内源性二氢尿嘧啶与尿嘧啶比值在5Fu化疗中毒性关系的临床研究

　　作者：鲁明骞，王杰，向丽娥，徐光川，李苏，许新华，文彩虹，彭绪申 作者单位：1. 443003 湖北宜昌，三峡大学第一临床医学院;2.湖北省宜昌市中心人民医院肿瘤内科;3.华南肿瘤学国家重点实验室;4.中山大学肿瘤防治中心内科

　　【摘要】 目的 评价内源性二氢尿嘧啶(UH2)与尿嘧啶(U)比值在5Fu化疗中消化系统毒性的关系，为5Fu在恶性肿瘤中的个体化治疗提供一种理论依据。方法 70例恶性肿瘤患者，大肠癌48例，鼻咽癌21例，食管癌1例，化疗前采用高效液相色谱法测定UH2与U的值，比值≥2.05为正常。结果 UH2/U值正常者53例，发生Ⅰ～Ⅱ度恶心呕吐、腹泻和口腔粘膜炎分别为35、26和17例;UH2/U 值<2.05者17例，各有7例患者出现Ⅰ～Ⅱ度恶心呕吐和腹泻，9例患者出现口腔粘膜炎，发生Ⅲ～Ⅳ度反应分别为9、9、7例，两者间有显著性差异(P<0.05)。增加用药剂量和改变用药方式，口腔粘膜炎和腹泻的发生率不同，差异具有显著性。结论 化疗前测定UH2/U 值可预测5Fu的化疗毒性，并为个体化治疗提供依据。

　　【关键词】 二氢尿嘧啶;尿嘧啶;化疗;毒性

　　Clinical Study of Endogenous Uracil Derivatives Ratio in 5Fu Chemotherapy Toxicity

　　LU Mingqian, WANG Jie，XIANG Lie，XU Guangchuan, LI Su，XU Xinhua, WEN Caihong, PENG Xushen

　　1. The First College of Clinical Medical Science, China Three Gorges University, Yichang 443003,China; 2. Department of Oncology, Yichang Central People,s Hospital; 3. Skate Key Laboratory of Oncology in Southern; 4. Department of Medical Oncology, Cancer Center, Sun Yatsen UniversityAbstract：Objective This study is to investigate the relationship between the UH2U ratio and gastrointestinal toxicity with 5Fu chemotherapy, and prove evidence of theory in tumoral treatment of individual.Methods 70 patients included 48 colorectal patients, 21 nasopharynx patients and 1 esophageal patient. Endogenous uracil and dihydrouracil were assayed by HPLC (High performance liquid chromatography). The UH2U ratio ≥2.05 was normal value.Results There were 53 patients whose UH2U ratios were normal. The gradeⅠ～Ⅱnausea/ vomiting , diarrhea and mucosal respectively was 35, 26 and 17 patients. The patients whose UH2U ratio <2.05 respectively was 7, 7 and 9 patients. Grade Ⅲ～Ⅳ occurred in 9, 9 and 7 patients. Which was significantly different (P<0.05). Diarrhea and mucosal were of statistic significance in different dosage and different infusion methods.Conclusion UH2U ratio can be used to predicate the toxicity of 5Fu and to adjust the dose of 5Fu or to change the therapy regimen before the treatment.

　　Key words：Dihydrouracil;Uracil;Chemotherapy; Toxicity

　　0 引言

　　氟尿嘧啶(Fu)是治疗消化系统恶性肿瘤、头颈部恶性肿瘤、乳腺癌、卵巢癌等最常用的化疗药物，在体内必须转化为相应的核苷酸才能发挥效应。5Fu的代谢主要有三种途经：一种是在体内转变成三磷酸氟尿苷(FUTP)以伪代谢物形式掺入RNA中，干扰RNA的合成;另一种是在体内转变成三磷酸脱氧氟尿苷(FDUTP)后以伪代谢形式掺入DNA中干扰DNA的合成;第三种是在体内活化成脱氧氟尿苷单磷酸盐(FDUMP)后，抑制胸苷酸合成酶，阻止尿苷酸向胸苷酸的转变，最终影响DNA的合成。二氢嘧啶脱氢酶(Dihydropyrimidine dehydrogenase, DPD)是5Fu分解代谢起始阶段的降解酶，该酶可使进入体内的5Fu代谢生成二氢尿嘧啶(FUH2)，同时将内源性的尿嘧啶(Uracil, U)代谢生成二氢尿嘧啶(UH2)。DPD活性高低决定了5Fu在体内代谢状况和毒性大小 [1，2]。笔者回顾性分析了2001年6月～2005年9月接受5Fu化疗的恶性肿瘤患者，评价UH2/U值与消化系统毒性关系。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象

