联合检测AFP、SCCA与APT在原发性肝细胞癌诊断中的价值

　　作者：邱春红　　作者单位：广西玉林市第二人民医院

　　【摘要】 目的探讨甲胎蛋白(AFP)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、异常凝血酶原(APT)检测对原发性肝细胞肝癌(PHCC)诊断的临床意义。方法 应用电化学发光法(ECLIA)检测AFP、SCCA、APT肝细胞癌37例，肝硬化40例，正常组41例。结果 PHCC患者血清AFP[(485.31±425.43) μg/L]、SCCA [(175.37±57.45) μg/L]、APT[(987.58±456.23) μg/L]的水平明显高于正常对照组AFP[(13.87±6.75) μg/L]、SCCA[(87.70±41.21) μg/L]、APT[(14.28±5.27) μg/L]及肝硬化组AFP[(80.62±34.98) μg/L]、SCCA[(105.89±37.97) μg/L]、APT[(250.56±102.54) μg/L](P均<0.01)，AFP、 SCCA、APT联合检测，敏感度可高达91.87%，特异度为85.00%。结论 AFP、SCCA、APT联合检测可提高原发性肝细胞癌的阳性诊断率，对诊断原发性肝细胞癌具有重要临床意义。

　　【关键词】 肝细胞癌诊断;甲胎蛋白;鳞状细胞癌抗原;异常凝血酶原

　　原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma，PHCC)是一种常见的恶性肿瘤，在我国其病死率占全部恶性肿瘤病死率的18.8%[1]。PHCC发病隐匿、进展快、恶性程度高，因此早期诊断与早治疗对这种疾病的处理和预后有重要意义，但是通常由于诊断较晚而预后很差，甚至失去任何有效的治疗机会。目前，PHCC常用的血清学标志物主要是甲胎蛋白(alphafetoprotein，AFP)，但单用AFP对于肝癌筛查不是很理想，容易漏检及出现假阳性。近年来，出现了很多新的PHCC肿瘤标志物，对PHCC的诊断、治疗及预后有了很大的帮助。而肿瘤标志物(tumor marker)是指体内肿瘤存在并反映其一定的生物学特性的生化物质。甲胎蛋白(AFP)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、异常凝血酶原(APT)，是常用的几项肿瘤标志物。本文旨在探讨其在PHCC诊断中的价值。

　　资料和方法

　　1.研究对象 2006～2009年间在我院行手术切除的37例肝癌患者，所有患者均符合中国抗癌协会肝癌专业委员会(2001年9月)关于修订“原发性肝癌的临床诊断与分期标准”原发性肝癌诊断标准，并均经手术后病理检查证实为原发性肝细胞癌，其中男20例，女17例，年龄最大82岁，最小28岁，平均年龄55岁;肝硬化组：40例肝硬化患者，根据临床表现、生化、超声、CT、MRI等综合检查确诊，并排除肝占位性病变，其中男22例，女18例，年龄最大79岁，最小35岁，平均年龄56岁。正常对照组：41例均为在我院体检的健康志愿者，其中男21例，女20例，年龄最大80岁，最小27岁，平均年龄56岁。

　　2.检测方法 AFP、SCCA采用电化学发光法进行检测，试剂盒由罗氏公司提供，仪器为瑞士ROCHE1010全自动生化免疫分析仪，上机全自动操作。异常凝血酶原(APT)采用电化学发光免疫仪为Pieolumi8220。PIVKAⅡ电化学发光免疫测定的原理为：以抗PIVKAⅡ单抗连接于固相载体，以发光物质钌(ruthenium，Ru)标记另一抗PIVKAⅡ抗体，当加入样品后，PIVKAⅡ首先与固相载体上的抗体结合，经洗涤后。与Ru标记的抗体结合，由电极激发发光，根据发光量对PIVKAⅡ进行定量。以AFP>300 μg/L、SCCA>120 μg/L、APT>900 μg/L为阳性标准。

　　3.统计学处理 使用SPSS 10.0统计软件进行分析处理;计量数据均采用均数±标准差(-±s)表示，同一指标两样本均数间比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性差异。结 果 各项血清肿瘤标志物检测结果，肝细胞癌组SCCA、AFP、APT检测值明显高于肝硬化组及正常组(P<0.01)。血清中AFP、SCCA、APT三项联合检测的敏感度为91.87%、特异度为85.00%，高于AFP、SCCA单项检测的敏感度和特异度，差异有显著性(P<0.05)，与APT单项检测的敏感度和特异度相当(P>0.05)。三组血清肿瘤标志物检测值比注：与正常组比较，※P<0.01，☆P<0.05;与肝硬化组比较，△P<0.01 血清AFP、SCCA、APT检测对肝细胞癌诊断的敏感度和特异度

