TNF-α、IL-6与高血压肾损害的相关性研究

　　作者：葛利军,杨震,于欣,栾红,魏述军,王全山　　作者单位：宁夏自治区人民医院，宁夏 银川 750021宁夏医科大学，宁夏 银川 750004

　　【摘要】 目的 探讨TNF-α、IL-6与高血压肾损害发生发展之间的关系。方法 将102例高血压患者根据其尿蛋白排泄率检测结果分为3组:单纯高血压组37例，高血压微量蛋白尿组36例，高血压临床蛋白尿组29例。采用放射免疫检测法检测血清TNF-α、IL-6水平。同期选择30例健康体检者作为正常血压对照组。结果 高血压各组血清TNF-α、IL-6水平均高于正常血压对照组(P<0.05)，随着尿蛋白排泄率的增加，TNF-α、IL-6水平呈上升趋势，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。高血压各组血清细胞因子水平与尿蛋白排泄率成正相关(r=0.51，P<0.01)，而与血压水平无相关性。结论 高血压肾损害患者血清TNF-α、IL-6水平明显升高，TNF-α、IL-6可能参与了高血压肾损害的发生和发展。

　　【关键词】 高血压肾损害,肿瘤坏死因子α,白细胞介素6

　　[Abstract] Objective To investigate the changes of the serum levels of necrosis alpha (TNF-α) and interleukin 6 (IL-6) in patients with hypertensive renal damage, whereby to try to study the correlation of TNF-αand IL-6 with the hypertensive renal damage.Methods 102 patients with primary hypertension were divided into three groups according to their urinary albumin excretion rate: normoalbuminuric hypertensive group (n=37), microalbuminuric hypertensive group (n=36) and proteinuric hypertensive group (n=29). Serum TNF-αand IL-6 were measured with radioimmune assay and 30 normotensive persons were selected as control group.Results Serum levels of TNF-αand IL-6 were significantly higher in patients with primary hypertension than those in normotensive control group(P<0.5). Serum levels of TNF-α and IL-6 showed the tendency of increase with the development of urinary albumin excretion. The significance was present among groups(P<0.05). TNF-αand IL-6 were found to have a positive correlation with urinary albumin excretion rate (r=0.79, P<0.01; r=0.75,P<0.01), but no correlation with the level of blood pressure.Conclusion serum TNF-αand IL-6 are remarkably increased in hypertensive patients and may play an important role in the pathogenesis and development of hypertensive renal damage.

　　[Key words] Hypertensive renal damage; tumor necrosis factor alpha; interleukin 6

　　本研究通过检测不同组别高血压患者中细胞因子及尿蛋白水平，探讨细胞因子在高血压肾损害发生发展中的作用。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象：根据1999年世界卫生组织和国际高血压学会(WHO/ISH)原发性高血压诊断标准，选择我院2008年7月至2008年12月原发性高血压患者102例，其中男60例，女42例，平均年龄(56.7±11.2)岁，血压水平为1、2级。根据尿蛋白排泄率测定结果将所有入选患者分为3组:单纯高血压组(尿蛋白排泄率 <20μg/min)37 例，男 22 例，女15例，平均年龄 (51.4±13.4)岁。高血压微量蛋白尿组(20μg/min<尿蛋白排泄率<200μg/min)36例，男19例，女17例，平均年龄(54.8±10.6)岁。高血压临床蛋白尿组(尿蛋白排泄率>200μg/min)29例，男19例，女10例，平均年龄(53.2±13.2)岁。另选健康体检者30例作为健康对照组，男17例，女13例，平均年龄(50.5±11.1)岁。所有入选患者均排除继发性高血压、冠心病、糖尿病、严重心脑血管疾病、肝肾功能不全、心瓣膜病、心力衰竭、自身免疫性疾病、肿瘤、感染性疾病、应用免疫调节剂、内分泌系统疾病及代谢性疾病，所有病例进入研究前停用降压药及其他药物五个半衰期，不吸烟、不饮酒3个月以上。4组间的年龄、性别和体重指数差异均无统计学意义(P>0.05)。

　　1.2 血标本采集：所有患者在入选后清晨空腹静卧半小时后抽取静脉血5ml，立即在4℃条件下3000rpm离心10min，分离血清，-70℃冰箱冻存，同期采取正常血压对照组血清标本并保存，最后统一测定。

　　1.3 实验方法：24h尿蛋白排泄率测定：入选患者留取2次(间隔1周以上)24h尿标本(7:00-次日7:00)，测定总量后取5ml，离心，取上清液置于-20℃冰箱冻存，最后统一用放射免疫法测定尿白蛋白，然后计算出24h尿白蛋白排除率(μg/min)。

　　TNF-α和IL-6测定：用放射免疫检测法测定血清TNF-α和IL-6，操作参照试剂盒说明书进行。TNF-α灵敏度<0.3ng/ml，批内变异系数<5%，批间变异系数<8%。IL-6灵敏度<50pg/ml，批内变异系数<5%，批间变异系数<15%，测定范围为50-4000 pg/ ml，非特异性结合<5%，与TNF-α、IL-2、IL-8、IGF-2、TGF-α均无交叉反应。

