PTEN、P27在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

作者:薛菊辉,陶潜,鲁晓燕 

作者单位：（江苏省南通市第一人民医院，南通大学第二附属医院妇产科，南通226001）

     【摘要】  目的：探讨抑癌基因PTEN与细胞周期调控因子P27在子宫内膜癌中的表达，探讨其临床意义。方法：采用免疫组化法对正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生各20例，子宫内膜癌50例及子宫内膜癌旁组织50例中PTEN及P27的表达进行检测。结果：PTEN在正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌旁组织及子宫内膜癌中阳性表达率逐渐下降，P27在子宫内膜癌中阳性率为34%。PTEN、P27皆与组织学分级有关（P＜0.01）。结论：PTEN基因失活和P27蛋白缺乏参与了子宫内膜癌的发生、发展，而且与癌细胞的分化有关。

【关键词】  子宫内膜癌； PTEN； P27

    Relationship between PTEN/P27 and endometrial carcinoma

    XUE Juhui, TAO Qian, LU Xiaoyan      （Department of Obstetrics and Gynecology, Nantong First People's Hospital, the Second Affiliated Hospital of Nantong University, Nantong 226001）

    [Abstract]   Objective：To study the expression and its clinical significance of PTEN and P27 in the pathogensis of endometrial carcinoma. Methods: A specific and sensitive immunohistoche mical S-P assay was used to detect the expressions of PTEN and P27 in paraffin-embedded sections of 20 cases of normal endometrium，endometrial hyperplasia and atypical hyperplasia of endometrium, and 50 samples of endometrial carcinoma and its nearby tissue respectively. Results：The positive rates of PTEN in normal proliferative endometrium , endometrial hyperplasia , atypical endometrial hyperplasia , endometrial carcinoma and its adjacent tissue were gradually lowered . The difference was significant . The positive rate of the aberrant expressions of P27 was 34%.In endometrial carcinoma the positive rate of  PTEN or P27 expression was significantly related to the cell grade（P＜0.01）.  The difference was significant. Conclusions: Inactivation of PTEN and absence of P27 may play some roles in the carcinogenesis and development of endometrial carcinoma and its cell differentiation.

    [Key words]   Endometrial carcinoma；Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten；P27

    子宫内膜癌近年发生率呈上升趋势，尽管其早期诊断和预后相对较好，但是它的发生的分子机制尚不清楚。PTEN（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten）是近年来发现的具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因[1]。P27是细胞周期调控核心机制—细胞周期素（cyclins）—细胞周期素依赖性蛋白激酶（CDKs）—细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂（CDKIs）网络调控系统中CDKIs中的一员[2]。本文采用免疫组化法，对我院1996年1月~2005年12月收治的50例子宫内膜癌进行PTEN和P27检测，探讨其在子宫内膜癌中的发生、发展中的作用和临床意义。

    1   材料与方法

    1．1   临床资料   子宫内膜癌患者50例，年龄21～85岁，平均56.25岁，选取同期诊刮后正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生各20例（子宫内膜癌旁组织50例），子宫内膜癌患者均行广泛或次广泛子宫切除加盆腔淋巴结清扫，术前未经任何治疗，病例均经病理证实。

1．2   检测方法   子宫内膜癌及相应癌旁组织、正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生组织，经4%中性甲醛固定。常规石蜡包埋，连续切片，切片厚5 μm，经两名高年资病理科医师复片。PTEN和P27蛋白采用免疫组织化学染色SP法，二氨基联苯胺（DAB）显色。PTEN多克隆抗体和P27单克隆抗体均为即用型抗体，购自福州迈新生物公司。一抗为Ket-S710,试剂用已知阳性的肺鳞癌作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。免疫组化结果判断：细胞胞核、胞浆染成棕黄色为阳性细胞。光镜观察10个高倍视野，阳性细胞数<10%为阴性（-），10%～50%为弱阳性（+），>50%为强阳性（++）。

    1．3   统计学方法   所有资料采用SPSS10.0统计软件，计数行χ2检验和Fisher’s精确检验，P＜0.05示差异有统计学意义。

    2   结      果

    2.1   不同子宫内膜组织中PTEN、P27的表达   免疫组化结果显示PTEN主要分布于正常子宫内膜和子宫内膜癌细胞的细胞浆中，部分胞核着色，而P27定位于细胞核，个别胞浆着色。不同内膜组织中PTEN、P27的表达情况见表1。P27在子宫内膜癌中的阳性表达率与在子宫癌旁组织、子宫不典型增生的表达比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

