国产rhFSH与果纳芬对排卵障碍患者促排卵的临床观察

　　作者：贺艳坤，徐雯， 卢伟英，周雪梅，黄元华 作者单位：1.海南医学院附属医院生殖医学科,海南省生殖医学中心，海南 海口 570102;2.贵阳中医学院，贵州 贵阳 550000

　　【摘要】目的：比较国产重组人促卵泡激素(rhFSH)(金赛药业)与果纳芬(雪兰诺公司)对排卵障碍的不孕患者促排卵治疗的疗效，评价国产rhFSH 的治疗作用，了解卵泡生长速率及生殖内分泌激素水平变化的规律。方法：将排卵障碍不孕患者 54例随机分为A组34例、B组20例，进行促排卵治疗，A组给予国产rhFSH促排卵，B组给予果纳芬促排卵，观察两组疗效。结果：A、B两组的用药总量、平均每日用药量、平均促排卵天数、HCG日≥18mm卵泡数目、优势卵泡平均生长速率、HCG日血E2、LH、P水平、HCG日子宫内膜厚度、排卵后6d的P值、排卵率、妊娠率、分娩率分别为(1062.5±505.7)(375～2175)IU和(1157.5±470.6) (375～2325)IU; (105.8±28.2)(75～150)IU和(114.9±30.3)(75～150)IU;(10.0±4.3)(5～20)d和(10.4±4.0)(5～20)d; (1.3±0.7)个和(1.3±0.6)个;(1.7±0.2)mm/d和(1.5±0.2)mm/d;(2283.1±2350.0)pg/mL，(6.9±5.4)pg/mL，(1.4±1.2)ng/mL和(2098.2±2454.2)pg/mL，(8.4±5.8)pg/mL，(1.3±0.8)ng/mL;(10.7±0.4)mm和(10.3±0.7)mm;(31.7±37.8)ng/mL和(33.3±29.1)ng/mL; 82.4% 和90.0%;17.6%和25.0%，66.7%和80.0% (P>0.05)。结论:国产rhFSH具有良好的促排卵疗效，身体反应过程一致，作用不弱于果纳芬。

　　【关键词】 重组人促卵泡刺激素;促排卵;卵泡生长速率;不育症

　　The clinical observation of ovulation induction effect with domestic rhFSH and GonalF on ovulation disorders

　　HE Yankun， XU wen，LU Weiying，ZHOU Xuemei， HUANG Yuanhua

　　(1.Guiyang College of Traditional Chinese Medicine Guiyang 550000; 2. Medical Center of Reproduction, Affiliated Hospital of Hainan Medical University Haikou 570102, China)

　　[ABSTRACT] Objective:To compare ovulation induction effect of domestic rhFSH(GenSci) and GonalF(Serono) on ovulation disorders, and evaluate the effect of rhFSH on follicular growth and reproductive hormones. Methods: Fiftyfour infertility women with ovulatory disorde were randomly divided into A and B group. Group A (34 cases) was treated with domestic rhFSH, and group B(20 cases) with GonalF. Results : The total administration, daily dosage, average ovulation days, number of follicles greater than 18 mm, follicular development velocity, blood estrodiol, lutinizing hormone, progesterone level on HCG day, endometrial thickness on HCG day,progesterone level after ovulation for 6 days，ovulation rate, pregnancy rate of group A and B were 1062.5±505.7(3752175)IU VS 1157.5±470.6, (3752325)IU; 105.8±28.2,(75150)IU VS 114.9±30.3,(75150)IU; 10.0±4.3,(520)day VS 10.4±4.0,(520)day; 1.3±0.7VS1.3±0.6; (1.7±0.2) mm/d VS (1.5±0.2) mm/d; (2283.1±2350.0) pg/mL，(6.9±5.4) pg/mL，(1.4±1.2) ng/mL VS (2098.2±2454.2) pg/mL，(8.4±5.8) pg/mL, (1.3±0.8) ng/mL; (10.7±0.4)mm VS (10.3±0.7)mm; (31.7±37.8) ng/mL VS (33.3±29.1) ng/mL ; 82.4% VS 90%; 17.6% VS 25%; 66.7% VS 80%(P>0.05).Conclusion: Domestic rhFSH is as effective as t GonalF.

