哮喘患儿血清IL17与IL8水平及相关性分析

　　作者：朱晓萍1， 饶璐飞1， 周志江2， 李小梅1 作者单位：(1.贵阳医学院附院 儿科， 贵州 贵阳550004; 2.贵阳市儿童医院， 贵州 贵阳550003)

　　【摘要】 目的： 通过测定哮喘患儿血清中白细胞介素17(IL17)、白细胞介素8(IL8)水平及相关性，探讨其在哮喘免疫学发病机制中的作用。方法： 采用ELISA法测定50例哮喘患儿及30例健康儿童血清中IL17及IL8水平，并进行相关分析。结果： 哮喘组血清中IL17水平与正常对照组相比明显升高，差异具有显著性(t=2.156，P<0.05);哮喘组血清中IL8水平与正常对照组相比升高，差异具有显著性(t=2.463，P<0.05);直线相关分析表明，哮喘患儿血清中IL17与IL8水平之间无相关性(n=33，r=0234，P>0.05)。结论： IL17及IL8两者均可能参与了哮喘的发病过程。

　　【关键词】 哮喘; 白细胞介素17; 白细胞介素8; 儿童

　　[Abstract] Objective:To determine serum levels of interluekin17 (IL17) and interluekin8 (IL8) in children with asthma and analyze their relationship, and so as to explore the roles of IL17 and IL8 in immune pathogenesis of asthma. Methods: Serum levels of IL17 and IL8 in 50 asthma children and 30 healthy children were detected respectively with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The correlation of serum IL17 with IL8 were analyzed. Results: The serum levels of IL17 and IL8 in children with asthma ( 6.48, 7.98 pg/ml, and 23.45, 25.73 pg/ml) were higher than those of control group ( 5.95, 5.54 pg/ml, and 22.94, 5.41 pg/ml) respectively, and the differences were significant (t=2.156，P﹤0.05, and t=2.463，P﹤0.05). The linear analysis showed that there was no correlation between serum levels of IL17 and IL8 in children with asthma (P>0.05). Conclusions: IL17 and IL8 may be involved in the immune pathogenesis of asthma in children.

　　[Key words]asthma; interluekin17; interluekin8; child

　　支气管哮喘是以气道高反应性(AHR)和慢性气道炎症为特征的变态反应性疾病，是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞等多种炎症细胞和细胞因子参与的慢性气道炎症[1,2],其病因和发病机制十分复杂。哮喘诱发过程中参与的主要免疫因素包括IgE、EOS及诸多细胞因子[3],近来发现白细胞介素17(IL17)和IL8都是哮喘发病相关细胞因子网络的重要成员之一，在T细胞的激活及中性粒细胞在气道的募集、活化方面具有重要作用，均参与了呼吸道的炎症和气道重塑。为探讨IL17及IL8在儿童哮喘发生和发展中的作用，本课题通过应用ELISA法检测哮喘患儿血清中IL17、IL8水平，并分析其间是否有相关性，以揭示它们在哮喘气道炎症中的作用，进一步探讨哮喘的免疫学发病机制，为哮喘的治疗提供新的策略。

　　1材料与方法

　　1.1研究对象选取2008年6月～2009年1月儿科哮喘门诊确诊为哮喘急性发作期患儿74例，其中男40例，女34例，年龄0.83～13岁，平均(528±3.13)岁，按照2003年全国儿童哮喘防治协作组修订的儿童哮喘标准诊断[4]，发病前4周均未使用过糖皮质激素类药物及免疫调节剂;对照组42例为幼儿园健康体检儿童，男24例，女18例，年龄1.00～8.08岁，平均(5.37±2.05)岁，近1个月无急性呼吸道感染，既往无喘息病史，无家族哮喘病史，无个人和家族过敏性疾病史，均无心、肺、肝、肾等重要脏器疾病，肝肾功能检测正常。

　　1.2方法无菌抽取静脉血3 ml，置于干燥无菌试管中静置30 min，以2 000 r/min离心15 min，吸取血清放入Ependoff管中，置于-20 ℃冰箱保存备检。采用双抗夹心ELISA法检测IL17(试剂盒由法国Diaclone 公司提供)及IL8水平(试剂盒由美国欣博盛生物科技有限公司提供)，严格按试剂盒说明书操作。

　　1.3统计学处理所有实验数据采用SPSS 11.5统计软件进行整理与分析，计量资料进行正态性检验，正态分布的数据用(x±s)表示，偏态分布数据用中位数与四分位数间距表示，比较前经变量转换为正态，采用成组设计两样本均数比较的t检验。计数资料间的比较采用卡方检验，两因素之间的相关分析采用直线相关分析方法，检验水准α定为0.05，P<0.05差异有显著性。