　　1.4 统计学分析：全部数据采用SPSS11.5统计软件处理，服从正态分布的计量资料以(±s)表示。在服从正态分布和方差齐的条件下，计量资料的两组间比较采用t检验，三组及三组以上比较用方差分析，方差分析中均数的两两比较用Student Newman Keuls Test及Least Significance Difference Procedure，参数间相关性用直线相关分析。计数资料用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 各组一般临床情况及各参数的比较(表1)：正常血压对照组和高血压各组的年龄、性别构成、体重指数、血糖、血脂、尿素氮及肌酐的差异均无统计学意义(P>0.05)。单纯高血压组和正常血压对照组的尿蛋白排泄率的差异无统计学意义(P>0.05)。高血压微量蛋白尿组和高血压临床蛋白尿组的尿蛋白排泄率显著高于正常血压对照组及单纯高血压组，各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。高血压各组血清TNF-α、IL-6水平均高于正常血压对照组(P<0.05)，且随着尿蛋白排泄率的增加，TNF-α、IL-6水平呈上升趋势，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。

　　表1 正常血压对照组和高血压各组一般情况及各参数的比较(略)

　　注:与正常血压对照组比较，*P<0.01;与单纯高血压组比较，#P<0.01;与微量蛋白尿组比较，+P<0.01

　　2.2 TNF-α和IL-6与尿蛋白排泄率的相关性(图1-2)：高血压各组血清TNF-α和IL-6水平与尿蛋白排泄率成正相关(r=0.79，P<0.01;r=0.75，P<0.01)，而与收缩压、舒张压水平无相关性。

　　3 讨论

　　本研究检测并比较了高血压病患者和健康体检者之间血清TNF-α和IL-6水平，结果表明，在年龄、体重指数、血糖、血脂、尿素氮及肌酐的差异均无统计学意义的情况下，高血压患者血清中的TNF-α和IL-6显著高于正常血压对照组，提示TNF-α和IL-6可能参与了高血压病的发生发展。推断其可能因为高血压病过程中存在着细胞免疫功能的紊乱和炎症反应[1，2]。

　　本研究主要监测并比较了单纯高血压组、微量蛋白尿高血压组和临床蛋白尿高血压组间血清TNF-α和IL-6水平，结果表明临床蛋白尿高血压组的血清TNF-α和IL-6水平明显高于微量蛋白尿高血压组和单纯高血压组，而微量蛋白尿组血清TNF-α和IL-6水平明显高于单纯高血压组。直线相关分析还表明血清TNF-α和IL-6水平和尿蛋白排泄率呈正相关，提示TNF-α和IL-6可能参与了高血压肾损害的发生和发展，是高血压肾病的危险因素和预测因子[3，4]。高血压时增高的IL-6和TNF-α提升了机体的炎症免疫反应，产生过多的免疫复合物，这些免疫复合物可直接增加肾小球通透性，同时可激活补体，产生C3a、C5a等趋化因子吸引炎症细胞，释放炎症因子、蛋白溶解酶、活性氧，导致肾组织损害。IL-6可诱导淋巴细胞在肾间质浸润，在免疫反应介导的肾脏疾病中起着重要作用[5]。TNF-α能使血小板在内皮细胞聚积形成血栓，还可诱发系膜细胞产生组织因子样活性物质，并使前凝血物质活性增加，影响凝血及纤溶系统。有研究发现，TNF-α能刺激肾小球系膜细胞产生氧自由基，从而使氧化脂质代谢产物增多，造成细胞内膜损伤[6]。此外，IL- 6、TNF-α还可促进系膜细胞收缩及增殖[7-9]、基质增生，促进肾小球硬化，并可刺激纤维母细胞增生，产生胶原纤维，导致肾脏纤维化。IL-6还能刺激间质细胞合成和释放胶质酶和其他细胞外蛋白酶，引起基底膜处带负电荷的糖蛋白降解，进而导致血浆中带负电荷的蛋白质渗漏，进而导致蛋白尿的发生。

　　【参考文献】

　　[1] Cotone S， Vadala A， Vella MG. Comparision of tumor necrosis factor and endothelin-1 between essential and renal hypertension patients[J]. J Hum Hypertens，1998，12(6):351-354.

　　[2] Dzielak DJ. The immune system and hypertension[J]. Hypertension， 1992， 19， Suppl 1: I36-I44.

　　[3] Simmons EM， Himmelfarb J， Sezer MT， et al. Plasma cytokine levels predict mortality in patients with acute renal failure[J]. Kidney Int ，2004，65:1357-1365.

　　[4] Pecoits-Filho R， Barany P， Lindholm B，et al. Interleukin-6 is an independent predictor of mortality in patients starting dialysis treatment[J]. Nephrol Dial Transplant ，2002，17:1684-1688.

　　[5] Colutta I，Sold L，Polentarutti N，et al.Selective induction of MCP-1 in human mesangial cells by the IL-6/sIL-6R complex[J].Exp Nephrol，2000，8：37-43.

　　[6] Nanami M，Ookawara T，Otaki Y，et al. Tumor necrosis factor alpha induced iron sequestration and oxidative stress in human endothelial cells[J].Atheroscler Thromb Vasc Biol，2005，25(12):2495-2501.

　　[7] Sterzel RB， Schulze-Lohoff E， Marx M ，et al. Cytokines and mesangial cells[J]. Kidney Int Suppl， 1993， 39 : 26-31.

　　[8] Ruef C， Budde K， Lacy J， et al. Interleukin 6 is an autocrine growth factor for mesangial cells[J]. Kidney Int， 1990， 38(2):249-257.

　　[9] Horii Y， Muraguchi A， Iwano M， et al. Involvement of IL-6 in Mesangial proliferative glomerulonephritis [J]. J Immunol，1989，143( 12):3949-3955.