　　均经病理学检查确诊的恶性肿瘤患者70例，男性47例，女性23例;年龄25～77岁，平均年龄56.6岁。其中大肠癌48例、鼻咽癌21例、食管癌1例;化疗前查外周血象及肝肾功能均正常;患者KPS(Karnofsky performance status)评分≥70分;化疗方案：肠癌：Mayo或FOLFOX4方案;鼻咽癌和食管癌：PLF或TLF方案。

　　1.2 方法

　　1.2.1 样品收集

　　检测对象在化疗前清晨空服抽取静脉血3 ml，肝素钠抗凝，3 000r/min离心10min，分离血浆，70℃保存待测。

　　1.2.2 UH2/U比值测定

　　采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)测定内源性二氢尿嘧啶(UH2)与尿嘧啶(U)值。色谱条件：色谱柱：C18柱，300 mm×4.6 mm，5μm;柱温：10℃;流速：0.4ml/min;检测波长：204nm;流动相：KH2PO3H3PO4缓冲液。

　　1.3 评价标准UH2/U≥2.05为正常值。

　　1.4 毒副反应

　　5Fu化疗后的消化系统毒性等级按WHO的分级标准进行测定。

　　1.5 统计学处理

　　采用χ2检验，检验水准α=0.05。

　　2 结果

　　2.1 UH2/U值与化疗毒性关系

　　70例患者，UH2/U值正常者53例，UH2/U值<2.05者17例。恶心呕吐、腹泻、口腔粘膜炎正常组均明显低于异常组。在UH2/U值小于2.05者中，有3例患者出现Ⅳ度呕吐和腹泻，经对症处理和支持治疗后恢复正常。具体毒副反应情况见表1。表1 两组病例毒副反应比较(略)

　　2.2 5Fu用药剂量与毒性反应及UH2/U值的关系

　　5Fu用药剂量分≤2.5 g/m2 38例和≥3.0 g/m2 32例各两组，发生恶心呕吐、口腔粘膜炎和腹泻分别为24、13、19例和27、20、30例，χ2检验结果表明恶心呕吐与5Fu用药剂量差异无显著性，而Ⅲ～Ⅳ度口腔粘膜炎和腹泻的发生率随着用药剂量的增加而增高，差异具有显著性，说明5Fu所致口腔粘膜炎和腹泻与5Fu用药剂量呈正相关。不同用药剂量按UH2/U值各分为2组，UH2/U值<2.05组恶心呕吐、口腔粘膜炎和腹泻的发生率明显高于>2.05组，差异具有显著性。低UH2/U值的恶心呕吐、口腔粘膜炎和腹泻的发生率均高于高UH2/U值组，差异具有显著性。

　　2.3 5Fu输注方式与毒性反应及UH2/U值的关系

　　70例患者，采用持续静脉灌注48h者38例，连续静脉滴注5天者32例，发生口腔粘膜炎和腹泻分别为14、20例和19、29例，差异具有显著性。恶心呕吐分别为23例和28例，无显著性差异。两组患者UH2/U值<2.05组的恶心呕吐、口腔粘膜炎和腹泻的发生率均高于UH2/U值>2.05组，差异具有显著性。

　　3 讨论

　　5Fu自1956年合成以来，被广泛应用于临床，如消化系统肿瘤、头颈部肿瘤、乳腺癌、妇科肿瘤等。以往多对5Fu的用药途经及剂量上研究较多，近来发现DPD水平与5Fu的疗效和毒副反应有关 [3，4]。

　　DPD在体内分布较广泛，肝脏和外周血单个核细胞中分布最多，组织细胞中也有分布。DPD是5Fu代谢的限速酶，进入人体的5Fu多在肝脏代谢，超过80%经过DPD代谢生成二氢氟尿嘧啶，然后在其他代谢酶的作用下生成终产物排除体外 [5]。DPD的检测方法包括DPD活性的测定、DPD蛋白的表达和DPD mRNA的表达等，血液和组织常为检测对象。DPD的底物有天然的嘧啶、尿嘧啶和胸苷，DPD将血浆的内源性尿嘧啶(U)降解为二氢尿嘧啶(UH2)。因此，UH2与U的比值可间接反映DPD活性的高低。Gamelin等 [6]用HPLC法测定结肠癌病人血浆UH2/U值在0.35～7.13之间，中位值2.82，呈高斯分布。Bi等 [7]采用高效液相色谱串联质谱联用技术(HPLCMS/MS)同时测定患者和健康受试者血浆和尿中Ura及UH2的浓度，发现UH2/U的比值能更客观地反映体内DPD的活性变化以及个体间的差异。

