Ezrin和Moesin在胃癌中的表达及其临床意义
发表时间：2009-06-08 浏览次数：848次
作者单位：哈尔滨医科大学附属二院，黑龙江 哈尔滨 150086 【摘要】 ［目的］ 探讨Ezrin、Moesin在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理参数之间的关系。 ［方法］ 采用免疫组化法检测50例胃癌组织、25例胃黏膜不典型增生和25例正常胃黏膜中Ezrin、Moesin的表达。 ［结果］ ①Ezrin在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌中的阳性表达率分别为28.0%、36.0%和86.0%。Moesin在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌中的阳性表达率分别为12.0%、24.0%和78.0%。②Ezrin的表达程度与胃癌的临床分期、淋巴结转移有关(P<0.01)，与胃癌的分化程度无关(P>0.05)。Moesin的表达程度与胃癌的临床分期、淋巴结转移和分化程度有关(P<0.01)。③Ezrin和Moesin的表达之间呈正相关(P<0.01)。［结论］ Ezrin、Moesin在胃癌中的高表达与胃癌的临床分期和淋巴结转移有关，两者的联合检测可能成为预测胃癌转移及预后的重要指标。
【关键词】 胃肿瘤
Expression of Ezrin, Moesin in the Gastric Carcinoma and Its Clinical Significance
LI Ying-jie1, TAO Xiao-feng2, HE Yan2, et al.
(1.The Second Affiliated Hospital Harbin Medical University, Harbin 150086, China;
2.Harbin Medical University, Harbin 150086, China)
Abstract: ［Purpose］ To explore the expression of Ezrin and Moesin and its correlation to clinico-pathological profile in gastric carcinoma. ［Methods］ The expression of Ezrin and Moesin in 50 specimens of gastric carcinoma, 25 specimens of gastric epithelial dysplasia and 25 specimens of normal gastric tissues were detected by immunohistochemistry. ［Results］ ①The positive expression rates of Ezrin in normal gastric tissues, gastric epithelial dysplasia and gastric carcinoma were 28.0%, 36.0% and 86.0% and those were 12.0%, 24.0% and 78.0% respetively. ②The expression of Ezrin was correlated to clinical stage, lymph node metastasis(P<0.01), but not to differentiation(P>0.05), the expression of Moesin was correlated to clinical stage, lymph node metastasis and differentiation(P<0.01). ③ The expression of Ezrin was positively correlated to that of Moesin in gastric carcinoma(P<0.01). ［Conclusions］ High expression of Ezrin and Moesin is correlated with the clinical stage and lymph node metastasis in gastric carcinoma, combined both detection might be important marker for forecasting metastasis and prognosis in gastric carcinoma examining Ezrin and Moesin.
Key words: gastric neoplasms; Ezrin; Moesin; immunochemistry