　　讨 论

　　原发性肝细胞癌在发生发展过程中有多种癌基因被激活，使肿瘤细胞不断通过内在性自分泌调节，血清肿瘤标志物是肿瘤细胞分泌入血的并能反映肿瘤存在的肿瘤特异性或相关性抗原。目前能够检测到的肿瘤标志物只有相关抗原，与血清中的其他成分有所不同，不仅在某些肿瘤人群中有所表达，在某些非肿瘤病人中也有一定的阳性率，这就使得单项指标检测易于出现肿瘤的诊断偏差[2]。多项肿瘤标志物联合检测可以通过指标间的互补和制约作用，使肿瘤的检出率及准确性提高。何成彦等[3]认为，血清肿瘤标志物的升高可先于影像学改变和临床症状数月，这使得肿瘤标志物的检测成为目前肿瘤诊断、鉴别诊断的理想指标。

　　在原发性肝癌的诊断中甲胎蛋白(alphafetoprotein，AFP)作为血清学指标中最灵敏的指标之一，被广泛用于PHCC的普查、诊断、判断治疗效果、预测复发。但是由于AFP在血中的浓度与癌肿大小、分化程度、生长情况及变性坏死有关。在临床中经常会有AFP低浓度或AFP阴性的肝细胞癌患者，特别是AFP对小肝癌患者(小于2 cm)的检出率较低，存在假阳性和假阴性的问题[4]，因此寻找其他特异、灵敏的肝细胞肿瘤标志物对肝癌的早期诊断有十分重要的意义。

　　异常凝血酶原(APT)肝脏合成凝血酶原为无活性前体，经维生素K作为辅助因子羧化后转为活化形式，当肝细胞发生癌变时，合成了一种含羧基谷氨酸比正常少的异常凝血酶原(APT)。本研究测定原发性肝癌、肝硬化、正常人血清异常凝血酶原含量，APT>900 μg/L为阳性标准，则原发性肝癌的敏感性为90.0%，特异度分别为87.0%，明显高于其他指标(P<0.01)。且研究中发现有4例肝癌患者的AFP值很低，但是APT值明显升高，这与Kasahara等报道[5]APT与AFP无相关性，特别是在肿瘤直径小于2 cm或AFP阴性时，APT值也明显增高，APT与AFP在检测肝癌上的互补作用是一致的，因此对于AFP阴性的PHCC的诊断具有重要意义。

　　SCCA是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，可存在于正常鳞状上皮的棘状层和颗粒层，但在上皮起源的肿瘤细胞中典型表达，可保护肿瘤细胞免于凋亡，促进肿瘤生长，在正常肝脏组织中未发现此类物质[6];因此，SCCA 作为一种新的血清生物标志物，其敏感度较高。本研究中AFP、 SCCA、APT联合检测，敏感度可高达91.87%，特异度85.00%，明显较AFP、SCCA单项检测的敏感度及特异度要高，与APT单项检测的敏感度和特异度相当。说明AFP、SCCA、APT联合检测有相互补充的作用，具有一定的优越性，可以提高肝癌的检出率，提高诊断的特异性和诊断的准确性，全面评价其临床价值，避免漏诊、误诊，具有重要的临床意义。

　　【参考文献】

　　[1]曾兰兰，石玉玲.原发性肝癌标志物的实验室研究进展[J].生物技术通讯，2009，20(5):710-713.

　　[2]罗 速，张逢春，刘成柏，等. 肿瘤标志物联合检测在原发性肝细胞癌早期诊断中的应用[J].吉林大学学报(理学版)，2004，42(4):625-626.

　　[3]何成彦，周劲松，于秀艳.肿瘤特异性生长因子(TSGF)在肿瘤诊断中的应用[J].实用肿瘤学杂志，2001，15(1): 50-53.

　　[4]孙龙安，李 龙，林 钢.医学特种检验实验室诊断[M].北京：人民军医出版社，2002：164-166.

　　[5]Kasahara A，Hayashi N，Fusamoto H，et al.Clinical evaluation of plasma desgamunacarboxy pthrombin as amarker protein of hepatoceUular carcinoma in patients with cumors of various sizes[J].Dig Dis Sci，1993，38(12)：2170-2176.

　　[6]Pontisso P，Calabrese F，Benvegnu L，et al.Overexpression of squamous cell carcinoma antigen variants in hepatocellular carcinoma[J].Br J Cancer，2004，90(4)：833-837.