非小细胞肺癌LRP、cerbB2蛋白表达与辅助化疗疗效相关性的研究

　　作者：张全安，徐瀚峰 作者单位：(东南大学医学院附属南京第二医院 肿瘤内科，江苏 南京 210003)

　　【摘要】 目的：研究非小细胞肺癌肺耐药相关蛋白(LRP)、cerbB2蛋白表达与辅助化疗疗效之间的相关性。方法：收集61例非小细胞肺癌的病理标本，通过免疫组化检测LRP、cerbB2的表达，61例患者均接受4～6个周期化疗，其中19例采用MVP(MMC加VDS加DDP)方案，17例采用NP(NVB加DDP)方案，25例采用TP(TXL加DDP)方案，对疗效与免疫组化结果进行统计学处理。结果：化疗前LRP表达阳性者的化疗有效率为35.29%，与阴性者(为77.78%)相比具有显著的统计学差异(P<0.05)。化疗前cerbB2蛋白表达阳性者的化疗有效率为38.93%，与阴性者(为62.50%)相比也具有显著的统计学差异(P<0.05)。结论：在肺癌的辅助化疗中，LRP、cerbB2蛋白的表达与疗效有着重要的关联，在化疗之前对LRP及cerbB2蛋白的检测有助于预测化疗疗效及预后。

　　【关键词】 非小细胞肺癌; 肺耐药相关蛋白; cerbB2蛋白; 化疗

　　化疗是肺癌综合性治疗的重要手段之一，但是肺癌特别是非小细胞肺癌(non small cell lung cancer，NSCLC) 的化疗效果多不佳。造成这种现象的主要原因是多药耐药(multidrug resistance related，MDR) 的产生，其形成是多因素的，不同类型肺癌的耐药表型亦有所不同。现已明确，肺耐药相关蛋白(lung resistance relatedprotein，LRP)是引起肺癌耐药的重要因素。近年来亦发现癌基因cerbB2蛋白参与了肺癌耐药的产生，因此检测LRP将有助于指导NSCLC的化疗。本研究旨在探讨LRP、cerbB2蛋白与NSCLC中常用化疗方案的疗效间是否有相关性。

　　1 资料和方法

　　1.1 患者资料和化疗方案

　　本院2002年6月至2006年12月间未经化疗、经手术后病理及肺穿刺确诊的NSCLC患者61例，男43例，女18例，年龄37～72 岁，中位年龄(59.64±8.32)岁。鳞癌26例，腺癌25例，大细胞癌10例。肿瘤分级G1 20例，G2 24例，G3 17例，TNM分期Ⅱa 11例，Ⅱb 16例，Ⅲa 19例，Ⅲb 15例，所有患者均接受4～6个周期化疗，化疗方案分别为：19例MVP(MMC 6 mg·m-2加VDS 3 mg·m-2加DDP 50 mg·m-2)，17例NP(NVB 30 mg·m-2加DDP 40 mg·m-2)，25例TP(TXL 150 mg·m-2加DDP 80 mg·m-2)，均为静脉注射。毒副反应主要为胃肠道反应32例，骨髓抑制40例，经过对症处理后均缓解。疗效确定根据WHO标准：通过胸部影像学检查，肿块完全消失，持续1个月以上为完全缓解;肿块缩小一半以上，持续超过1个月为部分缓解;1个或多个病变增大25%以上为进展。完全缓解和部分缓解为化疗有效，进展为无效。

　　1.2 免疫组化染色方法及结果判定

　　61例患者的61份标本均经甲醛固定，石蜡包埋，4 μm 常规切片，采用免疫组化SP法染色，DAB 显色，苏木精复染。鼠抗人LRP、cerbB2单克隆抗体，即用型免疫组织化学超敏SP 试剂盒及DAB显色剂均购自北京中杉生物技术有限公司。PBS代替一抗作空白对照，正常鼠血清代替一抗作阴性对照，用已知阳性的肺癌切片作阳性对照。