　　本研究发现UH2/U值正常者较低下者在恶心呕吐、腹泻、口腔粘膜炎等消化系统反应上明显减少，两组间有显著性差异(P<0.05)。其中3例患者UH2/U值<0.5均出现Ⅳ度呕吐和腹泻，经对症和支持处理后恢复正常。随着5Fu用药剂量的增加，Ⅲ～Ⅳ度口腔粘膜炎和腹泻的发生率也随着增高，差异具有显著性，但恶心呕吐却无明显区别，这说明5Fu所致口腔粘膜炎和腹泻与5Fu用药剂量呈正相关。Gamelin等 [6]根据UH2/U值来调整5Fu的剂量，UH2/U≤2.0者，持续静脉滴注8h的周剂量为1 600 mg/m2。如果改变输注方式，持续静脉灌注与连续静脉滴注5天者相比，口腔粘膜炎和腹泻的发生率均低于后者，差异具有显著性。不同用药剂量及不同输注方式UH2/U值<2.05组恶心呕吐、口腔粘膜炎和腹泻的发生率明显高于>2.05组，差异具有显著性。

　　因此，化疗前测定血浆UH2/U值可预测5Fu的消化系统毒性，对比值低下者，需减少5Fu的用药剂量或改用其他化疗药物，对比值偏高者，可给予DPD抑制剂，如Eniluracil可100%地灭活DPD [8]，从而减少5Fu的用药剂量 [9]和逆转抗药性 [10]。

　　【参考文献】

　　[1] Tershima M, Fujiwara H, Takagane A, et al. Prediction of sensitivity of fluoroprimidines by metabolic and target enzyme activities in gastric cancer [J]. Gastric Cancer, 2003, 6(Suppl 1):7181.

　　[2] Inada T, Ogata Y, Kubota T, et al. 5fluorouracil sensitivity and dihydropyrimidine dehydrogenase activity in advanced gastric cancer [J]. Anticancer Res, 2000, 20(4):24572462.

　　[3] Tershima M, Irinoda T, Fujiwara H, et al. Role of thymidylates and dihydropyridimine dehydrogenase in tumor progression and sensitivity to 5Fluorouracil in human gastric cancer [J]. Anticancer Research, 2002, 22(2A):761768.

　　[4] Ishibiki Y, Kitajima M, Sakamoto K, et al. Intratumoural thymidylate synthase and dihydropyrimidine dehydrogenase activities are good predictors of 5fluorouracil sensitivity in colorectal cancer [J]. J Int Med Res, 2003, 31(3): 181187.

　　[5] Diasio RB, Lu Z. Dihydropyrimidine dehydrogenase activity and fluorouracil chemotherapy [J]. J Clin Oncol, 1994, 12(11): 22392242.

　　[6] Gamelin Z, Boisdroncelle M, GuerinMeyer V, et al. Correlation between uracil and dihydrouracil plasma ratio, fluorouracil (5FU) pharmacokinetic parameters, and tolerance in patients with advanced colorectal cancer: A potential interest for predicting 5FU toxicity and determining optimal 5FU dosage [J]. J Clin Oncol, 1999,17(4):11051110.

　　[7] Bi DQ, Aderson LW, Shapiro J, et al. Menasurement of plasma uracil using gas chromatographymass spectrometry in normal individual and in patients receiving inhibitors of dihydropyrimidine dehydrogenase [J]. J Chromatogr B, 2000, 738(2): 249258.

　　[8] Ahmed FY, Johnston SJ, Cassidy J, et al. Eniluracil treatment completely inactivates dihydropyrimidine dehydrogenase in colorectal tumors [J]. J Clin Oncol, 1999, 17(8): 24392445.

　　[9] Milano G, Mcleod HL. Can dihydrophyrimidine dehyogenase impact 5flurouracilbased treatment? [J]. Eur J Cancer, 2000, 36(1): 3742.

　　[10]Schilsky RL, Hohneker J, Ratain MJ, et al. Phase Ⅰ clinical and pharmacologic study of eniluracil plus fluorouracil in patients with advanced cancer [J]. J Clin Oncol, 1998, 16(4):14501457.