５９例小儿巨细胞病毒感染ＩＬ－２检测分析
发表时间：2014-10-20 浏览次数：1058次
人巨细胞病毒(CMV)是小婴儿及免疫低下者较常见和严重的病原之一。我国是CMV感染的高发地区，孕妇感染阳性率高达95%左右，新生儿出生时经产道吸入CMV的分泌物或出生后接触母亲CMV感染的母乳、唾液等是小儿CMV感染重要途径[1]。小儿免疫系统功能状态可能与巨细胞病毒感染相关，为探讨小儿巨细胞病毒感染与小儿免疫功能的关系，笔者观察了59例巨细胞病毒感染小儿临床症状及白细胞介素-2水平情况。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料：观察组为2011年1～12月在我院就诊151例疑似巨细胞病毒感染的小儿，进行尿CMV-DNA荧光定量检测及血清CMV-IgM抗体检测，年龄2d～22个月。中位年龄6.7个月。其中男37例，女22例，男女比例为1.68∶1。对照组为30例健康体检儿童，年龄10d～24个月，中位年龄7.8个月，男16例，女14例，男女比例为1.14∶1。全部对照组病例尿CMV检测及血清CMV-IgM均为阴性。
1.2 CMV-DNA定量分析：留晨尿1ml于无菌密闭的试管中送检，应用博日line-geneFQ-PCR仪，中山大学达安基因股份有限公司CMV检测试剂盒进行检测。标本处理及检验过程严格按照试剂盒要求进行尿CMV-DNA荧光定量检测。
1.3 CMV-IgM抗体检测：应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测患儿血清中CMV-IgM抗体(深圳市萃智生物工程有限公司试剂盒)。实验过程严格按照试剂说明书进行。
1.4 IL-2浓度检测：IL-2检测试剂盒购自法国DIACLONE公司。采59例巨细胞病毒感染及30例对照组小儿静脉血各1ml，离心2500转/min，留取上清即血清，-20℃保存待用;检测方法按照说明书进行。酶标仪上450nm读原始数据。根据标准品做出标准曲线，计算样品含量。
1.5 统计学处理：IL-2检测浓度用均值±标准差(x±s)表示，均数比较采用t检验。
2 结果
2.1 巨细胞病毒DNA检测及CMV-IgM抗体结果：151例疑似巨细胞病毒感染小儿病例中检出巨细胞病毒DNA阳性病例59例，CMV-DNA浓度在6.02×102～9.80×107copy/ml之间，基因定量值中位数为5.61×104copy/ml。CMV-IgM抗体阳性48例。4例较重病例诊断婴儿肝炎综合征，巨细胞病毒感染诊断标准参照文献[2]。所有患儿均有不同程度的临床症状，表现非生理性黄疸51例，即生理性黄疸持续不退>15d，或2～3个月小儿生理性黄疸消退后又出现，并且直接胆红素明显增高。16例小儿伴有消化道症状，排不消化便或稀便及小儿伴有呕吐等;24例小儿伴有呼吸道症状，表现为吐沫、咳嗽等;9例为低出生体重儿;41例小儿伴有贫血(RBC<3.5×1012/L);9例小儿伴有血小板减少;49例肝功能转氨酶增高;36例小儿胆红素以直接胆红素增高为主。 本文检测了151例疑似CMV感染病例，CMV-DNA检测阳性提示，CMV感染者59例，阳性率为39.07%(59/151)，CMV-IgM阳性48例，阳性率31.79%(48/151)。CMV-IgM较CMV-DNA阳性检测率低。临床表现以小婴儿黄疸为主要的症状者，占全部病例的86.64%(51/59)，提示小婴儿CMV感染时，黄疸可能是主要临床表现之一。此外，本文巨细胞病毒感染小儿临床症状还包括有不同程度的消化道症状、呼吸道症状及贫血、血小板减少、肝功能异常;且低出生体重儿占一定比例。
2.2 血浆IL-2检测结果：59例巨细胞病毒感染小儿血浆IL-2浓度及30例健康对照组小儿IL-2浓度比较，观察组平均IL-2浓度水平低于对照组，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。
3 讨论
巨细胞病毒(CMV)感染十分常见，多为潜伏感染，在绝大多数免疫正常个体，常呈无症状感染，仅少数在免疫抑制个体，胎儿和幼小婴儿可出现明显病症，引起临床症状，先天性CMV感染患儿中10%出生时有症状，90%出生时无症状[3]，以肝炎、肺炎多见[4]。 IL-2是抗炎性反应的细胞因子，在机体免疫网络中起调节作用，它能激活其他免疫细胞，特别是诱导T淋巴细胞的增生，促进B淋巴细胞的免疫反应以及单核巨噬细胞和NK细胞的增生，产生细胞因子与免疫活性。IL-2参与细胞毒性T细胞(CTL)介导的细胞免疫，在抗细胞内感染，如病毒感染中发挥重要的作用[5]。因此，IL-2在淋巴因子调节免疫反应中起着重要作用。本文检测了CMV感染小儿的IL-2水平，与对照组相比，CMV感染组小儿IL-2水平低下，且临床症状重合并多脏器损害者，IL-2水平减低明显。IL-2浓度的变化反映了机体免疫系统的功能状态，提示CMV感染患儿存在疫功能低下。小儿CMV感染患者IL-2水平低，也可能由于CMV感染抑制IL-2的产生，从而削弱机体的细胞免疫反应，机体免疫功能紊乱。 本文所检测标本为尿液CMV-DNA浓度，多脏器损害者CMV-DNA检测浓度较高，但部分CMV-DNA检测浓度较高者，除伴有肝功能(例如转氨酶)的改变，不伴随重症的临床症状和体征，可能与研究所采用标本来源有关，尿液标本CMV-DNA含量高，提示排CMV病毒量高，而多脏器损害还需综合临床的总体症状进行诊断。本文4例临床诊断为肝炎综合症的患儿IL-2水平减低明显，免疫功能不同可能导致临床症状轻重程度不同，需扩大样本进一步研究。
4 参考文献
[1] 杨锡强，易著文.儿科学[M].第6版，北京：人民卫生出版社，2004：146.
[2] 方 峰.巨细胞病毒诊断方案[J].中华儿科杂志，1999，7(33)：441.
[3] 刘利荣.巨细胞病毒感染婴儿的随访观察[J].吉林医学，2012，33(1)：178.
[4] 姚 敏，马增凤.荧光定量聚合酶链反应产前诊断巨细胞病毒感染的临床应用[J].中国妇幼保健，2008，29(23)：4109.
[5] 刘 愉.毛细支气管炎患儿免疫球蛋白及白介素2浓度的检测[J].吉林医学，2008，7(29)：567.
[收稿日期：2013-12-16 编校：陈伟/郑英善]