　　结果判定：LRP表达于胞质，cerbB2蛋白表达于胞质或胞膜，取10个视野，每个视野观察100个肿瘤细胞，阳性细胞数>15%为阳性组织。

　　1.3 统计学分析

　　统计学处理采用SPSS 12.0软件包，样本率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结 果

　　化疗前LRP、cerbB2表达阳性或阴性者化疗的有效率见表1。表1 LRP、cerbB2表达阳性或阴性者的化疗有效率比较表1显示，LRP阳性者化疗有效率与阴性者比较具有显著的统计学差异(P<0.05)，cerbB2阳性者化疗有效率与阴性者比较也具有显著的统计学差异(P<0.05)。

　　3 讨 论

　　LRP是从一株起源于人NSCLC耐阿霉素的细胞株SW1573/2R120中被克隆的新基因。多项研究表明，LRP在肿瘤组织中的表达率与表达水平明显高于正常组织，而且不同的肿瘤其表达水平也不尽相同。LRP的主要作用是清除外源性毒性物质，使机体免受损害，其作用机制为：阻止以细胞核为靶点的药物通过核孔进入细胞核，并将药物转运到细胞浆的囊泡中，以胞吐的方式排到细胞外[1]。国内外多项研究[24]检测了多种肿瘤细胞系中的表达情况，认为LRP阳性肿瘤耐药细胞耐药谱广泛，除对相关类药物耐药外，对一些合成类药物，如卡铂、顺铂和马法兰等也有很强的耐药性。LRP阳性患者对化疗敏感性差，稳定期短，生存期短。本研究中化疗前LRP阳性者的化疗有效率为35.29%，明显低于阴性者的77.78%(P<0.05)，从而反映了LRP在肺癌的耐药中具有重要的作用，是影响化疗效果的重要因素。

　　癌基因cerbB2也可能参与NSCLC的MDR，cerbB2是已确定的原癌基因，编码的跨膜受体蛋白为上皮生长因子的受体，与配体结合后能激活第二信使转导通路，将胞外的生长因子信号传递入核，激发细胞内信号级联反应，导致下游信号分子的激活，刺激细胞增殖，从而参与肿瘤的血管形成、侵袭及转移[5]。有体外实验研究[6] 显示，NSCLC中cerbB2过度表达与肿瘤对常规剂量的化疗不敏感相关。CerbB2表达水平高的NSCLC细胞株比低水平表达的细胞株对阿霉素、鬼臼乙叉苷、顺铂更易耐药，而对单克隆抗体AG825 (选择性酪氨酸激酶抑制剂)更敏感。其产生耐药的机制还不确定。本研究中化疗前cerbB2蛋白阳性者的化疗有效率(38.93%)明显低于阴性者的62.50%(P<0.05)，与既往研究结果相符合。

　　综上所述，在肺癌的辅助化疗治疗中，LRP、cerbB2蛋白的表达与疗效有着重要的关联，在化疗之前对LRP及cerbB2蛋白的检测有助于预测化疗效果及预后，指导化疗，制定有效的个体化疗方案;并可依据耐药机制的不同，应用逆转剂增强化疗疗效，延长NSCLC患者的有效生存期。

　　【参考文献】

　　[1]王洁，刘叙仪，蒋薇，等.LRP、MRP、MDR1基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义[J].中华肿瘤杂志，2000，22(4):304308.

　　[2]MESCHINI S，MARRA M，CALCABRINI A，et al.Role of the lung resistancerelated protein (LRP) in the drug sensitivity of cultured tumor cells[J].Toxicology in Vitro，2002，16(4)：389398.

　　[3]HORVATH V，BLANAROVA O，SVIHALKOVASINDLEROVA L，et al.Platinum(Ⅳ) complex with adamantylamine overcomes intrinsic resistance tocisp latin in ovarian cancer cells[J].Gynecol Oncol，2006，102(1):3240.

　　[4]WANG W，KE S，CHEN G，et al.Effect of lung resistancerelated protein on the resistance to cisp latin in human ovarian cancer cell lines[J].Oncol Rep，2004，12 (6):13651370.

　　[5]PRENZEL N，FISCHER O M，STREIT S，et al.The epidermal growth factor receptor family as a cent ral element for cellular signal transduction and diversification[J].Endocr Relat Cancer，2001，8:1131.

　　[6]TORRE E A，SALIMBENI V，FULCO R A.The erbB2 oncogene and chemotherapy:a mini review[J].J Chemother，1997，9:5155.