　　[KEY WORDS] Recombinant human follicle stimulating hormone; Ovulation induction; Follicle growth velocity; Infertility

　　重组人促卵泡激素(recombinant human follicle stimulating hormone, rhFSH)[1]是以真核细胞为载体，将人FSH的α亚基和β亚基DNA编码转入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell， CHO cell )，经CHO cell表达，在体外合成分泌的分子均一、具有完整人类FSH活性的糖蛋白，且不含LH活性，纯度高达99%，FSH活性达12000～13000 IU/mg蛋白[24]，在不孕症促排卵治疗中占有重要的地位。多年来，国内应用的rhFSH均由国外雪兰诺和欧加农生产，金赛药业经过研制，生产出国产rhFSH。本文对其促排卵效果和卵泡生长规律进行了研究。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　搜集2008年6月～2009年4月海南医学院附属医院生殖医学科就诊的54对不孕夫妇，自愿签署知情同意书，并同意按照研究方案要求进行用药和接受评估，符合以下条件：女方21～38岁，BMI<28kg/m2，符合WHOⅡ类无排卵;入选时内分泌激素调整在正常范围内，且3个月内未使用促性腺激素治疗;HSG或腹腔镜检查证明双侧输卵管通畅;甲状腺功能无异常;无卵巢性肿瘤，子宫无肌瘤或子宫肌瘤不影响内膜功能;血尿常规、肝肾功能、空腹血糖、胰岛素、胸片、心电图正常;男方6个月内2次精液常规正常或符合IUI标准。

　　1.2 分组

　　实验采用阳性平行对照、随机、非劣效性双盲的实验研究。A组34例，使用国产rhFSH促排卵;B组20例，使用果纳芬促排卵。

　　1.3 方法

　　1.3.1 促排卵用药

　　月经第21天盆腔B超无异常发现后，月经或激素撤退性出血第3～5天根据B超卵巢储备卵泡情况，每日肌注rhFSH(A组国产rhFSH，B组果纳芬)，起始计量为75～150IU,连续应用4～5d后行阴道B超监测卵泡发育，根据卵泡发育情况，调整rhFSH量，酌情加量37.5～150IU，至卵泡直径达18mm。当卵泡直径>14mm，卵泡生长速度<1mm/d时，加用促性腺激素(HMG) 75IU/d(丽珠集团)。

　　1.3.2 卵泡发育检测

　　阴道超声卵泡测量、尿酶联免疫LH 峰及检测按卢伟英等[5]介绍的方法进行。在月经第3～5天、卵泡直径达18mm、排卵后6～9d3个时间点检测血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)(贝克曼ACCESS化学发光法)。当卵泡直径>18mm且LH阴性时，使用HCG诱发排卵，注射HCG72h内复查B超查看排卵。

　　1.3.3 受孕与妊娠处理

　　在注射HCG后36h内同房，少弱精子症但符合IUI标准者行IUI[6]。本实验中，IUI术注入宫腔活精子数平均8.4× 106个/人。排卵后6～9d检测血清P值，确诊有排卵后予黄体酮20mg/d黄体支持。B超示排卵2周后晨尿妊娠试验阳性，且血βHCG递增，诊断生化妊娠，继续给予黄体酮15d，B 超见胚囊和胚胎心管搏动者诊断为临床妊娠。

　　1.4 统计学处理

　　数据采用SPSS13.0统计软件包处理。统计方法包括t 检验，秩和检验，卡方检验，回归分析。检验水准α=0.05。

　　2 结果

　　2.1 一般情况

　　两组在不孕年限，年龄，体重指数，启动日LH/FSH比值等一般情况之间无显著性差异(P>0.05)(表1)。表1 两组一般情况的比较(略)

　　2.2 用药情况

　　A、B两组之间rhFSH用药总量、平均刺激天数、日均rhFSH量、HCG日子宫内膜厚度，各参数之间无显著性差异(P>0.05)(表2)。A、B两组辅助应用HMG的情况:加用HMG人数的比例、人均用HMG总量，刺激天数，日均HMG量上无显著性差异(P>0.05)(表3)。表2 两组用药情况的比较(略)表3 两组加用HMG用药情况的比较(略)

　　2.3 卵泡生长情况

　　优势卵泡数量：两组之间平均优势卵泡数目比较无显著性差异(P>0.05);两组优势卵泡平均生长速率见表4。

　　卵泡的生长曲线: 以两组54例最大的卵泡为优势卵泡,将每个卵泡的生长速率平均， 分析优势卵泡直径8～17mm的生长趋势,发现卵泡生长速率与直径有线性回归关系，其生长曲线模型(图1)为 y =e(0.63194+0.084825*X)。经校正的R2为0.45914，标准误为0.29565，P=0.333。将>14mm优势卵泡平均生长速率的频数分布通过统计分析，发现>14mm优势卵泡生长速率为(2.1±0.3)mm/d，分布在1.5～2.3mm/d。表4 HCG日两组优势卵泡数目及生长速率的比较(略)

　　2.4 伴随激素的变化

　　两组E2、LH、P比较在基础日，HCG日，排卵后6～9d比较均无显著性差异(P>0.05)(表5)。

　　2.5 临床结局

　　两组排卵率、妊娠率、并发症发生率差异均无统计学意义(P>0.05)(表6)。A、B组分娩率分别为66.7%(4/6)、80.0%(4/5),差异无统计学意义(P>0.05)。表5 两组E2、LH、P的比较(略)表6 两组临床结局的分析(略)

