DEC1在肺癌中表达及其临床意义
发表时间：2009-05-26 浏览次数：924次
作者:李清泉,张莉
作者单位：武汉大学人民医院，湖北 武汉 430060 【摘要】 ［目的］ 探讨DEC1在肺癌中的表达以及临床意义。［方法］ 运用免疫组化技术检测56例肺癌中DEC1、HIF-1α、bcl-2和caspase-3的表达。［结果］ DEC1蛋白在肺癌阳性表达率分别为55.36%，高于肺良性病变组织中的阳性表达率（23.81%）(P<0.05)。DEC1在肺癌中的表达与HIF-1α表达水平相关，但与bcl-2和caspase-3的表达水平无关，并与患者性别年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学分型及有无淋巴结转移均无关。［结论］ DEC1在肺癌的发生发展中可能起着重要的作用，其表达与HIF-1α有关，且可能通过不依赖bcl-2和caspase-3的途径影响肺癌细胞的凋亡。
【关键词】 肺肿瘤
Expression of Differentiated Embryo-Chondrocyte Expressed Gene 1(DEC1) in Lung Cancer and Its Clinical Significance
LI Qing-quan1, ZHANG Li2
(1.Renmin Hospital, Wuhan University, Wuhan 430060, China;
2.Zhongnan Hospital, Wuhan University, Wuhan 430071, China)
Abstract: ［Purpose］ To investigate the expression of differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1 (DEC1) in lung cancer and its clinical significance. ［Methods］ The expressions of DEC1, HIF-1α, bcl-2 and caspase-3 in 56 cases with lung cancer were detected by immnohistochemsitry. ［Results］ The positive expression rate of DEC1 in lung cancer tissues was 55.36%(31/56), which was significantly higher than that in benign lesion tissues (23.81%)(P<0.05). The expression of DEC1 in lung cancer was related to HIF-1α protein level, but was not related to bcl-2 and caspase-3 protein levels. DEC1 expression was not correlated with patients’ age, sex, TNM staging, lymph node involvement and histological type. ［Conclusion］ DEC1 may paly a role in the carcinogenesis and development of lung cancer. The expression of DEC1 may be related to HIF-1α in lung cancer, and affect cell apoptosis not rely on bcl-2 and caspase-3 route.
Key words: lung neopalsms; immunohistochemistry; DEC1; HIF-1α
DEC1（differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1）（在大鼠中称为SHARP-2，小鼠中称为Stra-13）[1~3]是新近发现的一个与肺癌的发生发展有关的因子。研究表明，DEC1在肿瘤细胞的增殖、凋亡和细胞分化中起着重要的作用[4]，且与肿瘤组织的低氧状态密切相关[5，6]。本研究应用免疫组化S2P法检测了56例肺癌组织和21例肺良性病变组织DEC1的蛋白表达，以探讨其在肺癌发病机制中的作用及意义。
1 材料与方法
1.1 标本来源
标本来自湖北省人民医院2002年1月至2004年12月未经放化疗的肺癌手术患者56例。其中鳞癌29例，腺癌27例。同时取肺良性病变组织21例，全部标本经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，制成4μm厚连续切片。
