P53蛋白在卵巢上皮肿瘤组织中的表达及意义
发表时间：2010-06-08 浏览次数：408次
作者：王雪鹤，樊希芬，王璇 (青岛大学医学院松山医院妇产科，山东 青岛 266021)
[摘要]目的 探讨P53蛋白在卵巢上皮肿瘤组织中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法分别检测83例卵巢上皮肿瘤病人P53蛋白的表达，分析其与病理类型、细胞分化程度及临床分期的关系。结果 卵巢上皮肿瘤恶性组P53蛋白阳性表达率明显高于交界组及良性组( χ2 =3.857、21.776，P <0.01);恶性组中P53蛋白阳性表达率与组织类型无关( χ2 =0.005，P >0.05);G1 、G2 级阳性表达率显著低于G3 级( χ2 =5.154、7.540，P < 0.05 );临床Ⅰ、Ⅱ期阳性表达率低于Ⅲ、Ⅳ期( χ2 =5.236，P <0.05);P53蛋白阳性病人5年生存率显著低于P53蛋白阴性的病人( χ2 =4.919，P <0.05)。结论 P53蛋白表达的检测对卵巢上皮肿瘤良、恶性的鉴别及卵巢上皮性癌预后的评估有一定的意义。
[关键词] 卵巢肿瘤;蛋白质P53;免疫组织化学
EXPRESSION OF PROTEIN P53 IN EPITHELIAL OVARIAN TUMORS AND ITS SIGNIFICANCE
WANG XUE-HE， FAN XI-FEN， WANG XUAN
(Department of Gynaecology and Obstetrics， Songshan Hospital of Qingdao University Medical College， Qingdao 266021， China)
[ABSTRACT]ObjectiveTo investigate the significance of protein P53 expression in the ovarian epithelial tumor. Methods Immunohistochemical method was applied to detect the P53 expression in 83 patients ovarian epithelial tumor. The relationship of P53 expression with pathological type， cell differentiation， and clinical staging was analyzed. ResultsP53 expression in malig-nant group was significantly higher than those in borderline and in benign group ( χ2 =3.857，21.776; P <0.01). The P53 expres-sion in malignant group was irrelevant to histological type ( χ2 =0.005， P >0.05); it was evidently less expressed in G1and G2groups than in G3group ( χ2 =5.154，7.540;P <0.05 ); its expression in stages Ⅰ and Ⅱ was less than that of stages Ⅲ and Ⅳ ( χ2 =5.236，P <0.05). The 5-year survival rate in patients with P53 positive was less than those with P53 negative ( χ2 = 4.919，P <0.05). ConclusionThe detection of P53 expression is of certain significance in differential diagnosis between malignant and nonmalignant epithelial ovarian tumor， and in assessment of the prognosis of ovarian carcinoma.
[KEY WORDS]ovarian neoplasms; protein P53; immunohistochemistry
卵巢肿瘤是女性生殖器常见肿瘤，卵巢癌病死率居于妇科恶性肿瘤之首，其中卵巢上皮性癌占原发性卵巢肿瘤的50%～70%，恶性者占卵巢恶性肿瘤的85%～90%[1]。在肿瘤的发生过程中，抑癌基因功能表达是目前最常检测到的变化之一，而p53是目前研究最深入的抑癌基因之一。正常p53基因型为野生型，其表达的野生型P53蛋白半衰期短，应用免疫组化的方法检测不到，突变型p53基因为致癌基因，它所表达的突变型P53蛋白半衰期长，通过免疫组化法可检测到。因此，通过对P53蛋白抗体的检测，可间接证明突变型p53基因的存在[2，3]。本研究采用免疫组化法检测卵巢上皮肿瘤组织中P53蛋白表达，探讨其与肿瘤性质及预后的关系。现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 标本来源 卵巢上皮性肿瘤标本83例，均来自我院1998年7月～2000年10月住院的卵巢肿瘤病人，年龄18～72岁，平均51.4岁。术前无放疗及化疗史，经术后病理证实为卵巢上皮性肿瘤。其中良性肿瘤26例，交界性上皮瘤7例，上皮癌50例(浆液性腺癌28例，黏液性腺癌22例)。