近年来的研究发现，作为ERM家族成员的Ezrin（埃兹蛋白）、Moesin（膜突蛋白）可以通过对肿瘤细胞黏附分子的调节对恶性肿瘤的侵袭和转移发挥重要作用。目前，国内对这方面的研究报道很少。本研究旨在探讨胃癌中Ezrin、Moesin的表达情况及其与胃癌进展、转移的关系，为胃癌的诊断、预后判断和临床治疗提供新依据。
1 材料与方法
1.1 标本来源
病例资料取自哈尔滨医科大学第二临床医学院2003年1月～2005年12月间手术的胃癌患者，其中男性38例，女性12例，年龄31~76岁，平均年龄52.44±1.40岁。50例病例均为腺癌，按组织学类型和分化程度分为两组：乳头状腺癌和高中分化管状腺癌为分化较好组，21例；低分化腺癌、黏液腺癌、印戒细胞癌和未分化癌为分化较差组，29例。按TNM分期：Ⅰ期 4例；Ⅱ期 11例；Ⅲ期 23例；Ⅳ期 12例。有淋巴结转移者（N1）30例，无淋巴结转移者（N0）20例。另取胃镜检出的正常胃黏膜组织25例及胃黏膜不典型增生25例。
1.2 试剂与方法
浓缩型鼠抗人Ezrin、Moesin单克隆抗体购自NewoMarkers公司。羊抗鼠二抗购自北京中杉试剂公司。采用免疫组化SP法，即链霉素抗生物素蛋白—过氧化物酶法。实验步骤按说明书进行。用已知的阳性片作阳性对照；用PBS液代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断
Ezrin、Moesin均在胞质内表达，呈棕黄色颗粒。按染色强度和阳性细胞表达数，参考Mathew等[1]分级标准：无表达为“-”；＜50％细胞阳性表达或染色较浅为“+”；≥50％阳性表达或深染为“++”。
1.4 统计学方法
应用SPSS10.0 统计软件。Ezrin、Moesin在不同胃组织中表达的差异及与临床病理因素的关系采用χ2检验。Ezrin、Moesin表达的相关性分析采用Spearman等级相关分析法，P<0.05 为差异有显著性，P<0.01为差异有极其显著性。
2 结 果
2.1 Ezrin、Moesin在胃组织中的表达
Ezrin在胞质呈棕色颗粒分布，肿瘤组织表达从局部或灶性至弥漫性均有，以弥漫性为主，正常胃黏膜及不典型增生组织阳性表达以弥漫性为主。Ezrin在25例正常胃黏膜、25例不典型增生和50例胃癌组织的表达阳性率分别为28.0%(7/25)，36.0%(11/25)，86.0%(43/50)。见表1。
Moesin在胞质呈棕色颗粒分布，肿瘤组织表达从局部或灶性至弥漫性均有，以弥漫性为主，正常胃黏膜及不典型增生组织阳性表达以弥漫性为主。Moesin在25例正常胃黏膜、25例不典型增生和50例胃癌组织的表达阳性率分别为12.0%(3/25)，24.0%(6/25)，78.0%(39/50)。见表1。
Ezrin、Moesin的表达在正常胃黏膜和胃癌之间以及不典型增生和胃癌之间有显著性差异（P<0.01），而正常胃黏膜和不典型增生组织之间Ezrin和Moesin的表达差异无显著性(P>0.05)。
2.2 胃癌中Ezrin、Moesin表达与临床病理因素关系
见表2。Ezrin的表达程度与胃癌的临床分期、淋巴结转移有关(P<0.01)，与胃癌的分化程度无关(P>0.05)。Moesin的表达程度与胃癌的临床分期、淋巴结转移和分化程度有关(P<0.01)。
2.3 Ezrin、Moesin在胃癌中表达的相关性分析
Spearman等级相关分析显示Ezrin、Moesin在胃癌中的表达呈显著性正相关（r=0.701，P=0.0009)。见表3。
3 讨 论
Ezrin是1981年由Betscher在鸡的小肠上皮细胞刷状缘中首次被纯化的。ERM家族在结构上的同源性主要体现在它们都在N-末端有一个同源性很高的FERM功能域，以及C-末端的不同氨基酸位置上有一个关键的与其激活有关的苏氨酸磷酸化位点[2]，FERM功能域在介导细胞表面黏附分子（如CD44、E-cadherin、ICAM-2）与细胞骨架通过EMR家族蛋白连接的生理功能中起着关键作用；而暴露的C-末端尾部具有肌动蛋白—细胞骨架结合位点，故通过Ezrin的桥接作用，可将肌动蛋白细胞微丝与细胞膜相连，从而产生一系列细胞功能，如细胞形态改变、细胞运动粘附、有丝分裂和细胞极性等。因此，越来越多的研究证实，Ezrin与肿瘤的侵袭、转移有关。我们的研究发现，Ezrin在胃癌中的表达显著高于正常和不典型增生的胃黏膜组织，并且其表达率和表达强度与肿瘤的临床分期和淋巴结转移情况密切相关，即随着胃癌恶性程度和临床分期的增高，Ezrin的表达随之增加，这一结论与大部分文献的报道基本一致。Yu等[3]报道Ezrin的表达在儿童横纹肌肉瘤和骨肉瘤的转移过程中起重要作用，提示Ezrin蛋白是儿童肿瘤转移的关键因素[4]，并且Ezrin的表达与肿瘤的预后有关。但在成人肿瘤中却存在两种不同的结论，卵巢浆液性囊腺癌中Ezrin的低表达提示预后差[5]，但胰腺癌中Ezrin的高表达者预后不好[6]。这一结果说明，Ezrin蛋白在成人肿瘤转移过程中存在着更复杂的作用机制， Ezrin蛋白的过度表达可能参与了肿瘤转移的多个环节。Ezrin蛋白可以直接与细胞基质透明质酸受体CD44分子的胞浆部分发生作用，而CD44分子过表达可引起膜—细胞骨架连接蛋白——Ezrin的功能激活，从而促进肿瘤细胞转移能力增强[7，8]。另外，Ezrin蛋白还可以通过协同和放大细胞表面的肿瘤转移相关信号，改变细胞内信号转导平衡，参与肿瘤的转移机制。