1.2 实验方法
试剂：兔抗人DEC1单克隆抗体由Dr. SB Fox[6]馈赠(Nuffield Department of Clinical Laboratory Sciences， John Radcliffe Hospital，UK)。兔抗人HIF-1α，bcl-2，caspase-3单克隆抗体，即用型免疫组化S-P Kit和DAB试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。
采用免疫组化SP法，染色参照试剂盒说明进行。其中DEC1、HIF-1α、bcl-2和caspase-3一抗浓度分别为1∶1000, 1∶200, 1∶150和1∶100。实验均以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知阳性片作阳性对照。每张玻片随机选取5个视野，参照Ryu的方法[7]，阳性细胞数＜5%为阴性，≥5%为阳性。
1.3 统计学方法
采用SPSS11.5软件χ2检验。
2 结 果
2.1 肺癌组织与肺良性疾病组织中DEC1的表达
DEC1主要着色于肿瘤上皮细胞，以胞浆及胞核染色为主，表达程度不一，阳性表达分布不均。21例肺良性病变组织中DEC1蛋白阳性表达率为23.81%(5/21)，明显低于56例肺癌组织中DEC1的阳性表达率55.36%(31/56)，两者间差异有显著性(P<0.05)。见表1。
2.2 DEC1在肺癌中的表达与临床意义
DEC1在肺癌组织中的表达与患者性别年龄、肿瘤大小、分型、组织学分级、TNM分期及有无淋巴结转移均无关（P>0.05）。见表2。
2.3 DEC1表达与HIF-1α，bcl-2，caspase-3的关系
DEC1在肺癌组织中的表达与HIF-1α呈显著性相关（P<0.05），而与bcl-2，caspase-3的表达无相关性（P>0.05）。见表3。
3 讨 论
DEC1定位于9q32上，其翻译的蛋白含有bHLH结构[6]（bHLH基序在细胞增殖分化[8]，磷脂代谢[9]及对致癌物、药物等异生物的反应[7]中起重要作用）。许多研究均表明DEC1的表达与缺氧密切相关。Stra-13在血清饥饿环境中可抑制小鼠NIH3T3细胞生长[9]。Shen等[1]发现cAMP类似物Bt2cAMP可诱导人软骨细胞产生DEC1。有学者[10]在此基础上进一步将DEC1转染肾母细胞癌293细胞，发现细胞生长及凋亡均受到抑制。同时在体内实验[7]中，转染DEC1的质粒注入裸鼠食管癌肿瘤中，发现肿瘤直径变小。以上研究初步证实DEC1在肿瘤细胞分化、增殖和凋亡中可能具有重要作用。
本试验发现DEC1主要着色于肿瘤上皮细胞，以胞浆及胞核染色为主, 表达程度不一，阳性表达分布不均。肺癌组织中其阳性率明显高于肺良性病变。由此可见，DEC1在肺癌的发生发展中存在着一定的作用。我们还发现DEC1在肺癌组织中的表达与许多临床指标，如患者性别、年龄、肿瘤大小、分型、组织学分级、TNM分期及有无淋巴结转移均无关。此结果与Giatromanolaki[5]的研究一致。
缺氧诱导因子1α (HIF-1α)是低氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子。它的活性对维持肿瘤细胞的能量代谢、促进血管生成及促进细胞凋亡起着重要作用，且与肿瘤组织的低氧密切相关[11]。有实验[5，7]表明，在肺癌及食管癌组织中DEC1与HIF-1α表达有关。在肾母细胞癌293细胞及宫颈癌Hela细胞中，DEC1与HIF-1α有较高的亲和力[12]。我们通过发现DEC1在肺癌组织中的表达与HIF-1α呈显著性相关。由此推测，DEC1与肺癌组织的低氧也密切相关，且与HIF-1α相互作用相互影响使肿瘤细胞适应低氧状态而得以快速增殖。
Bcl-2是细胞凋亡调控机制中的一种关键蛋白，高水平的Bcl-2蛋白可抑制细胞死亡延长细胞寿命，是目前公认的抗凋亡基因[12]。Caspase家族成员的激活是细胞凋亡效应期的一个重要的生化事件。Caspase-3是Caspase家族中最重要的成员。大多数触发细胞凋亡的因素最终均需要通过 caspase-3介导的信号传导途径导致细胞凋亡。但在本试验中，我们通过免疫组化发现DEC1在肺癌组织中的表达与bcl-2和caspase-3表达无关。因此我们推测DEC1可能通过不依赖bcl-2和caspase-3的途径影响肺癌细胞的凋亡。
综上所述，DEC1在肺癌的发生发展中起着重要的作用，其表达与HIF-1α有关，且可能通过不依赖bcl-2和caspase-3的途径影响肺癌细胞的凋亡。DEC1与HIF-1α的表达在肺癌组织中的具体关系还有待于进一步探讨。
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