1.2 检测方法 将标本固定于40 g/L多聚甲醛溶液中，4 ℃下24 h常规梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋。切片厚4 μm，免疫组化SP法染色检测P53蛋白的表达。所使用试剂P53蛋白单克隆抗体及SP试剂盒购自福建新生物技术有限公司，按其使用说明书操作。用已知P53阳性的鼻咽癌切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。
1.3P53蛋白阳性的评价标准 P53蛋白阳性细胞核内有棕色颗粒状物质。依照阳性细胞数的多少分类如下。阴性(-):细胞核中未见染色颗粒;弱阳性(+):细胞核内仅见浅而淡的染色颗粒;中度阳性( ):切片中<50%的细胞核见到染色颗粒;强阳性( ):切片中≥50%的细胞核见到染色颗粒。
1.4 统计学处理 采用SPSS 11.0软件进行 χ2检验。
2 结果
2.1P53蛋白表达与临床病理特征的关系 恶性组P53蛋白阳性表达率明显高于良性组及交界组，差异有显著性;P53蛋白阳性表达率与组织类型无关;在不同的组织病理分级中，低分化病人P53蛋白阳性表达率高于高分化和中分化病人;临床分期Ⅰ、Ⅱ期病人P53蛋白阳性表达率低于Ⅲ、Ⅳ期病人。见表1。
表1 P53蛋白表达与卵巢上皮性肿瘤病理特征的关系(略)
2.2 预后分析 本组50例卵巢上皮癌病人，除2例失访外，其余48例病人都有完整的随访资料，随访率为96%。P53蛋白阳性病人的5年生存率为29.62%，P53蛋白阴性病人的5年生存率为60.86%，二者比较差异有显著性( χ2 =4.919，P <0.05)。
3 讨论
抑癌基因p53位于人17号染色体的短臂上，基因组DNA长约20 kb，编码一个由393个氨基酸组成的核磷酸蛋白[4]。P53蛋白对复杂的DNA损伤 应答系统进行调控，起转录因子作用。正常细胞中P53蛋白的表达量很低，在细胞DNA损伤时，p53转译水平会升高，使细胞停滞于G1 期进行DNA修复，如果不能完成DNA的修复，可促其走向凋亡[5，6]。当p53基因发生突变，表达的突变P53蛋白不但丧失了正常P53蛋白的抑癌功能，还具有直接转化细胞、促进肿瘤发生的功能，并能与野生型P53蛋白结合寡聚合物，从而阻止了野生型P53蛋白的抑癌功能，促进了肿瘤的发生。因此，临床上p53基因的突变和突变蛋白的检测对肿瘤的发生有一定的诊断意义[7～9]。本文研究结果显示，P53蛋白表达与卵巢上皮性肿瘤的良、恶性有关，与肿瘤细胞的分化程度、病人的临床分期和预后有关，与恶性肿瘤的病理类型无关。P53蛋白表达能够作为对卵巢肿瘤性质及卵巢上皮性癌病人预后判断的一个指标。
[参考文献]
[1] 丰 有吉.妇产科学[M]. 北京:人民卫生出版社， 2002:294-298.
[2] SHERIDAN E， SILCOCKS P， SMITH J， et al. p53 mutation in a series of epithelial ovarian cancers from the U.K， and its prognostic significance[J]. Eur J Cancer， 1994，30(11):1701-1706.
[3] ELTABBAKH G I I， BELINSON J L， KENNEDY A W， et al. p53 over expression is not an independent prognostic factor for patients with primary ovarian epithelial cancer [J]. Cancer， 1997，80(5):892-895.
[4] HOLLSTEIN M， SIDRANSKY D， VOGELSTEIN J， et al. p53 mutations in human cancers[J]. Science， 1991，49(3):253-256.
[5] 尤 宗兵，郭燕燕，曹泽毅. 野生型p53 基因转染对卵巢细胞系SKOV-3 生物学行为的影响[J].中华妇产科杂志，1997，32(7):715-717.
[6] RIGHETTI S C， DELLA T G， PILOTTI S， et al. A compar-ative study of p53 gene mutation protein accumulation and re-sponse to cisplatin based chemotherapy in advanced ovarian carcinoma [J]. Cancer Res， 1995，5(12):1345-1348.
[7] LEVINE A J， MOMAND J， FINLAY A. The p53 tumor sup-pressor gene [J]. Nature (Lond)， 1991，351:452-456.
[8] VANMEIR E G， POLVERNI P J， CHAZIN V R， et al. Re-lease of an inhibitor of angiogenesis upon induction of wild type p53 expression in glioblastoma cell[J]. Nat Genet， 1994，8:171-176.
[9] 孙 衍增，牛兆山. P53蛋白和增殖细胞核抗原在前列腺癌中的表达及意义[J].青岛大学医学院学报，2001，37(4):309-311.
