发时间及远处转移时间均比 TK 1活性低者要短。如果治疗效果好，患者的血清及细胞质中TK1水平会降低到正常人水平。因此，该方法用于血清及细胞质中TK 1的检测有较好地特异性与敏感性，可作为乳腺癌的术后疗效观察和预后判断、辅助诊断的方法之一。据国内外最新文献报道[10]，95%的健康人在1 pmol/L以下，本研究与文献报道相符。(2)对乳腺癌患者最有效的是行个性化治疗效果评估，根据患者的肿瘤表现特异性，对于不同的肿瘤大小、类型和临床分期的进程，血清及细胞质中TK1水平是不同的。

　　总之，TK1作为一种新的细胞增殖指数标志物，且与乳腺肿瘤的病理分级、临床分期密切相关，连续跟踪血清及细胞质中TKI水平变化有利于对乳腺癌治疗效果的辅助诊断，对临床监视乳腺癌疗效具有临床意义。

　　【参考文献】

　　1　Lin X， Zhang S， Lei DS， et al. Serum thymidine kinase 1is a prognostic and monitoring factor in patients with non-small cell lung cancer[J]. Oncol Rep， 2005， 13(1)：145-149.

　　2　张国庆， 焦顺昌， 魏秀芳. 血清胸苷激酶1 在中老年人肿瘤免疫监测中的作用[J]. 现在肿瘤医学， 2008,16(5)：831-832.

　　3　陈曲波， 刘瑞萍， 黄惠，等. 血清胸苷激酶1检测及其在肿瘤治疗监测和预后中的作用[J]. 广东医学， 2008,29(6)：1022-1024.

　　4　吴怡春， 徐笑红， 张毅敏，等. 血清TK1水平变化在恶性肿瘤诊疗转归过程的监测作用[J]. 中国卫生检验杂志， 2008,18(6)：1122-1123.

　　5　徐卫， 申秋丹， 于慧，等. 慢性淋巴细胞白血病患者脂蛋白酯酶和血清胸苷激酶水平及其与其他预后因素的相关性研究[J]. 中华血液学杂， 2009,30(1)：8-12.

　　6　Brockenbrough J S， Rasey J S， Grierson J R， et al. A simp le quanti2tative assay for the activity of thymidine kinase 1 in solid tumors[J]. NuclMed Biol， 2007， 34 (6) ： 619-623.

　　7　张毅敏，单绿虎，徐笑红. 细胞质胸苷激酶1在106 例肿瘤病人的表达[J]. 中国肿瘤， 2008， 3 (17) ： 247-248.

　　8　樊祥山，孟凡青，章宜芬，等. 骨肉瘤组织芯片的制作及其免疫组织化学应用[J]. 东南大学学报(医学版) ， 2006， 25 ( 2) ： 104-107.

　　9　周强，樊祥山，余惠萍，等. 大样本组织芯片构建方法的技术改进[J]. 中国血液流变学杂志， 2007， 17 (4) ： 660-661.

　　10　Mao Y，Wu J， Skog S， et al. Exp ression of cell p roliferating genes inpatientswith non2small cell lung cancer by immunohistochemistryand cDNA p rofiling[J]. Oncol Rep， 2005， 13 (5) ： 837-846.