氧化锆全瓷愈合基台周围龈沟液中ALP含量测定
发表时间：2014-07-31 浏览次数：1050次
跟沟液(gingivalcrevicularfluid,GCF)是跟沟内上皮和结合上皮周围毛细血管的炎性渗出液，在牙周病学的研究中发现，GCF量及其中某些内容物的变化能够反映牙周炎症过程中宿主病原因子的自然反应状况川。目前国内外已有多项研究表明，种植体周围PICF中的多种介质具有和天然牙的GCF相似的特征，能够反映种植体周围组织的健康状态。近年来种植义齿的美学修复备受医生和患者的青睐，因此全瓷基台和全瓷冠日渐成为了种植义齿修复缺失牙的首选，尤其是在美学区域。但是和传统的钦基台相比，全瓷基台对种植体周围组织反应的研究比较少。因此，本研究通过构建种植体周围炎的动物模型，检测氧化错全瓷愈合基台和金属钦愈合基台在结扎前后PICF量及其中ALP的含量变化，初步探讨氧化错全瓷愈合基台与种植体周围组织的关系，为氧化错全瓷基台的临床应用提供参考。 1材料与方法 1.1实验材料TA2商用纯钦(宝鸡市钦城有色金属材料公司)，戊巴比妥钠(Merck，德国)，齿民沟液提取用Whatman3#滤纸(Whatman公司，英国)，ALP试剂盒(ABO，德国)，氧化错全瓷愈合基台(Noble公司，美国)。 1.2实验器械种植机，OlympusAU5400生化分析仪(日本)。 1.3实验动物雌性成年Beagle犬(湖北安陆瑞科森实验动物有限公司提供),1周岁，体重10-11kg,3%戊巴比妥钠全身麻醉，按1m州kg戊巴比妥钠剂量给药。 1.4实验过程 1.4.1种植体、愈合螺丝及钦愈合基台加工和种植体表面处理:将医用纯钦棒加工成直径3.5mm，长度8mm的柱状种植体，种植体靠近底部处制备深0.3mm，宽2mm的环形凹槽;并加工相应的愈合螺丝及钦愈合基台。采用粒度为0.25。50mm的AlpOg颗粒对钦种植体表面进行喷砂粗化，并按照本课题组前期研究报道的方法进行酸蚀处理川，形成粗糙表面种植体。将处理好的钦种植体，愈合螺丝，钦愈合基台放人丙酮、乙醇、去离子水中超声清洗。高温高压消毒后备用。 1.4.2手术过程3只成年Beagle雌性犬，拔除双侧第三第四前磨牙以及第一磨牙。愈合2月后行种植体埋人式植人术，每侧植人4枚种植体，术后静脉给予抗菌素，动物喂以软食。愈合2月后，用环刀做环形切口行二期手术，连接愈合基台，随机连接愈合基台，每侧2个氧化错全瓷愈合基台，2个钦愈合基台(图1)。连接术后2周，采集酿沟液，作为检测指标的时间基线。齿民沟液采集后，一侧为对照组，另一侧作为实验组，在愈合基台颈部结扎4-。丝线，诱导种植体周围炎模型(图2)。对照侧给以口腔卫生维护，1次/2d01月后再次采集种植体周围龄沟液，所有操作均在全麻下进行。 1.4.3PICF采集制备统一规格的滤纸条:将Whatman3T滤纸裁成尺寸相等的宽2mm，长8mm的纸条，置于干净的Eppendorf管中消毒烘干，在电子天平上称重后待用。轻轻去除愈合基台周围的大块菌斑及结石，用无菌棉花卷隔湿种植体，轻轻擦干牙龄及愈合基台表面，1min后，将滤纸条插人种植体颊侧近远中跟沟中，直至遇到轻微阻力，避免血及唾液的污染，30s后取出，立即放人EP管中称重后迅速置于一70℃冰箱中保存。弃去带血或被唾液污染的样本近远中酿沟液量的总和作为每牙位的齿反沟液量。 1.4.4齿良沟液洗提和检测EP管从一70℃冷贮中取出，室温下解冻，每管加人100}L磷酸盐缓冲液(Phosphatebuffersaline,PBS,pH7.4)，室温下震荡10min，低温离心10min(40C,10000r/min)，取上清，用OlympusAU5400生化分析仪测定PICF一ALP的活性水平。 1.5统计实验数据均、表示，采用SPSS16.0软件统计包进行统计分析。同一牙位结扎前后样本均数的比较采用配对样本的t检验，结扎后不同材料的样本均数采用双因素方差分析，以。一0.05为检验水准。 2结果 结扎侧氧化错愈合基台和钦基台在结扎前后比较可见结扎后PICF上升，而非结扎侧则会有所下降;结扎后氧化错全瓷愈合基台和钦愈合基台的PICF量在结扎侧明显高于非结扎侧，且有统计学差异;结扎侧和非结扎侧氧化错全瓷愈合基台的PICF量高于钦愈合基台，但无统计学差异(表1)o结扎后氧化错愈合基台PICF中的ALP水平在结扎侧和非结扎侧含量低于钦愈合基台;结扎后ALP在结扎侧的含量明显高于非结扎侧，且钦愈合基台在结扎侧和非结扎侧还有统计学差异;结扎侧氧化错愈合基台PICF中的ALP水平在结扎后会降低，结扎侧钦愈合基台的PICF中的ALP水平升高，且两者具有统计学差异(表2). 3讨论 和天然牙一样，种植牙周围也有酿沟液。研究表明种植体周围的眼沟在形态和生化特征方面也具有与天然牙相似之处，因此牙周病的一些传统检测指标也被用于牙种植体周围炎的检测。齿尺沟液的量及ALP是牙周病患者眼沟液中的重要几项检测指标，跟沟液量及ALP水平的变化是反映牙周组织疾病的敏感指标。有学者以此类推把这些指标用来研究种植体周围炎，临床研究表明ALP可以作为一种辅助检测方法来监测种植体周围组织的健康状况。 本研究结果发现，氧化错愈合基台和钦基台的PICF量在结扎后会明显上升，可能和丝线结扎造成早期的种植体周围载膜炎症有关，而未进行结扎的一侧PICF量则下降，这可能是口腔卫生清洁的作用。早期的临床研究结果也发现，有炎症的种植体PICF含量明显高于正常种植体。本研究结果表明两种愈合基台的PICF量在结扎侧和非结扎侧均无统计学差异，可能和结扎时间有关系。有研究表明，以狗作为实验动物的牙种植体中，丝线结扎12周后可出现明显的种植体周围骨吸收症状川。本研究结果提示，在非结扎侧的氧化错愈合基台具有和传统钦愈合基台相似的软组织反应，这与一些学者对两种基台的研究结果相似。此外，一些学者用块状基台材料进行的研究也表明，氧化错材料在抗细菌聚集方面比钦具有优势。本研究中结扎侧氧化错基台PICF中的AI_P含量显著低于钦基台，说明此时氧化错基台周围软组织的炎症反应轻于钦基之、本研究结果提示，氧化错基台周围的软组织反应与传统的钦基台类似，在基台周围卫生不良时氧化错基台周围软组织的炎症反应轻于钦基台，但本研究观察时间较短，至于氧化错基台的长期效果，尚需要进一步的动物实验和临床研究来证实。 参考文献 Page R C. Host response tests for diagnosing periodontal dis-eases [J]. J Periodontol，1992，63(4):356一366. Liskmann S, Zilmer M, Vihalemm T, et al. Correlation of pe-n一implant health and myeloperoxidase levels; a cross一sec-tional clinical study [J].Clin Oral Implants Res, 2004，15(5):546一552