　　2结果

　　2.1血清IL17 及IL8水平哮喘组血清IL17 及IL8水平均显著高于正常对照组，差异有显著性(t=2.156，P<0.05; t=2.463，P<0.05)，结果见表1。表1两组儿童血清IL17 及IL8比较

　　2.2哮喘患儿血清IL17及IL8相关性通过Spearson直线相关分析得出，33例哮喘急性发作期患儿血清中IL17与IL8水平之间无相关性(r=0.234，P>0.05)。

　　3讨论

　　支气管哮喘是世界范围内严重威胁公众健康的主要慢性呼吸道炎症性疾病，全世界约有3亿患者[5]，且其患病率呈明显上升趋势，严重影响了患儿的身心健康及生长发育。

　　IL17是由Th17细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞等多种细胞分泌的一种前炎性细胞因子，IL17有强大的招募中性粒细胞及促进多种细胞因子释放的作用，被认为参与了机体多种炎症性疾病的发生，能诱导和激活中性粒细胞在呼吸道的募集，参与呼吸道的炎症，在呼吸系统炎症性疾病的发生发展中起重要作用。目前认为，IL17参与了哮喘气道重塑及气道高反应性。IL8系一种多源性炎性细胞因子，可在TNFα以及IL1的诱导下合成与释放[6]，由单核巨噬细胞产生，其他如T淋巴细胞、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞等亦可在适宜的条件下产生。IL8是重要的强效中性粒细胞趋化因子，且能趋化嗜酸性粒细胞和T细胞在气道黏膜聚集，并激活嗜酸性粒细胞阳离子蛋白，使中性粒细胞和嗜酸性粒细胞脱颗粒，参与哮喘发作期和缓解期的炎症反应，属调节哮喘气道炎症的上调因子[7]。因此其含量水平与临床病情的严重性相关，能在一定程度上反映气道炎症情况，认为 IL8可作哮喘急性发作的标志物[8]。

　　本实验结果表明，哮喘患儿血清IL17和IL8的水平均较正常对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)，与国内文献[9，10]研究结果一致，说明IL17和IL8均参与了哮喘的病理生理过程，推测哮喘患儿IL17升高可能与CD4+T淋巴细胞和嗜酸性粒细胞在哮喘的发病机制中的作用有关。研究表明，Th17细胞在炎症和自身免疫性疾病中有重要作用，其效应因子IL17与哮喘等疾病明显相关[11]。IL17水平的升高不仅与其气道炎症的特征有关，而且与其气道重塑所导致的气流受限有关。此外，哮喘发作期患儿体内IL8产生释放增多，IL8通过与哮喘免疫炎性细胞上的受体结合，趋化和激活炎症细胞，其趋化作用使气道管腔内中性粒细胞聚集及管壁T淋巴细胞浸润，并使其活性增加，促进气道炎症的形成。同时，活化的中性粒细胞自身也产生IL8，使中性粒细胞进一步聚集，形成恶性循环，引起炎症的自身放大反应，导致气道慢性炎症和持续损伤。因此抑制IL17和IL8合成和释放，应用阻断其作用的药物，可望为控制哮喘发作开辟一条新的途径。

　　IL17诱导中性粒细胞的募集主要是通过促进CXC趋化因子，特别是IL8的释放而发挥作用。在哮喘急性发作时，记忆性T细胞激活后分泌IL17，IL17进一步通过刺激气道上皮细胞产生强效中性粒细胞趋化因子IL8，从而使中性粒细胞在气道大量募集并激活，因而IL17被认为是T细胞调节中性粒细胞参与哮喘炎症反应的中介。张晶等[12]报道哮喘急性发作期患者血清IL17和IL8水平明显升高，且与外周血中性粒细胞呈正相关，提示两者均参与了哮喘的发作。本研究通过Spearson直线相关分析得出，哮喘急性发作期患儿血清中IL17与IL8水平之间无相关性(r=0234，P>0.05)，与张晶等[12]报道不一致，原因可能是文献的研究对象是成年人，免疫系统等各方面发育完善，且发病主要与接触过敏原有关;而本组对象是儿童，感染因素和过敏因素都是发病的重要因素，因此分泌的细胞因子也有差异，细胞因子之间的相关性的亦不相同;此外，还有可能与研究对象例数较少有关。

　　综上所述，哮喘是一个复杂的免疫性疾病，众多的细胞因子和炎症介质参与了其发病过程。本研究结果显示，哮喘急性发作期患儿血清中IL17和IL8水平均升高，表明两者均在哮喘的发病过程中起了重要作用，均参与了哮喘炎症发病，但IL17与IL8水平之间无明显相关性。

　　【参考文献】

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