    2.2   PTEN、P27与子宫内膜癌临床病理特点的关系   见表2。

    3   讨      论

    PTEN，又称MMACI基因，定位于染色体10q23，由9个外显子组成，编码450个氨基酸组成的蛋白质，相对分子质量为5000～50000，具有双重磷酸酶活性。主要是通过脂质磷酸酶活性即PIP3脱磷酸，降低细胞内的PIP3水平，阻断Akt—蛋白激酶B(PKB)途径，影响其下游通路，包括G1期CDK抑制基因P27、BAD等的磷酸化水平使细胞周期阻断在G1期或促使细胞凋亡，对细胞的生长起负调节作用[3]。P27定位于染色体12pI3,含两个外显子和两个内含子，编码一个含198个氨基酸的蛋白质，属于CDKI中KIP/CIP家族中的一员[4]。P27与cyclinE-CDK2复合物结合，抑制cyclinE-CDK2复合物的活性，cyclinE-CDK2浓度是细胞通过G1→S限制点最关键的因素。P27是潜在的肿瘤抑制基因。P27的下调和CDK2的激活都促使细胞恶变，正常浓度P27蛋白的保持是其抗恶变作用的基础[5]。

    本研究发现PTEN主要分布于正常子宫内膜细胞浆中，在正常子宫内膜、子宫内膜增生过长、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌旁组织、子宫内膜癌中的阳性表达率分别为100%、95%、65%、66%、42%，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01），与国内张育军[6]报道的在正常子宫内膜及子宫内膜癌中的阳性表达率为100.0%、43.3%较为接近。子宫内膜癌旁组织、子宫内膜不典型增生较子宫内膜癌中的阳性表达率明显上升（P<0.05），PTEN在子宫内膜癌G1、G2、G3中阳性表达率明显下降（P<0.01）。与肌层浸润深度、手术病理分期、淋巴结转移无关,提示PTEN蛋白表达可能是正常子宫内膜生长必要因素之一，抑癌基因PTEN的表达缺失可能使子宫内膜生长失控，在子宫内膜癌的发生发展中发挥一定作用。P27在子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌旁组织较子宫内膜癌中的阳性率无明显变化（P>0.05），而正常子宫内膜、子宫内膜增生过长阳性表达率明显上升（P<0.01）。提示P27在子宫内膜癌中的表达远远低于正常子宫内膜及子宫内膜增生过长。P27在子宫内膜癌G1、G2、G3阳性率明显下降（P<0.01），与肌层浸润深度、淋巴结转移无关（P>0.05）。本研究发现子宫内膜癌中 PTEN与 P27 间存在正相关趋势，表明PTEN失活可能引起P27表达异常，从而导致细胞周期失控，参与子宫内膜癌的发生、发展。因此，采用免疫组化法联合检测PTEN 、P27有助于子宫内膜癌以及癌前病变的早期诊断。

【参考文献】  [1] Li L, liu F, Ross A. PTEN regulation of netural development and CNS stem cells[J]. Cell Biochem, 2003,88(1):24-28.

[2] Mycum LR, Smith LM, Farley JH, et al. The role of P27 in endometrial carcinoma[J]. Gynecol Oncol, 2005,81（2）：242-246.

[3] Cai XM, Tao BB, Wang LY, et al. Protein phosatase activity of PTEN inhibited the invasion of glioma cells with epidermal growth factor neceptor mutation type 3 expresion[J]. Int J Cancer,2005,117(6):905-912.

[4] 侯振江，张宗英. P27基因在肿瘤研究中进展[J]. 国外医学临床生物与检验学分册，2005，26（12）：960-962.

[5] 郭瑞霞 ，王海燕，史惠蓉，等.PTEN和P27在子宫内膜癌中的表达[J]. 中国妇产科临床杂志， 2004，1（5）：30-32.

[6] 张育军,魏丽惠. 肿瘤抑癌蛋白PTEN、P53在子宫内膜癌组织中的表达[J]. 中国妇产科临床, 2001,2(4):230-232.