HPV多重感染与新疆维吾尔族妇女宫颈病变的关系研究

　　作者：张淑英，马磊， 韩凤英， 任爱新 作者单位：解放军474医院妇产科， 乌鲁木齐市第四人民医院外科， 新疆 乌鲁木齐 830013

　　【摘要】 目的：探讨人乳头瘤病毒(HPV)多重感染与新疆维吾尔族(维族)妇女宫颈病变的关系。方法：对2006年6月～2007年10月期间在解放军474医院妇科就诊的138例维族妇女的宫颈细胞标本进行HPV基因型分型检测，比较不同宫颈病变类型组HPV多重感染的比例。结果：本组资料中多重感染的比例为48.68%，最常见类型为HPV16、52及HPV16、58二重感染。HPV多重感染的比例随宫颈病变级别增加而增加，各组与正常组相比，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：HPV多重感染与维族妇女宫颈病变的发生有关。

　　【关键词】 维吾尔族; 人乳头状瘤病毒; 多重感染

　　Correlation of multiple HPV infection and Uygur women cervical dysplasia

　　ZHANG Shu-ying, MA Lei， HAN Feng-ying， et al

　　(Department of Obstetrics and Gynecology, The 474th Hospital of PLA, Urumqi 830013, China)

　　Abstract: Objective: To investigate the role of multiple human papillomavirus (HPV) infections in Uygur women cervical dysplasia. Methods: The cervical samples of 138 Uygur women who visited the our department from June 2006 to October 2007 were randomly selected for 21 HPV subtypes test, and the multiple infection rates in different cervical lesions were calculated. Results: The total multiple infection rate was 48.68%. The most common types were HPV16/52 and HPV16/58 double infection. The multiple infection rates increased with the severity of cervical dysplasia, and were significant higher than the normal group. Conclusion: Multiple HPV infection is associated with the development of Uygur women cervical neoplasia.

　　Key words: Uygur; human papillomavirus (HPV); multiple infection

　　宫颈癌是女性生殖系统中常见的恶性肿瘤之一，我国每年宫颈癌发病人数为131 500例，其中约53 000例死于此病[1]。新疆维吾尔族(维族)妇女宫颈癌患病率为459～590/10万，明显高于汉族(21/10万)与其它民族(P<0.01)[2]。已有调查表明，新疆维族妇女宫颈癌与人乳头瘤病毒16型(HPV16)感染密切相关，其宫颈癌组织中HPV16检出率达77.6%～82.6%[3]。然而HPV多重感染是否与维族妇女宫颈病变的发生有关，笔者未见相关报道。本研究应用导流杂交基因芯片技术(凯普HPV分型)(美国专利号5 741 647和6 020 187)检测维族妇女宫颈上皮内HPV感染基因型，通过分析多重感染在不同级别宫颈病变中的分布情况，探讨HPV多重感染与维族妇女宫颈病变的关系。

　　1 研究对象与方法

　　1.1 研究对象 从2006年6月～2007年10月在解放军474医院妇科门诊行宫颈液基细胞检查的维族患者226例中随机选取138例，年龄20～66岁，平均(36.4±6.7)岁。其中细胞学异常患者76例，平均年龄(35.8±7.8)岁,为异常组;取以往无宫颈病变史，两年内连续液基细胞学筛查无异常者62例，平均年龄(34.1±6.9)岁，为正常组。两组患者平均年龄无统计学差异(P>0.05)。

　　1.2 研究方法

　　1.2.1 宫颈液基薄层细胞学检查 对226例维族女性进行宫颈液基细胞(LCT)检查， 诊断标准采用2001年国际癌症协会TBS诊断系统。

　　1.2.2 HPV基因型分型检测 凯普HPV分型一次检测6、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304等21种基因型，可判断多重感染。对选取的上述138例研究对象，用凯普宫颈细胞收集保存系统采集保存宫颈细胞标本;在非月经期采样，采样前3 d内不用阴道栓剂，前1 d起禁止性生活;标本4℃冰箱保存，2周内检测;过程包括：(1)样本DNA提取:用QIAMin试剂盒(德国，QIAGEN公司)抽提DNA;(2)PCR扩增:将PCR反应试剂及DNATaq酶按比例混合后每反应管加入20 μl，再加入DNA模板2 μl，混合后进行PCR扩增，每一批次同时扩增HPV18阳性对照和阴性对照各1份;(3)导流杂交:凯普医用核酸分子快速杂交仪及配套试剂盒由广州新捷科学仪器有限公司提供。在杂交平台上放入标记有寡核苷酸探针的低密度基因芯片，一次同时检测15个样本。按试剂盒说明进行导流杂交，酶标显色;(4)结果判断:肉眼观察检测结果，阳性点呈现蓝紫色圆点， 根据芯片上HPV分型分布相应的点判断HPV亚型，多点阳性即为多重感染。每一张芯片有PCR反应质控点和杂交显色质控点各一个。

　　1.2.3 宫颈组织病理学诊断 专人负责对上述76例异常组患者进行阴道镜下宫颈多点活检及宫颈管搔刮组织病理学诊断。对活检结果大于等于宫颈上皮内瘤变(CIN) Ⅱ的患者行高频电波刀宫颈环状电圈切除术(LEEP)或冷刀锥切术甚至子宫切除以获取进一步诊断并治疗疾病。以各项诊断中级别最高者作为组织学最后诊断。按组织病理结果，将患者分为慢性炎症组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈鳞癌组(本研究未发现宫颈腺癌病例)。