ERM家族的另一成员Moesin常与Ezrin共同表达于细胞膜内面，对维持细胞形态和运动起重要作用，并参与多种疾病的发病过程。Carmeci等[9]对雌激素受体阴性和阳性的乳腺癌细胞Moesin的表达情况研究推测Moesin可能参加了雌激素受体阴性肿瘤的扩散和转移。我们的研究发现，Moesin在胃癌的表达与肿瘤的临床分期、淋巴结转移和分化程度有关，Moesin与 Ezrin的表达有很好的相关性，但Moesin蛋白具体的作用机制还有待进一步研究。
Ezrin在原发肿瘤的高表达可以导致肿瘤转移，因此，Ezrin及其相关分子可能成为未来治疗肿瘤转移的一个新靶点，但是对Ezrin表达上调的启动机制目前还不十分清楚，对于Ezrin蛋白更加深入的研究，将促进人们对肿瘤转移机制的认识，并发展更有效的干预途径，从而提高肿瘤患者的生存率。
【参考文献】[1] Mathew J, Hines JE, Obafunwa JO, et al. CD44 is expressed in heaptocellular carcinomas showing vascular invasion[J]. J Pathol, 1996, 179(10):74-79.
[2] Louvet-Vallee S. ERM proteins: from cellular architecture to cell signaling[J]. Biol Cell, 2002, 92(5):305-316.
[3] Yu Y, Khan J, Khanna C, et al. Expression profiling identifies the cytoskeletal organizer Ezrin and the developmental homeoprotein Six-1 as key metastatic regulators[J]. Nat Med, 2004, 10(2):175-181.
[4] Khanna C,Wan X, Bose S, et al. The membrane-cytoskeleton linker Ezrin is necessary for osteosarcoma metastasis [J]. Nat Med, 2004, 10(2):182-186.
[5] Moilanen J, Lassus H, Leminen A, et al. Ezrin immunoreactivity in relation to survival in serious ovarian carcinoma patients[J]. Gynecol Oncol, 2003, 90(2):273-281.
[6] Akisawa N, Nishimori I, Iwamura T, et al. High levels of ezrin expressed by human pancreatic adenocarcinoma cell lines with high metastatic potential[J]. Biochem Biophys Res Commun, 1999, 258(2):395-400.
[7] Martin TA, Harrison G, Mansel RE, et al. The role of the CD44/ezrin complex in cancer metastasis[J]. Crit Rev Oncol Hematol, 2003, 46(2):165-186.
[8] Pujuguel P, Del Maeslro L, Gautreau A, et al. Expression of CD44s, MMP-9 and Ki67: possible association with invasion, metastasis and recurrence of osteosarcoma[J]. Ai Zheng, 2002, 21(7): 745-750.
[9] Carmeci C,Thompson DA,Kuang WW,et al.Moesin expression is associated with the estrogen receptor-negative breast cancer phenotype [J].Surgery,1998,124(2):211-217．
