Survivin及COX-2在涎腺腺样囊性癌中的表达研究
发表时间：2014-08-01 浏览次数：1166次
涎腺腺样囊性癌(salivaryadenoideysticcarci-noma,SACC)是口腔涎腺部较为常见的恶性肿瘤之一，转移率高达4000，为口腔领面部恶性肿瘤中转移率最高的肿瘤之一凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)是抑制细胞凋亡的重要成分，Survivin是IAP家族的新成员，是迄今发现最强的凋亡抑制因子，具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重功能，是联系细胞周期和细胞凋亡界面的重要因子。环氧化酶-2<cycloxygenase-2,COX-2)是炎症过程中一个重要的诱导酶。研究表明，COX-2在多种肿瘤组织中过度表达，参与肿瘤发生和发展。本研究采用免疫组化法检测组织中Survivin及COX-2的表达，探讨Survivin及CCX-2与涎腺腺样囊性癌的关系。 1材料与方法 1.1临床资料及切片制备32例涎腺腺样囊性癌组织均取自我院1984-2010年手术切除标本蜡块。患者年龄38一71(均52.7)岁，男11例，女21例。颈部淋巴结转移与否以术后病理检查结果为准。所有病人术前均未接受化疗或放疗，根据TNM国际统一分期法(CC)进行临床分期,且期23例，m+W期9例。组织学分型为管状型6例，筛孔型15例，实体型11例。其中大涎腺17例(腮腺7例，领下腺5例，舌下腺5例)，小涎腺15例。另取15例癌旁正常腮腺组织标本作为对照。蜡块制备5mm厚连续切片，分别用抗Survivin及COX-2单克隆抗体进行免疫组织化学染色，并做常规苏木精一伊红染色。 1.2免疫组织化学染色用切除标本蜡块制备5厚连续切片，分别以抗Survivin及COX-2单克隆抗体进行免疫组织化学染色，并做常规苏木精一伊红染色。鼠抗人Survivin抗体由SantaCruz公司提供，COX-2抗体及SABC试剂盒为武汉博士德生物制品公司提供，3,3一二氨基苯联胺(DAB)为Sigma公司产品，染色方法参照试剂盒说明按SABC法进行分别用正常兔血清和Olmol/I_PBS液取代第一抗体作为替代对照和空白对照。用己证实Survivin及COX-2染色阳性的乳腺癌切片作阳性对照。 1.3Survivin及COX-2的判断标准肿瘤细胞胞浆内出现黄色颗粒即为阳性细胞.选择每张切片组织和细胞形态保持完整的组织区域进行免疫组化染色判断。根据纪小龙等川提供的免疫组化阳性判断标准，按阳性细胞占组织区域内肿瘤细胞的l0及以上判为阳性，否则判为阴性。 1.4统计学处理应用SPSS13.0软件进行数据处理，用卡方检验判断Survivin和COX-2表达与各临床病理因素及两者之间的关系。 2结果 2.1Survivin及CC)X-2的表达与分布32例涎腺腺样囊性癌组织中，有21例表达Sur-vivin,23例(71.880o)表达COX-2，其阳性物质主要位于癌细胞的胞膜或胞浆(图1、图2)，而癌旁正常腮腺组织未见表达。 2.2Survivin及COX-2表达与涎腺腺样囊性癌临床病理因素的关系由表1可以看出病理分型不同的肿瘤中，实体型Survivin及COX-2表达高于管状型和筛孔型，随着肿瘤分期的增加，Survivin及COX-2的高表达率明显增加。 3讨论 细胞增殖和凋亡平衡对于维持细胞内稳态至关重要，细胞凋亡不足为发生基因改变的异常细胞提供生存之机，最终导致肿瘤的发生和演进。因此，研究凋亡因子对肿瘤的发生、发展和预后有重要意义。 Survivin是凋亡抑制蛋自IAP家族新成员;主要通过抑制caspa、caspa、的活性，阻断细胞的凋亡过程。Survivin在胎儿及许多恶性肿瘤中呈高表达，一，习，而在正常组织中呈低表达或不表达。LoMuzio等研究发现，survivin在正常口腔上皮组织中不表达，在低分化和未分化口腔鳞状细胞癌的表达显著高于高分化口腔鳞状细胞癌，并且与口腔鳞状细胞癌的淋巴结转移有关，可以作为口腔鳞癌预后检测指标之一。本研究中腺样囊性癌组织中Survivin阳性表达率为65.63，一般认为实性型腺样囊性癌较腺样及管状型更容易复发和早期转移。本研究显示，实性型腺样囊性癌Survivin阳性表达率高于腺样及管状型，说明Survivin表达在一定程度上反映了肿瘤不良的预后。且期和期涎腺腺样囊性癌中Survivin表达率分别为50%和10000，两者比较差异有统计学意义(PG0.O1)，提示Survivin可能参与了涎腺腺样囊性癌的发展。 环氧化酶(cycloxygenase;COX)是控制前列腺素类化合物产生的重要限速酶。细胞膜的磷脂在磷脂酶的作用下水解出花生四烯酸，在环氧化酶的作用下，花生四烯酸可转变为前列腺素(Prostglandin,PGs)而发挥多种生物学作用。该酶有2种异构形式:COX-1和COX-2oCOX-1为结构型酶，在正常情况下持续产生PGs，维持机体的生理过程COX-2属于诱导型酶，可被多种刺激因素上调，如生长因子(EGF,PDGF,TGF)、细胞因子(IL-1,TNFX>、促腺瘤剂、癌基因、内皮素. Gall少0研究发现，在35例头颈癌患者中，有淋巴结转移的患者COX-2表达较无淋巴结转移者升高更明显，提示COX-2与肿瘤转移有关。本研究显示，实性型腺样囊性癌及111一W期涎腺腺样囊性癌COX-2阳性表达率分别高于腺样、管状型和I一11期涎腺腺样囊性癌，说明COX-2表达反映了肿瘤不良的预后，并参与了涎腺腺样囊性癌的发展。 提示我们可以通过应用COX-2抑制剂来达到抑制肿瘤增殖进展，延缓复发和恶性变。Krysan等，证实，在肺癌组织中，COX与Survivin的表达呈正相关，有研究发现，COX一2与Survivin的表达上调在口腔扁平苔癣向鳞状细胞癌的转变中起着重要作用-1'J,Survivin基因在三氧化二砷诱导腺样囊性癌一M细胞凋亡过程中起着重要作用ns-。本研究发现，在涎腺腺样囊性癌组织中Survivin和COX-2表达存在正相关(PGO.05),提示涎腺腺样囊性癌中Survivin和COX-2的表达有协同作用。以上表明Survivin和COX-2参与了涎腺腺样囊性癌的发生、发展。可作为反映涎腺腺样囊性癌生物学行为的参考指标。 参考文献 李晓光，高慎强，张晓红，等.涎腺腺癌COX-2表达和肿瘤血管生成的研究[J].重庆医学，2006,35(8):707-709. 李晓光高德安.张丽，等.口腔鳞癌COX-2表达和肿瘤血管生成的研究厂[J].北京口腔医学.2006,14(3):164-166