　　1.3 统计学处理 数据均经SPSS11.0软件包进行处理,采用χ2 检验，检验水准α=0.05。

　　2 结果

　　2.1 正常组和不同病变组HPV总阳性率比较 随着病变级别增加总阳性率逐渐上升，且各病变组与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05),结果见表1。

　　表1 正常组与不同病变组HPV总阳性率(略)

　　2.2 单一感染和多重感染比例及构成各重感染的总体比例 本组资料中HPV阳性患者共76例，单一型别HPV感染的总例数为39例，占51.32%，多重感染37例，占48.68%，多重感染中随合并感染的型别数增加，比例逐渐下降，结果见表2。39例单一型别HPV感染中，以HPV16最常见,共25例，占单一型感染总数的64.10%，其他较常见的依次为：HPV18共7例(17.95%)，HPV31共3例(7.69%)，HPV52和58均为2例(4.17%)。16例二重感染中，最常见的为HPV16合并感染，共8例,占1/2，其次为含HPV52或58者，分别为4例和3例，再次为含HPV18者，共1例。最常见二重感染类型为HPV16、52,共3例，占18.75%，其次为HPV16、58,共2例，占12.50%，HPV18、52共1例，占0.06%。

　　表2 单一感染和多重感染总体比例(略)

　　2.3 不同病变组多重感染比例 多重感染比例随病变级别增加逐渐上升，由正常组的20%升高到鳞癌组的100%，各病变组与正常组相比差异有统计学意义(P<0.05),结果见表3与图1。

　　表3 不同病变组多重感染比例(略)

　　图1 不同病变组单一感染与多重感染比例(略)

　　3 讨论

　　自从发现HPV感染与宫颈癌发病密切相关以来，有关少数民族妇女宫颈病变与HPV感染关系的研究较少。葛崇华[4]在对汉族和维族宫颈癌相关基因谱进行对比分析时发现，宫颈癌的发生存在基因水平上的差异，提示其发病可能与民族有关。本研究发现，在新疆维族妇女宫颈病变中，随着病变级别的增加，HPV感染的阳性率逐渐升高，至CINⅢ和宫颈鳞癌组为100%，结果与大多数文献报道一致[5，6]。本研究显示，新疆维族妇女宫颈病变中HPV多重感染的比例为48.68%，高于陶萍萍等[5]报道的中国汉族妇女宫颈病变中HPV的多重感染率(44.4%)，说明HPV多重感染可能是造成新疆维族妇女宫颈癌患病率明显高于汉族与其它民族的原因之一。新疆维族妇女宫颈病变HPV多重感染主要是二重感染，最常见的为HPV16合并感染，其次为含HPV52或58感染，最常见二重感染类型为HPV16、52，其次为HPV16、58，提示HPV16不仅在新疆维族妇女宫颈病变单一感染中占有极大比例，在多重感染中也极为常见。HPV52及58作为亚洲地区最常见的感染类型之一，在新疆维族妇女宫颈病变二重感染中也可能占有主导地位。本研究还发现新疆维族妇女宫颈病变HPV多重感染率随病变级别增加而增加，各病变组与正常组差异均有统计学意义。一定程度上说明多重感染对新疆维族妇女宫颈病变及宫颈癌的发生发展起促进作用。Ho等[7]认为HPV多重感染者出现持续感染的危险性更大，而HPV的持续感染是宫颈病变发生的原因，因此多重感染易导致宫颈病变，支持本研究结果。综上所述，新疆维族妇女宫颈病变与HPV多重感染密切相关，且随着宫颈病变级别的增加，HPV多重感染率也在增加。本研究结果对新疆维族妇女宫颈癌的病因研究作了新的补充，在一定程度上解释了为何新疆维族妇女宫颈癌患病率远高于汉族和新疆其他少数民族，为预防维族妇女宫颈疾病的发生提供了理论依据。

　　【参考文献】

　　[1] 连利娟.林巧稚妇科肿瘤学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1996.227.

　　[2] 拉莱·苏祖克.不同民族妇女中2727例子宫颈癌的统计学分析[J].新疆医学院学报，1990，9:48.

　　[3] 李庭芳，古力娜·库尔班，王 涛，等.新疆伽师县夏普勒乡妇女子宫颈癌防治研究[J].新疆医学院学报，1996，19:199.

　　[4] 葛崇华.汉族、维吾尔族宫颈癌相关基因谱对比分析研究[J].新疆医科大学学报，2006,29(1)：27-30.

　　[5] 陶萍萍，卞美璐，李 敏，等.HPV多重感染与宫颈病变关系探讨[J].中国妇产科临床杂志，2006，7(2)：94-96.

　　[6] Herrero R,Hildesheim A，Bratti C,et al.Population - based study of human papillomavirus infection and cervical neoplasia in rural Costa Rica[J].J Natl Cancer Inst,2000，92:464-474.

　　[7] Ho GY,Bierman R,Beardsley L,et al.Natural history of cervicovaginal papillomavirus infection in young women[J]. N Engl J Med , 1998,338:423 - 428.