　　3 讨论

　　促性腺激素(gonadotropin, Gn)药物促排卵在不孕症治疗与人类辅助生殖技术实施中具有重要的地位[711]。Gn包括FSH、LH、HCG,FSH及LH是主要参与卵泡生长发育调控的Gn，特别是前者。含FSH的促性腺激素产品有HMG、uFSH、uFSHHP和rhFSH(目前主要为进口)。本产品是国内研制出的首类rhFSH，是将rFSHa亚基cDNA基因和rFSHa亚基内含子基因与rFSHβ亚基基因，分别导入真核表达载体中，共转染至CHO cell，采用无血清悬浮培养表达的方式，避免了血清中不明成分带来的影响，经CHO cell表达，形成活性a、β二聚体，经过了纯化和鉴定,分离提取的Gn(吉林大学)[24]。与默克雪兰诺公司的果纳芬(GonalF)具有相同的基因和表达细胞，具有一致的活性及分子结构均一性，但表达载体完全不同，其生物学活性与功能与雪莱诺产品GonalF完全相同。

　　本研究使用国产rhFSH和果纳芬2种rhFSH促排卵，在不孕年限，年龄，体重指数，基础日LH/FSH比值，加用HMG用量，IUI活精子数无差异的情况下，两组用药总量、平均促排卵天数、平均每日用药量、HCG日子宫内膜厚度、HCG日两组优势卵泡数目、E2、LH、P水平、排卵率、妊娠率、分娩率比较无显著性差异，两组的并发症比较无显著性差异。研究所得数据与果纳芬临床观察数据报道一致[7，12],表明国产rhFSH与果纳芬有相同的促排卵疗效和安全性。

　　近年来普遍认为，在卵泡生长晚期加用小剂量LH有利于卵泡的成熟[13，14]。临床上常在卵泡生长晚期加入小剂量HMG。从本研究结果来看，A、B组分别有4例合用HMG，用药人数、用药总量与用药天数之间均无明显差异(P>0.05)，所以可以认为使用rhFSH促排卵同时在卵泡生长晚期加用小剂量HMG不影响两者疗效判定。

　　综上所述，国产rhFSH具有与果纳芬一致的分子结构的均一性与活力的统一性，身体反应过程一致，具有良好的促排卵疗效，作用不弱于果纳芬。

　　【参考文献】

　　1 Keene JL. Total and lipidbound sialic acid levels in sera from patients with cancer[J].Clin Chem Acta，1982,118:327.

　　2 郝鹏，金磊.rhFSH工程细胞株的筛选及表达条件的优化[D].吉林大学，2008.

　　3 刘慧娟，裴瑾.重组人促卵泡激素的纯化及鉴定[D].吉林大学，2007.

　　4 陈宁，金磊.重组人促卵泡激素的质量研究[D].吉林大学,2008.

　　5 卢伟英,刘西茹,黄元华，等.718周期夫精宫腔内人工授精临床因素分析[J]. 海南医学院学报，2006,12(4):310313.

　　6 王竹晨，易庭华，甘辉梅，等.密度梯度离心法优选精液22周期宫腔内人工授精的临床分析[J]. 临床医学，2008, 28( 7):108109.

　　7 邓成艳，苏珊.重组基因的促卵泡生长素诱导多囊卵巢综合征患者排卵的临床分析[J].中华妇产科杂志，2003，38(1)：3739.

　　8 Matorras R, Recio V,Corcostegui B,et al. Recombinant human FSH versus highly purified urinary FSH: a randomized study in intrauterine insemination with husbands’ spermatozoa[J]. Hum Reprod,2000,15(6):12311234.

　　9 徐仙，赵淑梅，Cabrera RA.uFSH、hpFSH和rhFSH在体外授精与卵泡浆内单精子注射妊娠结局的回顾性分析[J].宁夏医学杂志，2006，28(2)：8385.

　　10 MedenVrtovec H,MocnikRoznik S,Tomazevic T，et al. Recombinant FSH vs. urinary FSH for ovarian stimulating in vitro fertilization[J]. J Reprod Med,2003,48(10):799803.

　　11 叶虹，黄国宁.人基因重组促卵泡激素与高纯度人尿促卵泡激素在控制性超排卵中的疗效比较[J].中华妇产科杂志，2000，35(9)：562563.

　　12 苏艳华. 基因重组卵泡刺激素对 PCOS不孕患者促排卵治疗的疗效观察[J]. 福建医药杂志,2008 ,30(2 ):27,37,47.

　　13 Amer SAK. Polycystic ovarian syndrome: diagnosis and management of related infertility[J]. Obstet Gynaecol and Reprod Med,2009,19(10):263270

　　14 黄元华,卢伟英,徐雯,等. 超排卵药物中黄体生成素剂量对体外受精胚胎移植的影响[J]. 中华实用医药杂志, 2004,4:14701472.