热休克蛋白70在乳腺癌和胃癌中的表达及其意义的研究
发表时间：2010-08-09 浏览次数：444次
作者：程毅 魏贵亮 周 宁 吴迎爽 谢 震 祁 贺 薄爱华 张晓立 邢立强 作者单位：河北北方学院大学生科协，河北 张家口 075000
【摘要】 目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)在人乳腺癌和胃癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学的方法对64例乳腺癌和55例胃癌组织中的HSP70进行检测。结果:(1)HSP70在乳腺癌和胃癌组织中的表达分别为78.13%，61.82%。(2)乳腺癌中HSP70的表达与乳腺癌的病理类型，淋巴结转移情况及年龄未发现显著差异(P>0.05)。(3)胃癌中HSP70的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移有密切关系(P<0.05)。结论: HSP70在乳腺癌和胃癌中均呈较高水平表达，其中在胃癌中的表达与肿瘤浸润深度、恶性程度有密切关系，HSP70在乳腺癌和胃癌的发生发展中起重要作用。HSP70可能成为乳腺癌，胃癌的诊断指标之一。
【关键词】 热休克蛋白70;胃癌;乳腺癌;免疫组织化学
Expressions and the Clinical Significance of HSP70 in
Human Breast Cancer and Gastric Cancer
CHEN Yi,Wei Guiliang,ZHOU Ning, et al
Hebei North University,Zhangjiakou,075000,Hebei China
【ABSTRACT】 Objective:To investigate the expression and clinical significance of heat shock protein70(HSP70) in human breast cancer and gastric cancer.Methods: Applied immunohistochemical method was used to detect HSP70 on 64 cases of breast cancer and 55 cases of gastric cancer.Results:The positive expression rates in breast cancer and gastric cancer were 78.13%,61.82% respectively.In breast cancer,the expression of HSP70 had no remarkable correlation with the age of patients pathologic type,lymph node metastasis(P>0.05).Where as in gastric cancer,the expression of HSP70 was significantly related to the depth of invasion and lymph node metastasis(P<0.05).Conclusion:HSP70 was highly expressed in breast cancer and gastric cancer and it was closely related to the depth of invasion,which proved that HSP70 played an important role in breast cnacer and gastric cancer.Expression of HSP70 may be one of the diagnostic factors in breast cancer and gastric cancer.
【KEY WORDS】 Heat shock protein70(HSP70);Gastric cancer ;Breast cancer ;Immunohistochemistry
热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一组广泛存在于原核和真核生物中高度保守的蛋白质，在应激状态下可被诱导表达，具有提高细胞对应激的耐受性及维护细胞自稳定等重要作用[1]。近年来，有研究表明HSP与肿瘤的发生发展及预后有关。本研究采用免疫组织化学方法检测HSP70在乳腺癌和胃癌中的表达，并探讨其在判断癌瘤诊断中的作用。
1 材料和方法
1.1 标本 取2002～2004年河北北方学院第一附属医院手术切除标本共计119例,其中乳腺癌64例,平均年龄49.97岁;胃癌55例,平均年龄57.38岁。新鲜标本经10%福尔马林固定常规、脱水、浸蜡、包埋、连续切片(厚度5μm)，所有标本均经病理学诊断证实。
1.2 试剂 兔抗人HSP70多克隆抗体，SABC试剂盒，DAB显色剂均购自北京中山金桥生物技术公司。
1.3 方法 SABC免疫组织化学方法。染色过程严格按照试剂盒规范程序进行。主要步骤为切片常规脱蜡水化，经0.3%过氧化氢10min，在柠檬酸盐缓冲液中微波修复抗原，正常羊血清封闭，分别滴加HSP70一抗4℃孵育过夜，以PBS洗3遍，加二抗37℃30min，以PBS洗3遍，加三抗30min，清洗后DAB显色。阴性对照以PBS代替一抗;以已知阳性切片为阳性对照。
1.4 统计学分析 应用χ2统计进行处理。
2 结果
2.1 判断标准 光镜下细胞核和胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性，每片有5%以上阳性细胞时即为阳性病例。
2.2 HSP70在乳腺癌中的表达情况如下(见表1，表2)。 表1 HSP70表达与乳腺癌临床病理特征的关系表2 HSP70的表达与胃癌临床病理特征的关系
3 讨论
HSP在正常细胞中表达很低，但在冷、热、缺氧、病毒感染和DNA损伤等因素作用下HSP表达增加，从而维持细胞内环境稳定[2]。同时，HSP作为“分子伴侣”与具有不同功能的多种蛋白质在细胞中形成复合体，并通过其形成和解离而参与有关蛋白的折叠亚基的组成、细胞内运输及降解等过程，从而调节靶蛋白的活性和功能，但不参与靶蛋白的组成[3]。HSP依其分子量大小的大小和同源程度可分为HSP90、HSP70、小分子HSP及泛素等几个家族。在众多的HSP中，以HSP70在大多数生物细胞中含量最多，是目前研究的热点，一些学者报道HSP70在一些应激损伤组织中表达增加。
我们研究发现HSP70在乳腺癌和胃癌中均呈高表达，分别为78.13%，61.82%。其中在乳腺癌中，HSP70的表达与患者年龄、病理学分型、淋巴结转移情况未发现显著差异。而在胃癌中，侵犯至浆膜层的癌组织中HSP70的表达显著高于侵犯至肌层的癌组织(P<0.01)，有淋巴结转移的癌组织中HSP70的表达显著高于无淋巴结转移的癌组织(P<0.05)。这就表明HSP70含量增高与乳腺癌、胃癌的发生发展及胃癌的浸润、淋巴结转移有密切关系。
HSP70通过细胞信号转导，细胞周期调节等多途径参与细胞生长繁殖。HSP在生殖细胞及胚胎细胞中表达较强，而在衰老细胞中表达较弱，提示增值活跃的细胞蛋白质合成增加，需要较多的HSP参与蛋白质活性功能的形成。肿瘤细胞是增殖旺盛的永生细胞，可能需要较多HSP维持其不断增殖[4]。另外，由于肿瘤形成过程中缺氧和营养不足，形成应激反应，导致HSP70的高表达。在肿瘤病人体内能检测到HSP70与一些蛋白组成的复合物，包括SV40大T抗原，腺病毒EA蛋白，细胞的癌基因产物c-myc和抑癌蛋白p53[5]。HSP70可与突变型p53蛋白形成复合体，将突变型p53作为一种特异型抗原体呈给宿主免疫系统，协调p53跨膜，延长其半衰期，提高p53的水平从而增强p53抑制细胞凋亡的能力，使肿瘤细胞凋亡不足。
总之，通过本组实验，我们发现HSP70在乳腺癌和胃癌组织中均有较高水平的表达，HSP70阳性表达与胃癌恶性程度有关，本实验提示HSP70有可能作为诊断乳腺癌、胃癌的参考指标之一
【参考文献】
1 罗亚莉，刘会玲，高云荷.热休克蛋白与宫颈癌[J].医学综述，2002，8(3)：136137
2 苏振兴，余春艳，高全文.HSP70在外阴白斑和外阴鳞癌中的表达及临床意义[J].第四军医大学学报,2003,24(9):834836
3 唐伟,李家兵.HSP70和HSP90在人膀胱癌肿的表达及其意义[J].第三军医大学学报，2005，27(6)：560562
4 张学庸主编.胃癌的基础研究与临床[M].第一版.北京：科学出版社,1996.32
5 徐敏，王树斌，刘雅洁,等.热休克蛋白70在乳腺癌中的表达及其与预后的关系[J].实用肿瘤杂志，2004，19(2)：110113
